杜瑋璐

【摘要】 目的 探討獻(xiàn)血者酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA法）檢測(cè)乙型肝炎表面抗原（HBsAg）為灰區(qū)標(biāo)本采用中和試驗(yàn)確認(rèn)情況。方法 260例ELISA法檢測(cè)HBsAg灰區(qū)標(biāo)本（0.70.05）；C組陽(yáng)性率顯著高于A組和B組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；雙試劑灰區(qū)確認(rèn)陽(yáng)性率高于單試劑灰區(qū)， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 ELISA法檢測(cè)HBsAg存在一定程度的漏檢， 采用中和試驗(yàn)確認(rèn)可減少HBsAg的漏檢及提高血液安全， 避免血液資源的浪費(fèi)。

【關(guān)鍵詞】 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法；乙型肝炎表面抗原；灰區(qū)標(biāo)本；中和試驗(yàn)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.11.208

乙型肝炎為一種常見主要經(jīng)血液傳播的傳染性疾病， 流行病學(xué)調(diào)查顯示， 我國(guó)自然人群HBsAg陽(yáng)性率約為7.2%。ELISA法檢測(cè)HBsAg是目前采供血機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目之一， 但因方法學(xué)局限性， 對(duì)于一些處于臨界值附近的結(jié)果常難以作出準(zhǔn)確判讀[1]。為提高血液安全， 近年來， 本站對(duì)部分ELISA法檢測(cè)HBsAg結(jié)果呈灰區(qū)的標(biāo)本進(jìn)行中和確認(rèn)試驗(yàn)， 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 選取本站2013年8月～2015年7月260例ELISA法檢測(cè)HBsAg灰區(qū)標(biāo)本（0.7

1. 2 試劑與方法 ELISA法HBsAg檢測(cè)試劑盒由廈門新創(chuàng)生物技術(shù)有限公司提供， HBsAg確認(rèn)試劑由珠海麗珠生物技術(shù)有限公司提供， 質(zhì)控血清（0.2 IU/ml）由北京萬泰生物技術(shù)有限公司提供， 所有檢測(cè)試劑均在有效期內(nèi)使用， 檢測(cè)嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作和判讀結(jié)果。采用ELISA法對(duì)獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)， 對(duì)灰區(qū)標(biāo)本采用同種試劑雙孔復(fù)試， 結(jié)果仍為灰區(qū)者， 采用中和試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)， 中和試驗(yàn)≥50%結(jié)果判為陽(yáng)性。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 HBsAg灰區(qū)標(biāo)本不同S/CO值確認(rèn)結(jié)果 A、B、C組陽(yáng)性率分別為3.09%、5.56%和13.70%， A組陽(yáng)性率與B組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；C組陽(yáng)性率顯著高于A組和B組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 不同灰區(qū)標(biāo)本確認(rèn)結(jié)果 單、雙試劑灰區(qū)經(jīng)中和試驗(yàn)確認(rèn)后， 陽(yáng)性率分別為6.22%和21.05%， 雙試劑灰區(qū)確認(rèn)陽(yáng)性率高于單試劑灰區(qū)， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

乙型肝炎是一種目前我國(guó)危害最嚴(yán)重及流行最為廣泛的病毒性肝炎， 乙型肝炎病毒（HBV）感染可引起患者肝臟慢性炎性壞死、纖維化和肝硬化， 部分感染者甚至可進(jìn)展為肝細(xì)胞癌。HBsAg是臨床診斷HBV感染的重要標(biāo)志物， ELISA法因其操作簡(jiǎn)單、靈敏度和特異性較高、成本低廉及適于批量自動(dòng)化檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)， 現(xiàn)如今已廣泛應(yīng)用于乙型肝炎的臨床診斷和采供血機(jī)構(gòu)血液篩查， 但ELISA法檢測(cè)易受試劑、標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、檢驗(yàn)操作及HD-HOOK效應(yīng)等因素的影響， 常造成假陽(yáng)性結(jié)果， 使得一些處于臨界值附近的標(biāo)本常不能做出準(zhǔn)確診斷， 且目前國(guó)內(nèi)對(duì)于免疫檢測(cè)試劑灰區(qū)的設(shè)置尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)， 不同血站初篩實(shí)驗(yàn)室常根據(jù)自己的情況設(shè)置灰區(qū)范圍， 以最大限度剔除可疑血樣， 防止陽(yáng)性標(biāo)本的漏檢和確保輸血安全[2]。

本文研究結(jié)果顯示， 260例灰區(qū)標(biāo)本經(jīng)中和試驗(yàn)確認(rèn)， 共檢出18例（6.92%）HBsAg陽(yáng)性， 表明ELISA法檢測(cè)HBsAg為陰性的獻(xiàn)血者中部分人群血清中存在乙型肝炎病毒感染。進(jìn)一步分析顯示， A組（0.70.05）；C組（0.90

綜上所述， 為避免血液資源的浪費(fèi)， 提高輸血安全以及更好的對(duì)獻(xiàn)血者負(fù)責(zé)， 對(duì)ELISA法檢測(cè)處于灰區(qū)標(biāo)本進(jìn)行中和試驗(yàn)確認(rèn)， 可在一定程度上降低輸血傳播HBV的殘余風(fēng)險(xiǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 陳顯， 胡文佳， 黃成垠， 等.獻(xiàn)血者ELISA檢測(cè)為灰區(qū)標(biāo)本的確認(rèn)試驗(yàn)與核酸情況分析.中國(guó)輸血雜志， 2015， 28（2）：198-199.

[2] 李金明.感染性疾病血清學(xué)檢驗(yàn)中應(yīng)重視對(duì)弱反應(yīng)性標(biāo)本的確認(rèn).中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2006， 29（7）：577-580.

[3] 張秀慧， 余加宏， 鐘政榮， 等. ELISA法檢測(cè)HBsAg灰區(qū)和單試劑反應(yīng)性樣本的確認(rèn)結(jié)果分析.臨床輸血與檢驗(yàn)， 2015， 17（3）：224-226.

[收稿日期：2015-12-24]