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        地黃和胃口服液對(duì)大鼠血液及生化指標(biāo)的影響

        2016-05-05 06:30:11宋志勇
        環(huán)球中醫(yī)藥 2016年4期
        關(guān)鍵詞:口服液批號(hào)生化

        宋志勇

        064199 唐山,玉田縣中醫(yī)醫(yī)院制劑科

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        地黃和胃口服液對(duì)大鼠血液及生化指標(biāo)的影響

        宋志勇

        064199 唐山,玉田縣中醫(yī)醫(yī)院制劑科

        【摘要】目的探討地黃和胃口服液對(duì)大鼠體重、血液、生化指標(biāo)的影響,為臨床用藥提供參考。 方法將大鼠隨機(jī)分為4組,分別為對(duì)照組、地黃和胃口服液低劑量組(1.3 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的16.88倍)、地黃和胃口服液中劑量組(2.6 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的33.76倍)、地黃和胃口服液高劑量組(5.2 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的67.52倍),每組20只。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,開(kāi)始灌胃給藥(生理鹽水),各劑量組大鼠分別于每天上午8點(diǎn)至10點(diǎn)、下午14點(diǎn)至16點(diǎn)灌胃,每周定時(shí)給藥7天,并稱(chēng)重1次,根據(jù)體重變化調(diào)整給藥量,連續(xù)給藥3個(gè)月 。各組于給藥結(jié)束后取10只進(jìn)行檢查,剩余10只大鼠作恢復(fù)期觀察2周。 結(jié)果地黃和胃口服液各劑量組(1.3 g/kg、2.6 g/kg、5.2 g/kg)大鼠在3個(gè)月試驗(yàn)期及恢復(fù)期內(nèi),體重增長(zhǎng)與對(duì)照組基本一致。對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)、主要臟器系數(shù)的影響,均在正常生理范圍之內(nèi),其他各組均未見(jiàn)明顯差異(P<0.05)。結(jié)論地黃和胃口服液對(duì)大鼠未見(jiàn)明顯毒性作用。

        【關(guān)鍵詞】地黃和胃口服液;大鼠;毒性

        地黃和胃口服液為河北省玉田縣中醫(yī)醫(yī)院中藥制劑,由黃芪、熟地黃、甘草、黃連等中藥組成。具有益氣滋陰、清胃降逆之功效,用于陰虛燥熱、濕濁內(nèi)生、胃失和降所致的口干、煩渴多飲,周身乏力及糖尿病并發(fā)早期酮癥酸中毒的治療。前期本團(tuán)隊(duì)通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定了地黃和胃口服液對(duì)小鼠的急性毒性作用[1],本實(shí)驗(yàn)是以地黃和胃口服液對(duì)大鼠血液及生化指標(biāo)的影響為出發(fā)點(diǎn),望對(duì)今后的臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

        1材料與方法

        1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        SD大鼠,清潔級(jí),80只,雌雄各半,體質(zhì)量為90~100 g,購(gòu)于河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[許可證號(hào):SYXK(冀)2011-0047];飼養(yǎng)在室溫20~23℃,相對(duì)濕度40%~60%,光照時(shí)間12 h/d的環(huán)境下。動(dòng)物飼料由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物可自由飲水。

        1.2實(shí)驗(yàn)試劑

        丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):14-0102P;天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase,AST)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):14-0617;堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):14-0208P;總膽紅素(total bilirubin,T-BIL)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):14-0707;總蛋白(total protein,TP)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):14-0207;白蛋白(albumin,ALB)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):14-0109;肌酐(creatinine,Crea)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):13-1104P;尿素氮(urea nitrogen,Urea)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):140618P;總膽固醇(total cholesterol,CHO)試劑盒,北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品,批號(hào):14-0106P。

        地黃和胃口服液,藥物組成:黃芪30 g、葛根15 g、白芍15 g、竹茹10 g、熟地黃20 g、玄參15 g、黃芩10 g、蒼術(shù)15 g,購(gòu)于玉田縣中醫(yī)醫(yī)院,批號(hào):20141212。

        1.3實(shí)驗(yàn)儀器

        動(dòng)物血液分析儀(HEMAVET 950),美國(guó)DREW;血凝儀(C2000-4),北京普利生儀器有限公司;全自動(dòng)生化分析儀(日立7080型),日立高新技術(shù)公司;OLYMPUS生物顯微鏡,日本。

        1.4給藥方法

        1.4.1劑量設(shè)置低劑量組(1.3 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的16.88倍);中劑量組(2.6 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的33.76倍);大劑量組(5.2 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的67.52倍)。

