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        髓樣細(xì)胞白血病-1及染色質(zhì)重塑A蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達(dá)**?

        2016-05-09 01:43:27玲,何常*

        潘 玲,何 常*

        (貴州醫(yī)科大學(xué)附院病理科,貴州貴陽(yáng) 550004)

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        髓樣細(xì)胞白血病-1及染色質(zhì)重塑A蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達(dá)**?

        潘玲**,何常***

        (貴州醫(yī)科大學(xué)附院病理科,貴州貴陽(yáng)550004)

        [摘要]目的:探討髓樣細(xì)胞白血病-1基因(Mcl-1)及染色質(zhì)重塑基因A(ARIDIA)蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達(dá)。方法:應(yīng)用免疫組化Envision法檢測(cè)113例卵巢上皮癌(Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13 例)組織、40例卵巢囊腺瘤組織及20例正常卵巢組織中的Mcl-1、ARIDIA蛋白表達(dá),比較2種蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在3種組織和不同分期卵巢上皮癌組織的表達(dá)情況。結(jié)果:卵巢上皮癌組織中Mcl-1蛋白表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于卵巢囊腺瘤和正常組織,而ARIDIA明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織(P<0.05) ; Mcl-1蛋白在卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期的組織中表達(dá)陽(yáng)性率逐漸升高,ARIDIA蛋白表達(dá)陽(yáng)性率逐漸降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:卵巢上皮性癌的發(fā)生、發(fā)展與Mcl-1蛋白表達(dá)升高和ARIDIA蛋白表達(dá)降低有關(guān)。

        [關(guān)鍵詞]細(xì)胞凋亡;抑癌基因;髓樣細(xì)胞白血病-1蛋白;染色質(zhì)重塑基因A蛋白;卵巢腫瘤;免疫組織化學(xué)

        **貴州醫(yī)科大學(xué)病理科2012級(jí)碩士研究生

        ***通信作者E-mail: 2077166911@ qq.com

        網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間: 2016-02-23網(wǎng)絡(luò)出版地址: http: / /www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160223.2104.060.html

        雖然卵巢癌的發(fā)病率次于子宮頸癌和子宮體癌,但其死亡率卻占各類婦科腫瘤的首位[1]。有研究報(bào)道,腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與抗凋亡基因的激活和抑癌基因的失活有關(guān),髓樣細(xì)胞白血病-1基因(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)蛋白是Bcl-2家族的抗凋亡成員,在細(xì)胞周期和死亡程序中起重要作用[2-3]。染色質(zhì)重塑基因A(AT rich interactive domain A,ARIDIA)是參與染色體重塑的基因,是一個(gè)新興的抑癌基因,其蛋白在卵巢透明細(xì)胞癌組織表達(dá)缺失[4]。本研究采用免疫組織化學(xué)Envision法檢測(cè)卵巢上皮癌組織、卵巢囊腺瘤組織及正常卵巢組織中Mcl-1與ARIDIA蛋白的表達(dá)情況,探討Mcl-1與ARIDIA蛋白表達(dá)與卵巢上皮癌的關(guān)系,報(bào)道如下。

        1 對(duì)象與方法

        1.1臨床資料

        收集2012年1月~2014年12月經(jīng)病理確診的113例卵巢上皮性癌患者手術(shù)標(biāo)本,患者41~71歲,平均(60.28±7.57)歲;病程2~7年,平均(4.07±1.55)年;參照2013年國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)分期[5],Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移43例,未轉(zhuǎn)移70例;黏液性66例、漿液性47例;所有患者術(shù)前未行放、化療。選取同時(shí)段和同年齡段正常卵巢組織20例及卵巢囊腺瘤組織40例(包括黏液性25例、漿液性15例)作為研究對(duì)照。

        1.2方法

        所有組織標(biāo)本經(jīng)4%多聚福爾馬林固定,常規(guī)處理,石蠟包埋,4 μm連續(xù)切片。Mcl-1與ARIDIA兔抗人多克隆抗體及Envision試劑盒均購(gòu)自武漢博士德公司。采用免疫組織化學(xué)(Envision)法檢測(cè)Mcl-1與ARIDIA蛋白陽(yáng)性表達(dá),染色過(guò)程按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,Mcl-1與ARIDIA在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核中均有表達(dá),出現(xiàn)棕黃色顆粒記為陽(yáng)性細(xì)胞(見(jiàn)圖1),在高倍鏡(×400)視野下綜合染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞所占比例進(jìn)行半定量測(cè)定。染色強(qiáng)度評(píng)分為不著色記0分,淡黃色者記1分,棕黃色者記2分,深棕色者記3分;每張切片隨機(jī)觀察5個(gè)視野,計(jì)數(shù)500個(gè)細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例進(jìn)行評(píng)分,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<10%記0分,10%~30%記1分,31% ~60%記2分,>60%記3分。兩項(xiàng)評(píng)分相加,0~1.0分為(-),1.1~2.0分為(+),2.1~3.0分為(+ +),3.1~5.0分為(+ + +) ; (-~+)為陰性,(+ +~+ + +)為陽(yáng)性。

        注: A為Mcl-1蛋白,B為ARIDIA蛋白圖1 卵巢上皮癌組織中Mcl-1、ARIDIA表達(dá)(Envision,×400)Fig.1 Mcl-1 and ARIDI positive expression of epithelial ovarian carcinomas tissue

        1.3觀察指標(biāo)

        記錄Mcl-1、ARIDIA蛋白在正常卵巢組織、卵巢囊腺瘤組織及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ期卵巢上皮癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性數(shù),分析Mcl-1、ARIDIA蛋白表達(dá)與卵巢上皮性癌及FIGO分期的關(guān)系。

