張春雷，曾學輝，李忠新

(深圳市中醫(yī)院檢驗科，廣東深圳 518083)

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·臨床研究·

尿液胱抑素C和NGAL聯(lián)合檢測在IgA腎病診斷中的應用*1

張春雷，曾學輝，李忠新

(深圳市中醫(yī)院檢驗科，廣東深圳 518083)

摘要:目的探討尿胱抑素C(Cys C)和嗜中性粒細胞明膠酶相關脂質轉運蛋白(NGAL)聯(lián)合檢測在IgA腎病診斷中的應用。方法選擇IgA腎病患者71例，Lee氏分級為Ⅰ級12例、Ⅱ級20例、Ⅲ級17例、Ⅳ級13例、Ⅴ級9例；同時選取65例健康體檢者為健康對照組。酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定尿NGAL水平，免疫比濁法檢測尿Cys C水平。結果IgA腎病早期患者尿Cys C及NGAL水平升高，與健康對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；隨著IgA腎病的進展，尿Cys C及NGAL水平逐漸增高，且各組間差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；尿Cys C水平與血液肌酐水平呈正相關(r=0.782，P<0.01)；尿NGAL水平與血液肌酐水平呈正相關(r=0.701，P<0.01)。結論尿Cys C和NGAL水平不但可以早期診斷IgA腎病的發(fā)生，還可以監(jiān)測IgA腎病的進展。

關鍵詞:IgA腎??；胱抑素C；嗜中性粒細胞明膠酶相關脂質轉運蛋白

IgA腎病是最為常見的一種原發(fā)性腎小球疾病，典型IgA腎病患者的臨床表現(xiàn)為反復發(fā)作性肉眼血尿或鏡下血尿，可伴有不同程度蛋白尿，部分患者可以出現(xiàn)嚴重高血壓或者腎功能不全，但大部分患者早期并沒有表現(xiàn)出相應的臨床癥狀，造成了臨床IgA腎病的漏診，其真實發(fā)病率可能更高[1]。IgA腎病患者預后差，20%～40%的患者在10～20年的時間內會進行性發(fā)展為終末期腎病，IgA腎病患者病死率約是正常人群死亡率的2倍[2-3]，早期準確的診斷對于臨床治療和患者預后有重要意義。

為探討IgA腎病的實驗診斷手段，本文通過對尿液中胱抑素C (Cys C)和嗜中性粒細胞明膠酶相關脂質轉運蛋白(NGAL)的檢測，對其在IgA腎病早期診斷中的應用價值進行探討?，F(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取2010年6月至2013年11月在本院診治并經(jīng)腎活檢確診的71例IgA腎病患者，其中男45例，女26例；年齡22～65歲，平均(46.2±12.5)歲；Lee 氏分級：Ⅰ級12例，Ⅱ級20例，Ⅲ級17例，Ⅳ級13例，Ⅴ級9例。排除各種原發(fā)性及繼發(fā)性肝病、病毒性肝病、急性腎衰竭和腎移植術后患者。同時選取65例健康人為健康對照組,其中男42例，女23例；年齡27～65歲，平均(41.4±9.5)歲。健康對照組與各組研究對象在性別、年齡差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2試劑與儀器檢測NGAL的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒購于美國R&D公司；檢測Cys C采用北京利德曼生化股份有限公司試劑；血肌酐(SCr)、尿肌酐(Ucr)檢測采用Roche原裝試劑，檢測儀器為Roche-cobas6000全自動生化分析儀檢測。

1.3方法留取清晨研究對象的新鮮尿液標本，以1 000×g離心15 min，取上清液置于-80 ℃冰箱保存集中檢測。采用ELISA檢測尿液NGAL的濃度，實驗步驟嚴格按試劑盒說明書進行操作；尿液Cys C免疫比濁法檢測；SCr、Ucr采用酶法檢測。尿NGAL和Cys C檢測結果同步Ucr校正后表示。

2結果

2.1尿Cys C和NGAL水平與IgA腎病進展關系IgA腎?、窦壔颊吣蛞篊ys C和NGAL水平出現(xiàn)升高，且與健康對照組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；隨著IgA腎病病情的發(fā)展，Cys C和NGAL逐步升高，各組間相比差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。表明尿液Cys C和NGAL是腎臟早期損害的標志物，并隨著病情的進展而進行性的升高。結果見表1。

表1　　尿Cys C和NGAL水平與IgA腎病進展關系

a：P<0.05，與健康對照組比較；b：P<0.05，與IgA腎?、窦壉容^；c：P<0.05，與IgA腎病Ⅱ級比較；d：P<0.05，與IgA腎?、蠹壉容^；e：P<0.05，與IgA腎病Ⅳ級比較。

2.2尿Cys C和NGAL水平與SCr相關性分析Spearman相關性分析顯示，尿Cys C水平與SCr呈正相關(r=0.782，P<0.01)；尿NGAL水平與SCr呈正相關(r=0.701，P<0.01)。