        1.4.2給藥途徑灌胃,與擬臨床途徑一致。

        1.4.3給藥頻率每周定時(shí)給藥7天,每天2次。

        1.4.4試驗(yàn)過(guò)程將大鼠隨機(jī)分為4組,分別為對(duì)照組、地黃和胃口服液低劑量組、地黃和胃口服液中劑量組、地黃和胃口服液高劑量組,每組20只。適應(yīng)1周后,開(kāi)始給藥(生理鹽水)。各組實(shí)驗(yàn)大鼠分別于每天上午8點(diǎn)至10點(diǎn)、下午14點(diǎn)至16點(diǎn)灌胃給予相應(yīng)濃度的實(shí)驗(yàn)藥物;對(duì)照組大鼠給予等量的生理鹽水(1.0 mL/100 g),每周定時(shí)給藥7天,并稱(chēng)重1次,根據(jù)體質(zhì)量變化調(diào)整給藥量,連續(xù)給藥3個(gè)月。各組于給藥結(jié)束后取10只進(jìn)行檢查,剩余10只大鼠作恢復(fù)期觀察2周[2-4]。

        1.5觀測(cè)指標(biāo)及檢測(cè)方法

        (1)一般狀態(tài)觀察;(2)體重變化;(3)血液學(xué)檢查:經(jīng)腹主動(dòng)脈取血查血小板數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、白細(xì)胞數(shù);(4)血液生化指標(biāo):經(jīng)腹主動(dòng)脈取血測(cè)血糖(GLU,試紙法),然后分離血清,檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT,IFCC法)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST,IFCC法)、堿性磷酸酶(ALP,IFCC法)、總膽紅素(T-BIL,重氮法)、尿素(Urea,酶法)、肌酐(Crea,酶法)、總蛋白(TP,雙縮脲法)、白蛋白(ALB,溴甲酚綠法)、總膽固醇(T-CHO,CHOD-PAP法);(5)臟器系數(shù):心、肝、脾、肺、腎、腦、腎上腺、胸腺、附睪、睪丸、卵巢、子宮。

        1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        2結(jié)果

        2.1一般狀況

        各組大鼠在3個(gè)月試驗(yàn)期及恢復(fù)期內(nèi),活動(dòng)及精神狀態(tài)良好,毛色白且有光澤,大、小便正常,耳、鼻、眼未見(jiàn)異常分泌物,未出現(xiàn)死亡。

        2.2對(duì)大鼠體重的影響

        從結(jié)果可見(jiàn),地黃和胃口服液各劑量組大鼠體重增長(zhǎng)與對(duì)照組基本一致,見(jiàn)表1。

        表1 各組大鼠體重變化

        表2 實(shí)驗(yàn)期各組大鼠血液學(xué)指標(biāo)

        注: 與對(duì)照組比較,aP<0.05,bP<0.01。

        表3 實(shí)驗(yàn)期各組大鼠血液生化指標(biāo)

        注: 與對(duì)照組比較,aP<0.05,bP<0.01。

        表4 恢復(fù)期各組大鼠血液學(xué)指標(biāo)

        注: 與對(duì)照組比較,aP<0.05,bP<0.01。

        表5 恢復(fù)期各組大鼠血液生化指標(biāo)±s, n=10)

        2.3對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響

        從結(jié)果可見(jiàn),地黃和胃口服液各劑量組紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)均在正常生理范圍之內(nèi),其他各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P>0.05),見(jiàn)表2。

        2.4對(duì)大鼠血液生化指標(biāo)的影響

        從結(jié)果可見(jiàn),低劑量組大鼠TP、CL水平較對(duì)照組升高(P<0.05),Crea水平較對(duì)照組降低(P<0.01),但均在正常生理范圍之內(nèi),其他各項(xiàng)生化指標(biāo)與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異;中劑量組大鼠T-BIL、TG水平較對(duì)照組升高(P<0.05),但均在正常生理范圍之內(nèi),其他各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P>0.05);高劑量組大鼠各項(xiàng)生化指標(biāo)與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P>0.05),見(jiàn)表3。

        2.5對(duì)大鼠主要臟器系數(shù)的影響

        各組大鼠各臟器系數(shù)均無(wú)明顯差異。

        2.6恢復(fù)期觀察

        血液學(xué)指標(biāo):低劑量組、中劑量組、高劑量組大鼠紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白較對(duì)照組增加(P<0.05),但均在正常生理范圍之內(nèi),其他各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P>0.05),見(jiàn)表4。生化指標(biāo):低劑量組、中劑量組、高劑量組大鼠各項(xiàng)生化指標(biāo)均未見(jiàn)明顯差異(P>0.05)。臟器系數(shù):恢復(fù)期各組大鼠臟器系數(shù)均無(wú)明顯差異(P>0.05),見(jiàn)表5。