        1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        應(yīng)用SPSS 15.0軟件分析,計(jì)數(shù)資料采用百分比(%)表示,數(shù)據(jù)比較采取卡方檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        卵巢上皮癌組織中Mcl-1蛋白表達(dá)陽(yáng)性例數(shù)明顯高于卵巢囊腺瘤和正常組織,ARIDIA蛋白表達(dá)陽(yáng)性例數(shù)明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。Mcl-1蛋白在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ期卵巢上皮癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性率逐漸升高,ARIDIA蛋白表達(dá)陽(yáng)性率逐漸降低,兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。提示卵巢上皮性癌患者病情的發(fā)生、發(fā)展與Mcl-1蛋白表達(dá)呈升高、ARIDIA蛋白表達(dá)降低有關(guān)。

        3 討論

        Mcl-1是Bcl-2家族中重要的抗凋亡成員,是通過(guò)線粒體途徑參與細(xì)胞凋亡和增殖過(guò)程的重要分子,基因定位于線粒體外膜,抗凋亡作用主要通過(guò)Bak、Bax、Bad等Bcl-2家族中的促凋亡成員形成異聚體,發(fā)生中和效應(yīng)阻止凋亡的啟動(dòng),抑制細(xì)胞色素C從線粒體上的釋放,Mcl-1蛋白在淋巴瘤、白血病、多發(fā)性骨髓瘤、肝癌、肺癌以及前列腺癌等多種腫瘤組織中表達(dá)升高[2,6-8]。ARIDIA是一個(gè)參與染色體重塑的新興的抑癌基因,定位于1號(hào)染色體lp36.11,ARIDIA蛋白富含A-T序列,分子量約為240 kDa,正常情況下主要參與組織發(fā)育和細(xì)胞分化,在卵巢透明細(xì)胞癌組織表達(dá)缺失[3,8]。研究發(fā)現(xiàn)ARIDIA與卵巢上皮細(xì)胞癌及低度子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生的密切相關(guān),可影響細(xì)胞的凋亡[3,9-10]。

        本研究為探討卵巢上皮性癌的發(fā)生、發(fā)展與細(xì)胞凋亡的關(guān)系,采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)卵巢上皮性癌組織、卵巢囊腺瘤組織及正常卵巢組織中Mcl-1與ARIDIA蛋白的陽(yáng)性表達(dá)情況,同時(shí)分析Mcl-1與ARIDIA蛋白表達(dá)與卵巢上皮性癌臨床分期的關(guān)系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)卵巢上皮性癌上皮性組織中Mcl-1蛋白表達(dá)陽(yáng)性例數(shù)明顯高于卵巢囊腺瘤和正常組織,而ARIDIA蛋白表達(dá)陽(yáng)性例數(shù)明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織(P<0.05) ;在分析卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌組織中的Mcl-1ARIDIA蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的變化時(shí)發(fā)現(xiàn),Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期隨著卵巢上皮性癌的惡性程度的加深,癌組織中的Mcl-1蛋白表達(dá)陽(yáng)性率逐漸升高而ARIDIA蛋白表達(dá)陽(yáng)性率逐漸降低,兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示卵巢上皮性癌的發(fā)生、發(fā)展與Mcl-1蛋白表達(dá)升高和ARIDIA蛋白表達(dá)降低有關(guān)。

        表1 正常卵巢、卵巢囊腺瘤及卵巢上皮癌組織中Mcl-1、ARIDIA蛋白表達(dá)Tab.1 Mcl-1 and ARIDIA protein expression of normal ovaries,ovarian cyst adenoma and ovarian cancer tissues

        表2?、瘛羝诼殉采掀ぐ┙M織中Mcl-1及ARIDIA蛋白表達(dá)Tab.2 Mcl-1,ARIDIA protein expression of ovarian cancer tissue in different clinical stages

        4 參考文獻(xiàn)

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        (2015-11-12收稿,2015-12-24修回)

        中文編輯:戚璐;英文編輯:趙毅

        Expression of Myeloid Cell Leukemia-1and Chromatin Remodeling A Protein in Epithelial Ovarian Carcinomas Tissue

        PAN Lin,HE Chang
        (Department of Pathology,Affiliated Hospital of Guizhou Medical University,Guiyang 550004,Guizhou,China)

        [Abstract]Objective: To investigate expression of myeloid cell leukemia-1(Mcl-1) and chromatin remodeling gene A(ARIDIA) protein in epithelial ovarian carcinomas tissue.Methods: Adopting IHC Envision assay to test Mcl-1 and ARIDIA protein expression of 113 epithelial ovarian carcinomas tissue (42 cases of Phase I,28 cases of Phase Ii,30 cases of Phase III and 13 cases of Phase IV),40 ovarian cystadenoma tissue and 20 healthy ovarian tissue; comparing expression of positive rate of 2 protein expression in 3 different tissues and phases ovarian carcinomas tissues.Results: Mcl-1 protein expression positive rate of ovarian carcinomas tissue was obviously higher than that of epithelial ovarian carcinomas and healthy tissue(P<0.05) ; expression positive rate of Mcl-1 protein in epithelial ovarian carcinomas Phase I,II,III and IV increased gradually,ARIDIA protein expression positive rate decreased gradually,difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion: Occurrence of epithelial ovarian carcinomas and development was correlated with Mcl-1 protein expression increase and ARIDIA protein expression decrease.

        [Key words]apoptosis; tumor suppressor gene; myeloid cell leukemia-1 protein; chromatin remodeling gene A protein; ovarian tumor; immunohistochemistry

        *[基金項(xiàng)目]貴州省科技廳基金(E2010-4)

        [中圖分類號(hào)]R737.31

        [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

        [文章編號(hào)]1000-2707(2016) 02-0155-03

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