陳亞軍，歐興義，孫小純

(珠海市人民醫(yī)院檢驗科，廣東珠海 519000)

?

·臨床研究·

165例血尿標本紅細胞形態(tài)學檢測結(jié)果比較分析

陳亞軍，歐興義，孫小純

(珠海市人民醫(yī)院檢驗科，廣東珠海 519000)

摘要:目的探討相差顯微鏡法和UF-1000i法檢測尿紅細胞形態(tài)的符合率以及這兩種方法與臨床診斷的符合率。方法用相差顯微鏡和UF-1000i法同時檢測165例已經(jīng)明確臨床診斷的血尿標本的尿紅細胞形態(tài)。結(jié)果兩種方法檢測各型紅細胞形態(tài)的符合率分別是90.8%、93.8%、60.0%，兩種方法檢測結(jié)果和臨床診斷的符合率分別是85.7%、86.7%和93.3%、80.0%。結(jié)論相差顯微鏡法和UF-1000i法檢測尿紅細胞形態(tài)學的結(jié)果無差異，這兩種方法和臨床診斷的符合率較高，相關(guān)性較好，相差顯微鏡法人的因素影響較大，而儀器法在排除尿中其他物質(zhì)干擾下符合率和一致性均較好,結(jié)果表明UF-1000i儀器法檢測尿紅細胞形態(tài)可以作為常規(guī)報告結(jié)果供臨床參考。

關(guān)鍵詞:相差顯微鏡；UF-1000i儀器；血尿；紅細胞

血尿分為肉眼血尿和鏡下血尿，屬于比較常見的臨床癥狀，其根據(jù)尿中紅細胞的來源不同，將其分為腎源性、非腎源性以及混合型血尿，而通過檢測紅細胞形態(tài)、大小等來判斷血尿的來源，對患者在臨床診斷和治療中有非常重要的意義。在臨床上判斷血尿的來源方法有很多種，在尿沉渣檢測儀器還未廣泛使用之前，本科室主要以相差顯微鏡法人工鏡檢為主，2011年本科室開始引入日本Sysmex 公司生產(chǎn)的UF-1000i尿沉渣儀，其也可以對尿中的紅細胞各種參數(shù)進行檢測。儀器根據(jù)設(shè)定標準自動判斷血尿的來源，也可以根據(jù)儀器提供一些重要的實驗依據(jù)為臨床判斷血尿的來源提供建議，但在實際工作中本院并未很好利用UF-1000i儀器法對尿中紅細胞的形態(tài)學檢測的數(shù)據(jù)。本文主要探討這2種方法在診斷血尿來源中的價值，且為UF-1000i儀器檢測血尿的來源制訂標準化流程。

1資料與方法

1.1一般資料165 例血尿標本均來自本院2013年至2015年住院的患者，其中105例經(jīng)查閱病例資料，通過患者的血、尿生化、免疫相關(guān)檢測，以及影像學和病理腎組織活檢等明確為腎小球性疾病，另60例根據(jù)病史及相關(guān)的檢查結(jié)果確診為非腎小球性疾病。

1.2儀器與試劑UF-1000i尿沉渣分析儀購自日本Sysmex公司，使用其原裝配套的試劑，包括稀釋液、鞘液及雙色熒光染料；CX41相差顯微鏡購自日本Olympus公司；北京白洋水平式低速離心機。

1.3方法使用一次性帶蓋尿杯收集患者第2次新鮮中段晨尿20 mL，然后分裝在兩支潔凈的規(guī)格為15 mL離心管中，每管10 mL。一管用于UF-1000i 尿沉渣分析儀檢測，儀器根據(jù)檢測70%紅細胞前向散射光(RBC-P70 Fsc)及紅細胞前向散射光分布寬度(RBC-Fsc-DW)的數(shù)據(jù)和已設(shè)置的參數(shù)判斷標準進行自動結(jié)果判讀；；另一管用于相差顯微鏡分析，按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》關(guān)于尿沉查顯微鏡檢查的標準[1]，相對離心力400 r/min條件下離心5 min，棄除上清液，留0.2 mL于離心管底部,輕輕充分混勻，取適量于尿沉渣板上置相差顯微鏡下，用高倍鏡分析紅細胞各形態(tài)參數(shù)，分析200個尿紅細胞，計算出尿紅細胞畸形率及畸形種類。兩種方法從標本采集到檢測完成均在2 h內(nèi)完成分析結(jié)果。

1.4兩種方法檢測結(jié)果判斷紅細胞形態(tài)以及血尿來源的標準 UF-1000i檢測結(jié)果實驗診斷標準：RBC-P70 Fsc≤80 ch，RBC-Fsc-DW<50 ch或RBC-Fsc-DW≥50c h紅細胞形態(tài)為多形性即腎性血尿；RBC-P70 Fsc≥100 ch，RBC-Fsc-DW<50 ch紅細胞形態(tài)為均一性即非腎性血尿；RBC-P70 Fsc介于80～100 ch，或者 RBC-P70 Fsc≥100 ch，而RBC-Fsc-DW≥50 ch為混合型血尿[2]。相差顯微鏡判斷血尿來源標準：按順序計數(shù)200個紅細胞，計算異形紅細胞的發(fā)生率，異形紅細胞率大于或等于80%的紅細胞形態(tài)為多形性即腎源性血尿，異形紅細胞率小于50%的紅細胞形態(tài)為均一性即非腎源性血尿，異形紅細胞率在50%～80%的是混合性血尿[3]。

