張衛(wèi)佳,陳家樹(中山大學(xué)新華學(xué)院藥學(xué)系,廣東廣州510520)
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番茄紅素有效成分的提取工藝及其解酒機理的研究
張衛(wèi)佳,陳家樹
(中山大學(xué)新華學(xué)院藥學(xué)系,廣東廣州510520)
摘要:探討番茄提取物解酒作用機理,為中藥解酒保肝藥物的開發(fā)提供依據(jù)。觀察比較番茄提取物與解酒護肝膠囊對小鼠肝臟勻漿中ADH、SOD的酶活力的影響。結(jié)果表明,番茄提取物能夠明顯提高ADH、SOD活力。番茄紅素提取物通過提高ADH、SOD活力以達到其解酒的作用,并能減緩酒精進入血液中的速度,進而對抗酒精性肝損傷。
關(guān)鍵詞:番茄提取物;ADH;SOD;解酒機理
中國酒文化源遠流長,飲酒成為部分人生活的一種方式,大量或長期飲酒,則易導(dǎo)致急慢性酒精中毒。番茄紅素主要是通過升高肝和胃組織的乙醇脫氫酶活性,促進乙醇代謝,降低血清乙醇濃度,從而起到解酒的作用,同時醉酒時人體會產(chǎn)生大量的自由基,從而讓人產(chǎn)生頭暈、目眩等不良反應(yīng),超氧化物歧化酶(SOD)可以有效清除這些自由基,另外還原型谷胱甘肽含有一個自由巰基,也是體內(nèi)一個重要的自由基清除劑,目前關(guān)于番茄的解酒效果研究的文獻比較多,但真正從解酒作用機制方面展開研究的還不多,所以本實驗對番茄提取物解酒作用機制進行初步的探討。
1.1材料與儀器
番茄藥材:購于廣州市華潤萬家超市;北京紅星二鍋頭酒52 %vol,北京紅星股份有限公司;護肝解酒片,黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,批號,黑衛(wèi)健審食準字(2007)第0403號;氯化鈉注射液,廣州聯(lián)方試劑公司,批號,200906043;氧化型輔酶Ⅰ,廣州聯(lián)方試劑公司;SOD測定試劑盒,廣州聯(lián)方試劑公司;實驗動物:昆明種小鼠,雄性,體重(18±2) g,由南方醫(yī)科大學(xué)動物研究室提供。
儀器設(shè)備:GC-2010型氣相色譜儀,日本島津公司;數(shù)顯恒溫水浴鍋( KW-1000D),上海梅香儀器有限公司;AR1140/C型電子天平,美國奧豪斯(上海)公司;GZX-9140電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海博達實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上海亞榮生化儀器廠;低溫冷凍干燥箱,上海杰技環(huán)境實驗設(shè)備有限公司;紫外分光光度儀TU-1901北京普析通用;臺式高速冷凍離心機,長沙平凡儀器儀表有限公司;組織勻漿器。
1.2供試品制備
1.2.1番茄粗提物的制備
番茄制漿,離心脫水→番茄濕物料用無水乙醇處理30 min→正己烷為有機溶劑進行超聲處理→得初產(chǎn)品,減壓回收乙醇至浸膏,冷凍干燥,得到番茄-乙醇粗提物粉末,該粉末1 g相當于10 g原生藥。
1.2.2番茄總異黃酮提取物
取一定量番茄-乙醇粗提物粉末,加水溶解,配制成4 mg/mL的溶液,上樣于X-5型大孔樹脂,用75 %vol乙醇洗脫并收集洗脫液,將所得到的洗脫液再經(jīng)減壓濃縮揮去乙醇,得到的浸膏經(jīng)冷凍干燥即為番茄總異黃酮提取物粉末,該粉末1 g相當于100 g原生藥。
1.3實驗方法
番茄提取物對急性酒精中毒小鼠肝臟中ADH與SOD酶活力以及GSH和MDA含量的影響。取小鼠60只,隨機分成5組,每組12只,分別為番茄粗提物組、番茄總異黃酮提取組、陽性對照組、模型對照組、空白對照組。小鼠禁食15 h后,除空白對照組灌胃給藥生理鹽水外,其他各組均灌胃52 %vol紅星二鍋頭0.03 mL/g。于灌胃52 %vol紅星二鍋頭前30 min,給藥組分別給藥,劑量為:番茄粗提物50.400 g/kg,番茄總異黃酮提取物9.000 g/kg,陽性對照組灌胃清護肝解酒片2.500 g/kg,模型對照組灌胃等量的生理鹽水,空白對照組灌胃等量蒸餾水。酒后2 h處死各組小鼠,取肝臟。按照1 g肝臟∶4 mL蔗糖溶液的比例量取蔗糖溶液。肝臟先用生理鹽水沖洗,后用蔗糖溶液沖洗,再放入已稱量好的蔗糖溶液中,在冰水浴中剪碎,搖勻,把勻漿液放入10 mL離心管中,以5000 r/min離心12 min,以除去細胞碎片、紅細胞和核,小心地取出上清液,以9000 r/min再次離心10 min,得上清液用于ADH活力的測定,整個離心過程保持在0~4℃溫度下進行[1]。