        3討論

        地黃和胃口服液臨床用于糖尿病并發(fā)早期酮癥酸中毒的治療,方中地黃清熱涼血,養(yǎng)陰生津,用于津傷口渴、內(nèi)熱消渴;玄參清熱涼血,黃芩清熱瀉火解毒,能清上焦、中焦之熱;上述藥物合用以滋陰生津、涼血清熱。熟地黃、白芍補(bǔ)血滋陰,用于腎陰不足的消渴;葛根生津止渴,用于熱病口渴、陰虛消渴;黃芪補(bǔ)氣升陽(yáng),用于氣虛津虧的消渴,能補(bǔ)氣生津以止渴;白術(shù)健脾補(bǔ)氣;上述滋陰藥與補(bǔ)氣藥合用起到氣陰雙補(bǔ)效果。竹茹除煩止嘔,用于胃熱嘔吐;全方共奏益氣滋陰、清胃降逆之功效。前期實(shí)驗(yàn)表明地黃和胃口服液對(duì)糖尿病大鼠糖代謝有明顯的改善作用[5],實(shí)驗(yàn)中地黃和胃口服液低劑量組(1.3 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的16.88倍),地黃和胃口服液中劑量組(2.6 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的33.76倍),地黃和胃口服液高劑量組(5.2 g/kg,相當(dāng)于臨床用藥的67.52倍)各組大鼠在3個(gè)月試驗(yàn)期及恢復(fù)期內(nèi),體重增長(zhǎng)與對(duì)照組基本一致。對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)、主要臟器系數(shù)的影響,均在正常生理范圍之內(nèi),其他各組均未見(jiàn)明顯差異(P>0.05)。結(jié)果表明:地黃和胃口服液(1.3 g/kg、2.6 g/kg、5.2 g/kg)連續(xù)3個(gè)月灌胃給藥無(wú)明顯毒性反應(yīng),其無(wú)毒反應(yīng)劑量為5.2 g/(kg·d),可推薦臨床使用。本實(shí)驗(yàn)為地黃和胃口服液用于臨床提供了理論基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

        參考文獻(xiàn)

        [1]宋志勇,王蕊,張金鳳,等.地黃和胃口服液對(duì)小鼠的急性毒性實(shí)驗(yàn)[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥 ,2014, 33(35) :110.

        [2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:112-120.

        [3]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥政管理局.中藥西藥研究指南[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1994:203-205.

        [4]王盟,孫清海,劉衛(wèi).鉤藤總堿緩釋滴丸的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)研究[J].國(guó)際中醫(yī)中藥雜志,2014, 36(10):905-908.

        [5]宋志勇.地黃和胃口服液對(duì)糖尿病大鼠糖耐量的改善作用[J].河北中醫(yī),2014,36(7):1074-1075.

        (本文編輯: 韓虹娟)

        The effect ofDihuangHeweioral liquid on the blood and biochemical criterion of rats

        SONGZhi-yong.

        HebeiProvinceYutianCountyHospitalofTraditionalChineseMedicinePreparationDepartment,Tangshan064199,China

        【Abstract】ObjectiveTo explore the effect of Dihuang Hewei oral liquid on the weight, blood and biochemical criterion of rats, and to provide a reference for clinical. MethodsThe rats were ramdomly divided into control group, Dihuang Hewei oral liquid low group(1.3 g/kg, equivalent to 16.88 times of clinical application), Dihuang Hewei oral liquid middle group (2.6 g/kg, equivalent to 33.76 times of clinical application), Dihuang Hewei oral liquid high group (5.2 g/kg, equivalent to 67.52 times of clinical application), 20 in each. After 1 week of adaptation, the rats were given medicine (water). The rats were received gavage at 8 to 10 in the morning and 14 to 16 in the afternoon. The medicine was administrated for 7 days and the rats were weighed once a week. The dose should be adjusted according to the change of weight. This process should last for three months. After 3 months of treatment, 10 rats were taken for examination, and the remaining 10 rats were observed for 2 weeks. ResultsThe weight growth of rats in all Dihuang Hewei oral liquid (1.3g/kg、2.6g/kg、5.2g/kg ) groups were similar to the control group at the 3 months of experiment period and recovery period. The effect on the haematological index, blood biochemical index and main organ coefficients of the rats were all in normal physiological range. No significant difference was found in other groups(P<0.05). ConclusionDihuang Hewei oral liquid has no obvious toxic effects on rats.

        【Key words】Dihuanghewei oral liquid;Rats;Toxicity

        (收稿日期:2015-09-05)

        Corresponding author:SONG Zhi-yong,E-mail:szy6159645@163.com

        【中圖分類(lèi)號(hào)】R285.5

        【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

        doi:10.3969/j.issn.1674-1749.2016.04.002

        作者簡(jiǎn)介:宋志勇(1963- ),本科,副主任藥師。研究方向:中藥制劑。E-mail:szy6159645@163.com

        基金項(xiàng)目:河北省中醫(yī)藥管理局2015年度科研計(jì)劃項(xiàng)目(2015256)

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