1.5統(tǒng)計學處理采用SPSS19.0進行統(tǒng)計學處理，計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2．1相差顯微鏡法和UF-1000i儀器法檢測結(jié)果，以及同一血尿來源兩種方法檢測相關(guān)性分析見表1。結(jié)果顯示兩種方法在紅細胞多形性與均一形的形式下符合率較好，分別有90.8%和93.8%，混合性形式下符合率較差，只有60.0%。

表1　　兩種方法檢測結(jié)果相關(guān)性分析

2．2相差顯微鏡法和UF-1000i儀器法分析結(jié)果與臨床診斷符合率結(jié)果見表2。結(jié)果顯示相差顯微鏡和UF-1000i儀器法檢測結(jié)果與臨床診斷為腎源性血尿、非腎源性血尿的符合率分別是85.7%、86.7%和93.3%、80.0%，儀器法在腎源性血尿的檢測符合率高于相差顯微鏡法，而在非腎源性血尿樣品中檢測符合率低于顯微鏡法，但兩種方法檢測結(jié)果相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，均與臨床有較好的符合性。

表2　　相差顯微鏡法和UF-1000i儀器法分析結(jié)果與臨床診斷符合率

3討論

尿紅細胞形態(tài)特征是判斷血尿來源的有價值的參考方法，臨床上對于鑒別血尿來源的方法有很多種,相差顯微鏡和UF-1000i儀器法這兩種方法是最簡便、快速、有效、無創(chuàng),對疾病進行診斷、治療、觀察病情有重要的臨床意義。本研究觀察結(jié)果顯示：兩種方法在紅細胞多形性與均一形的形式下符合率較好，混合性形式下兩種方法符合性較差，但兩種方法學檢測結(jié)果相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，均與臨床有較好的符合性，表明通過對血尿中紅細胞形態(tài)的檢測，可協(xié)助鑒別其來源。但本試驗分析顯示兩種方法均有其各自的優(yōu)缺點，要求檢測人員在檢測過程中要盡量去完善。如相差顯微鏡法，因受離心力的影響，腎源性的尿紅細胞易破碎、變形，本資料也顯示敏感度低于UF-1000i儀器法，但在顯微鏡下可以辨認各種形態(tài)改變的紅細胞，準確性更高，不足是費時費力，而且對檢測人員的形態(tài)學水平要求較高，受人為因素影響較大，要求要完全按SOP規(guī)程操作，減少人為因素的影響。而UF-1000i儀器法檢測紅細胞，受各種物質(zhì)干擾，如受結(jié)晶、細菌、真菌、精子、脂肪滴等的影響[4-5]，這就需要通過鏡檢來發(fā)現(xiàn)此類物質(zhì)。本試驗在非腎源性血尿檢測中顯微鏡法優(yōu)于儀器法，就是受此類物質(zhì)的干擾較多，儀器的優(yōu)點在于方便、快捷、無主觀因素干擾、重復(fù)性好。尿的紅細胞形態(tài)改變與尿液在體內(nèi)儲存時間和尿標本采集后放置的時間長短有較明顯的關(guān)系[6-7]。汪嘉等[6]研究發(fā)現(xiàn)尿液放置3 h后,紅細胞開始有溶解現(xiàn)象，與即時檢測的標本比較有明顯差異，大紅細胞也在3 h后開始出現(xiàn)變形皺縮，異形紅細胞開始增多，因此當標本放置超過3 h后，有一部分非腎性血尿就有可能轉(zhuǎn)變成混合性血尿或腎源性血尿。本文通過檢測放置5 h之后的40例血尿標本，這些標本儀器即時檢測和臨床確診均判斷為非腎源性血尿，其中有5例轉(zhuǎn)為混合性血尿。因此，在檢測之前一定要注意標本采集的質(zhì)量控制，必須是采集未在體內(nèi)儲存太久的二次晨尿或者是新鮮的隨機尿做尿紅細胞形態(tài)學檢查，且在2 h內(nèi)完成檢測工作。腎源性血尿的尿干化學檢測均顯示有尿蛋白增高，也可以作為血尿來源的輔助分析方法。

綜上所述，本試驗說明只要在標本采集質(zhì)量控制好的前提下，儀器法完全可以作為初篩為臨床提供尿紅細胞來源的參考依據(jù)，相差顯微鏡法作為有必要的補充手段。

參考文獻

[1]尚紅，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗操作規(guī)程[M]．4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：171．

[2]高憲成.流式細胞術(shù)法尿沉渣分析儀判斷腎性與非腎性血尿標準的商榷[J].臨床檢驗雜志,2007,25(1):75.

[3]李驚子,諶貽璞．應(yīng)用相差顯微鏡鑒別血尿來源[J]．中華內(nèi)科雜志，1984,23(11):688.

[4]陳亞軍,唐發(fā)清.尿液紅細胞檢驗方法學比較分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2012,33(9):1107.

[5]徐鋒，郭俊英.UF-1000i 尿沉渣分析儀檢測尿紅細胞和白細胞影響因素[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2014,32(2):180-181.

[6]汪嘉，李智，黃依明，等．標本放置時間對尿有形成分分析儀檢測紅細胞的影響[J]．中華檢驗醫(yī)學雜志，2007,30(8):912-913.

[7]陳國強，陳鋒，王素梅.標本放置時間對尿液中紅細胞、白細胞測定的影響[J].檢驗醫(yī)學，2011，26(3):166-168.

(收稿日期：2015-15-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.042

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)06-0812-02