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        美藤果油增強(qiáng)免疫力的試驗(yàn)研究

        2016-05-02 00:58:19蘇風(fēng)龍
        現(xiàn)代食品 2016年16期
        關(guān)鍵詞:果油白介素不飽和

        ◎李 慧,金 紅,王 曄,蘇風(fēng)龍

        (北京頤興堂生物科技有限公司,北京 100022)

        美藤果產(chǎn)自于南美洲印加地區(qū),在該地區(qū)已有千百年食用美藤果的歷史[1]。美藤果油是經(jīng)美藤種子榨取提煉出的一類植物油,美藤果油中富含大量的不飽和脂肪酸、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[2]。在美藤果油中不飽和脂肪酸的比例超過(guò)90%以上,其中ω-3與ω-4的比例為1∶0.75,與人體的吸收比例非常接近。相關(guān)研究指出不飽和脂肪酸與免疫機(jī)能有關(guān)[3],但是有關(guān)美藤果油與免疫能力的相關(guān)報(bào)道較少,為了探究美藤果油與免疫能力的關(guān)系,做了相關(guān)研究,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

        雄性健康Wistar大鼠20只,雄性高血脂Wistar大鼠20只,體重(200±10)g,由北京市第一醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。試驗(yàn)前,為使大鼠適應(yīng)環(huán)境將大鼠放在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)一周,隨后按照隨機(jī)法將健康Wistar大鼠分為實(shí)驗(yàn)1組和對(duì)照1組,將雄性高血脂Wistar大鼠分為實(shí)驗(yàn)2組和對(duì)照2組,每組10只。

        1.2 飼料配制

        對(duì)照1、2組大鼠使用普通大鼠飼料,實(shí)驗(yàn)1、2組大鼠在對(duì)照組基礎(chǔ)上,每百克飼料中混合7 g美藤果油(購(gòu)自于西雙版納印奇生物資源開(kāi)發(fā)有限公司,批號(hào):20140204)。

        1.3 試驗(yàn)方法

        1.3.1 試驗(yàn)儀器

        24、96孔培養(yǎng)板(上海臥宏生物科技有限公司),高速離心機(jī)(張家港市中沃機(jī)械有限公司),全自動(dòng)生化儀(普朗醫(yī)療器械有限公司)。

        1.3.2 試驗(yàn)方法

        4組大鼠連續(xù)飼養(yǎng)10周。飼養(yǎng)結(jié)束后,將大鼠禁食12 h,無(wú)菌取出脾臟分離獲得脾淋巴細(xì)胞。

        一是測(cè)定脾淋巴細(xì)胞增殖活性[4,5]。將在無(wú)菌條件下取出的脾臟碾碎并制作成單個(gè)細(xì)胞懸液,將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為4×109個(gè)/L。將調(diào)整后的細(xì)胞懸液加入96孔平底板進(jìn)行培養(yǎng),每孔加入200 μL,共加入8孔,將8孔分為陽(yáng)性孔和陰性孔,其中陽(yáng)性孔4孔,其中每孔加入25 μL濃度為50 mg/L的刀豆素(ConA),陰性孔也4孔則不加入ConA,加好后的平地培養(yǎng)板置于CO2培養(yǎng)箱,在37 ℃溫度下培養(yǎng)48 h。在培養(yǎng)結(jié)束前4 h,將10 μL濃度為5 g/L的MTT10加入96孔平底培養(yǎng)板的每個(gè)孔中,在培養(yǎng)結(jié)束前2 h,將100 μL緩沖液加入各個(gè)孔中用于測(cè)定光密度,加完后開(kāi)始測(cè)定光密度。其中,T淋巴細(xì)胞的增殖能力用刺激指數(shù)(Stimulation Index,SI)來(lái)反映。SI=ConA刺激的陽(yáng)性孔的平均光密度值/ConA未刺激的陰性孔的平均光密度值。

        二是白介素-2、4(interleukin,IL-2,IL-4)測(cè)定。將淋巴細(xì)胞懸液分別加入24孔平底培養(yǎng)板,每孔1 mL,隨后再向每孔加入100 μL濃度為50 mg/L的ConA,放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),溫度37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間48 h。培養(yǎng)結(jié)束后,將培養(yǎng)板中的淋巴細(xì)胞上清液在無(wú)菌條件下吸取后,載分別裝入0.5 mL EP管中,置入-20 ℃的冰箱中保存,用于IL-2和IL-4含量的檢測(cè)。采用ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)檢測(cè)IL-2和IL-4的含量。

        1.4 數(shù)據(jù)記錄與統(tǒng)計(jì)分析

        飼養(yǎng)期間觀察4組大鼠的活動(dòng)情況及死亡情況并記錄;對(duì)4組大鼠淋巴細(xì)胞的增殖能力用刺激指數(shù)及白介素-2、4結(jié)果進(jìn)行記錄。

        本次研究所獲得數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0進(jìn)行處理,組件比較采用t檢驗(yàn),以(x±s)表示,以P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)存在差異。