5組小鼠分別于計時后的5min、15min、30min、45min、60 min、75 min摘取眼球取血,采用氣相色譜法測定全血中乙醇質(zhì)量濃度;同時取肝臟和胃組織冷凍保存,測定組織中乙醇脫氫酶(ADH)酶活力、超氧化物歧化酶(SOD)酶活力、還原型谷胱甘肽(GSH)含量[2]。
1.4數(shù)據(jù)處理
實驗數(shù)據(jù)采用IBM SPSS Statistics軟件進行統(tǒng)計分析,結(jié)果用±s表示,利用Duncan極差檢驗評價樣品平均值間的顯著性差異(P<0.05),應(yīng)用Origin 8.6統(tǒng)計學(xué)軟件繪圖。
2.1小鼠血液中乙醇含量
小鼠血液中乙醇質(zhì)量濃度的變化見表1。
由表1可知,空白組小鼠血液中乙醇含量在5 min時為最大值,而給藥組在30 min達到最大值,同時,給藥組每一時間點血液中乙醇含量均低于空白組,經(jīng)計算5 min時給藥組小鼠血液中乙醇含量與空白組相比降低59.43 %;15~45 min之間,給藥組小鼠血液中乙醇含量隨時間變化不明顯,而空白組小鼠血液中乙醇含量隨時間延長而迅速下降。這些結(jié)果表明,給藥組能夠推遲乙醇進入血液的速率,同時減少進入血液的乙醇,這可能與番茄紅素影響胃腸對乙醇的吸收有關(guān)。
2.2小鼠肝臟中ADH活性
表1 小鼠血液中乙醇含量 (mg/100 mL)
表2 番茄紅素提取物對急性酒精中毒小鼠肝臟中ADH活力的影響
小鼠肝臟中ADH活性測定結(jié)果見表2。與空白組比較,給藥組小鼠胃中ADH活性顯著升高,表明番茄紅素能夠使胃中ADH活性增強,該結(jié)果與血液中乙醇含量測定結(jié)果相一致,表明番茄紅素可能屬于胃腸吸收抑制劑型解酒食品,通過提高體內(nèi)ADH活性,抑制胃腸對酒精的吸收作用,減少血液中酒精含量,從而降低酒精對機體的損害作用。
2.3小鼠肝臟中SOD活性
表3 番茄紅素提取物對急性酒精中毒小鼠肝臟中SOD活力的影響
酒精代謝過程中會產(chǎn)生大量自由基,這些自由基會形成自由基反應(yīng),最終造成暈眩、頭痛、局部皮膚過敏、腸胃不適等酒后癥狀,SOD是人體重要的清除自由基的酶,小鼠肝中SOD活性結(jié)果見表3。與空白組相比,模型組SOD活性顯著降低,這是因為酒精代謝中生成中間產(chǎn)物能夠破壞SOD活性中心的金屬配位場,引起酶受損,導(dǎo)致酶活力下降。相對于模型組,給藥組均可顯著提高肝臟中SOD活性,從而快速清除自由基,減慢自由基反應(yīng),減輕酒后不良癥狀。
由表2、表3數(shù)據(jù)可知,番茄粗提物與番茄總異黃酮均可增強ADH、SOD的活性,與模型組相比,有顯著性差異(P<0.01)。
番茄作為我國的傳統(tǒng)食品,其解酒作用越來越受到人們重視。為探討其解酒機理進行了上述研究,結(jié)果表明,在ADH和SOD活力測定實驗中,番茄粗提物與番茄總異黃酮與模型組相比,活力顯著提高,具有統(tǒng)計學(xué)意義,說明番茄紅素通過提高ADH和SOD的活性,加快乙醇的代謝速率,起到解酒作用,另外,番茄紅素能夠有效地降低血液中乙醇質(zhì)量濃度,具有良好的解酒作用。
參考文獻:
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酒博會首設(shè)主賓國格魯吉亞館隆重開館
本刊訊:2016年3月19日上午,2016年中國國際酒業(yè)博覽會主賓國——格魯吉亞展館開館儀式隆重舉行。中國酒業(yè)協(xié)會常務(wù)副理事長王琦,格魯吉亞國家葡萄酒局局長喬治·撒瑪尼什維利在開館儀式上致辭。