3討論

IgA腎病診斷的金標準是腎穿刺活檢，但腎活檢為一項有創(chuàng)性檢查，重復腎活檢患者較難接受，不便于經(jīng)常性檢測，其臨床應用受到限制，也是部分早期無典型臨床癥狀患者漏診的主要原因[1]，影響了臨床早期診斷和療效監(jiān)控。因此尋找能反映IgA腎病病變程度和預后的無創(chuàng)生物標志物具有重要意義。

Cys C是一種小相對分子質量的胱氨酸蛋白酶抑制劑，在所有有核細胞表達并持續(xù)性分泌，不依賴任何外來因素如性別、年齡、飲食的影響。循環(huán)中的Cys C僅經(jīng)腎小球濾過而被清除，并在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代謝分解，無腎小管分泌，是一種反映腎小球濾過率變化的內源性標志物[4]。尿液中Cys C的濃度不僅與血清Cys C和SCr具有良好的相關性，而且測定尿液中Cys C方便、快捷、無創(chuàng)傷，適合反復取樣檢查。本研究結果顯示，IgA腎病各組尿液Cys C水平與健康對照組相比顯著升高，并隨著病程的進展而進行性升高。表明尿液Cys C水平對IgA腎病患者早期腎損害有重要的診斷價值，并且其水平與血液肌酐水平有著良好的相關性，同時檢測可為臨床腎功能的評估和治療方案的確定提供更可靠的診療依據(jù)。

NGAL又被稱為脂質運載蛋白-2，為一種分泌性糖蛋白，NGAL基因位于常染色體9q34上，全長5 869 bp，NGAL蛋白由一條多肽鏈構成，含有178個氨基酸殘基，相對分子質量為25×103。有研究發(fā)現(xiàn)NGAL與腎臟關系密切，其主要表達于近端小管[5]。在腎臟急、慢性病變過程中，NGAL因腎小管上皮細胞受到損傷性刺激大量分泌，通過誘導腎小管間質中浸潤的中性粒細胞發(fā)生凋亡以保護腎組織免受炎性細胞的侵害，同時可誘導腎小管上皮細胞再生修復。多項研究表明NGAL可以作為急性腎損傷早期可靠的診斷指標[6-8]，其正常情況下腎臟組織很少表達，在腎臟急性缺血再灌注后,腎小管上皮細胞產(chǎn)生并分泌一系列與免疫反應相關的物質，其中NGAL 濃度迅速升高，可能與腎小管間質中浸潤的中性粒細胞發(fā)生凋亡有關[9-10]。本研究結果顯示：尿NGAL水平在IgA腎?、窦夐_始升高，并隨著IgA腎病的進展而逐步增加，組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，并且其水平與SCr水平有著良好的相關性，同時檢測可為臨床腎功能的評估和治療方案的確定提供更可靠的診療依據(jù)。

綜上所述，尿Cys C和NGAL作為新型腎臟疾病生物標記物，與腎小管損傷有密切聯(lián)系，在IgA腎病的早期診斷、監(jiān)測進展方面有良好的應用前景。

參考文獻

[1]Wyatt RJ,Julian BA.IgA nephropathy[J].N Engl J Med，2013，368(25):2402-2414.

[2]Le W,Liang S,Hu Y，et al.Long-term renal survival and related risk factors in patients with IgA nephropathy:results from a cohort of 1155 cases in a Chinese adult population[J].Nephrol Dial Transplant，2012，27(4):1479-1485.

[3]Knoop T,Vikse BE,Svarstad E，et al.Mortality in patients with IgA nephropathy[J].Am J Kidney Dis，2013，62(5):883-890.

[4]張知，舒嶠，廖躍華.尿液胱抑素C與Β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶聯(lián)合檢測對腎小管損傷的診斷價值[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2014，35(22):3053-3054.

[5]Mishra J,Ma Q,Prada A,et al.Identification of neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a novel early urinary biomarker for ischemic renal injury[J].J Am Soc Nephrol,2003，14(10):2534-2543.

[6]Parikh CR,Devarajan P,Zappitelli M,et al.Postoperative bio-markers predict acute kidney injury and poor outcomes after pediatric cardiac surgery[J].J Am Soc Nephrol,2011，22(9):1737-1747.

[7]Soni S S,Pophale R,Ronco C.New biomarkers for acute renal injury[J].Clin Chem Lab Med,2011,49(8):1257-1263.

[8]Parikh CR,Coca SG,Thiessen-Philbrook H,et al.Postoperative biomarkers predict acute kidneyinjury and poor outcomes after adult cardiac surgery[J].J Am Soc Nephrol,2011,22(9):1748-1757.

[9]Clerico A,Galli C,Fortunato A,et al.Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as biomarker of acute kidney injury:areview of the laboratory characteristics and clinical evidences[J].Clin Chem Lab Med,2012,50(9):1505-1517.

[10]Bagshaw SM,Bellomo R,Devarajan P,et al.Review article:acute kidney injury in critical illness[J].Can J Anaesth,2010,57(11):985-998.

(收稿日期：2015-12-26)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.027

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)06-0783-02

基金項目：廣東省深圳市科技計劃項目(201402076)。