        2 結(jié)果

        2.1 觀察結(jié)果

        在飼養(yǎng)期間,4組大鼠均未出現(xiàn)死亡,且通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)1組大鼠活力及精力均強(qiáng)于其他大鼠,且對(duì)照2組大鼠的精力及活力最差。

        2.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性和白介素含量對(duì)比

        實(shí)驗(yàn)1組淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)、IL-2、IL-4的含量顯著高于實(shí)驗(yàn)2組、對(duì)照1組及對(duì)照2組大鼠(P<0.05),實(shí)驗(yàn)2組與對(duì)照1組則不存在顯著性差異(P>0.05),對(duì)照2組大鼠顯著低于實(shí)驗(yàn)2組(P<0.05),詳見(jiàn)表1。

        表1 鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性和白介素含量對(duì)比表(x±s)

        3 討論

        美藤果油是一種對(duì)人類健康十分有益的可食用植物油,而且也是世界上質(zhì)量最佳的食用油之一[6]。相關(guān)報(bào)道指出[6],美藤果油中含有豐富的蛋白質(zhì)及不飽和脂肪酸,其中蛋白質(zhì)含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于花生中蛋白質(zhì)的含量,而不飽和脂肪酸的含量?jī)H僅低于核桃中不飽和脂肪酸的含量。劉付英[2]曾對(duì)美藤果油中不飽和脂肪酸的含量進(jìn)行過(guò)分析,發(fā)現(xiàn)美藤果油中不飽和脂肪酸含量高達(dá)92.46%,其中亞麻酸的含量高達(dá)45.62%,進(jìn)一步證明了美藤果油的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。吳爭(zhēng)[7]等人曾對(duì)美藤果油做過(guò)相關(guān)安全性評(píng)價(jià),結(jié)果發(fā)現(xiàn),在實(shí)驗(yàn)室條件下,并未觀察到美藤果油的不良生物學(xué)影響,說(shuō)明美藤果油是一類無(wú)任何毒副作用的食品油。此外,還有學(xué)者就美藤果油的功效進(jìn)行過(guò)研究,結(jié)果顯示美藤果油具有良好的降脂作用[8],這可能與其含有豐富的不飽和脂肪酸有關(guān),因?yàn)椴伙柡椭舅峋哂泻芎玫慕抵饔肹9],所以美藤果油也具有良好的降脂作用。研究結(jié)果還顯示,美藤果油具有保護(hù)上皮細(xì)胞完整的作用,筆者認(rèn)為這與其含有豐富的蛋白質(zhì)存在關(guān)系。

        但是,目前臨床上有關(guān)美藤果油增強(qiáng)免疫力的報(bào)道較少,為了探究美藤果油與免疫力的關(guān)系,筆者做了相關(guān)研究,結(jié)果顯示4組大鼠均未出現(xiàn)死亡,且實(shí)驗(yàn)1組大鼠活力及精力均強(qiáng)于其他大鼠,對(duì)照2組大鼠的精力及活力最差;實(shí)驗(yàn)1組淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)、IL-2、IL-4 的含量顯著高于其他組(P<0.05),實(shí)驗(yàn)2組與對(duì)照1組則不存在顯著性差異(P>0.05),對(duì)照2組大鼠則顯著低于實(shí)驗(yàn)2組(P<0.05)。本次研究結(jié)果說(shuō)明高血脂大鼠的免疫力低于健康大鼠,但是在喂養(yǎng)添加美藤果油的飼料后,健康大鼠及高血脂大鼠的免疫力均有提高,充分證實(shí)了美藤果油具有提高免疫力的作用。

        綜上所述,美藤果油具有增強(qiáng)免疫力的功能,值得推廣食用。

        參考文獻(xiàn):

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        [2]劉付英.美藤果及美藤果油的理化性質(zhì)和油脂的脂肪酸組成分析[J].中國(guó)油脂,2014,39(7):95-97.

        [3]郭 艷,蘇宜香.多不飽和脂肪酸對(duì)小鼠血脂和免疫功能的影響[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2003,19(11):1341-1342.

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        [5]林忠寧,董勝璋,董書蕓,等.MTT法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞增殖功能的方法學(xué)探討與應(yīng)用[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2000,10(1):8-10.

        [6]蔡志全.特種木本油料作物星油藤的研究進(jìn)展[J].中國(guó)油脂,2011,36(10):1-6.

        [7]吳 爭(zhēng),丁 晟,蔡 宏,等.南美油藤果油的急性、亞急性及遺傳毒性的實(shí)驗(yàn)研究[J].科技廣場(chǎng),2012,25(12):206-208.

        [8]李 偉,王林元,王景霞,等.美藤果油對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響及對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用[J].世界中醫(yī)藥,2015,10(8):1227-1230.

        [9]陳彩銳,李麗華,韓美娜,等.ω-3多不飽和脂肪酸血脂調(diào)節(jié)研究動(dòng)態(tài)[J].食品安全導(dǎo)刊,2015,9(27):170-172.

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