王琦指出,中國葡萄酒行業(yè)在經(jīng)過3年的調(diào)整后,于2015年出現(xiàn)復(fù)蘇跡象,“一帶一路”戰(zhàn)略的實施也將推動沿線各國實現(xiàn)經(jīng)濟政策協(xié)調(diào),開展更大范圍、更高水平、更深層次的區(qū)域合作。中格雙方于2015年12月10日在北京簽署啟動自由貿(mào)易協(xié)定談判的諒解備忘錄,預(yù)計格魯吉亞將成為“一帶一路”上首個對華簽署自貿(mào)協(xié)定的葡萄酒出口國,這將極大地提高格魯吉亞葡萄酒在中國市場上的影響力。中國酒業(yè)協(xié)會將繼續(xù)推動中格兩國在葡萄酒行業(yè)的交流與合作,加強雙方行業(yè)、企業(yè)間的信息交流、技術(shù)合作和文化推廣。
喬治·撒瑪尼什維利表示,格魯吉亞與中國都有著悠久的歷史和燦爛的文化,并珍視我們深厚的傳統(tǒng)。近年來,格魯吉亞葡萄酒對華出口呈上升趨勢,兩國的關(guān)系也進一步增強。借助此次酒博會,我們將會不斷加強同中國酒業(yè)協(xié)會、瀘州市政府及優(yōu)秀釀酒企業(yè)之間的合作。葡萄酒必將成為促進和平,加強兩國文化聯(lián)系及人民友誼的有力工具。
19日下午,格魯吉亞葡萄酒專場品鑒會在瀘州國際會展中心展館C區(qū)品鑒活動區(qū)舉行,由逸香高級認證講師張沛老師與現(xiàn)場的60余位嘉賓一起探究格魯吉亞8000年傳統(tǒng)陶罐釀酒工藝與現(xiàn)代釀酒技術(shù)的碰撞。品鑒會上,嘉賓們了解了格魯吉亞的歷史和文化,還品嘗了格魯吉亞國家葡萄酒局和格魯吉亞葡萄酒(中國)推廣中心向大家推介的6款獨特酒品。
酒博會期間,位于ET020展位的格魯吉亞國家館,將展示以本土葡萄品種釀制的10個品牌、來自國際地理標識保護產(chǎn)區(qū)的格魯吉亞葡萄酒。(黃筱鸝)
Extraction of Lycopene Active Ingredients and Study on Its Hangover-Cure Mechanism
ZHANG Weijia and CHEN Jiashu
(Department of Pharmacology, Xinhua College, Sun Yat-sen University, Guangzhou, Guangdong 510520, China)
Abstract:The hangover-cure mechanism of tomato extracts was explored to provide reference for the development of traditional Chinese medicine with hangover-cure and hepato-protective functions. In the experiments, the effects of tomato extracts and hangover-cure & hepato-protective capsule on the activities of ADH and SOD in liver homogenates were compared. The results suggested that, tomato extracts could significantly improve ADH and SOD vitality and further achieve satisfactory hangover-cure effects, and slow down the speed of alcohol into the bloodstream and further prevent alcohol-induced liver damage.
Key words:tomato extract;ADH; SOD; hangover-cure mechanism
作者簡介:張衛(wèi)佳(1980-),男,碩士研究生,講師,研究方向:食品研究與開發(fā)。
收稿日期:2015-12-21
DOI:10.13746/j.njkj.2015471
中圖分類號:TS971;R285;R595.6
文獻標識碼:A
文章編號:1001-9286(2016)04-0120-02
優(yōu)先數(shù)字出版時間:2016-02-02;地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160202.1320.001.html。