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        滋腎雙益復(fù)方對2型糖尿病大鼠糖代謝的影響及作用機制

        2016-04-20 01:02:40李文浩田春雨薄海美李承岸
        關(guān)鍵詞:灌胃抵抗批號

        李文浩 田春雨 薄海美 王 鴿 劉 澤 李承岸 周 正

        華北理工大學(xué) 河北唐山 063000

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        滋腎雙益復(fù)方對2型糖尿病大鼠糖代謝的影響及作用機制

        李文浩田春雨薄海美王鴿劉澤李承岸周正

        華北理工大學(xué)河北唐山063000

        [摘要]①目的探討滋腎雙益復(fù)方對2型糖尿病大鼠糖代謝影響及作用機制。②方法將造模成功的2型糖尿病大鼠分為模型組,滋腎雙益復(fù)方低、中、高劑量組[灌胃500、1000、2000 mg/(kg·d)]及二甲雙胍組[灌胃100mg/(kg·d)]。持續(xù)給藥60天后測空腹血糖(FBG),糖化血紅蛋白(HbAlc),C-肽,胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)含量及游離脂肪酸(FFA)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。③結(jié)果與正常組相比較,模型組的FBG、HbAlc顯著升高(P<0.01);與模型組相比較,滋腎雙益復(fù)方可使2型糖尿病大鼠的FBG、HbAlc顯著降低(P<0.05,P<0.01),提高C-肽GLP-1含量(P<0.05,P<0.01),抑制氧化應(yīng)激。④結(jié)論滋腎雙益復(fù)方能調(diào)節(jié)2型糖尿病大鼠的糖代謝,改善胰島素抵抗(IR),增加GLP-1含量及抑制氧化應(yīng)激可能為其作用機制。

        [關(guān)鍵詞]滋腎雙益復(fù)方2型糖尿病糖代謝

        2型糖尿病患者(T2DM)大多存在著胰島素抵抗(IR)現(xiàn)象。近些年來,中醫(yī)藥治療2型糖尿病的臨床和實驗研究日益增多,尋求改善胰島素抵抗、調(diào)節(jié)糖代謝的有效方藥已成為中醫(yī)防治2型糖尿病研究的熱點[1]。滋腎雙益復(fù)方由桑葉、桑葚、決明子、丹參、黃芪、葛根、黃連等組成。臨床實踐表明其具有良好的調(diào)節(jié)血糖、改善胰島素抵抗作用。本實驗主要進(jìn)行該復(fù)方對2型糖尿病大鼠糖代謝、糖化血紅蛋白(HbAlc)、C-肽、胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)含量及游離脂肪酸(FFA)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影響,為該復(fù)方的深層次研究奠定基礎(chǔ)。

        1儀器與材料

        1.1儀器M200PRO酶標(biāo)儀(瑞士TECAN公司);血糖儀(三諾生物公司);NycoCard Reader II糖化血紅蛋白檢測儀(挪威Axis-shield poc AS公司)。

        1.2試藥二甲雙胍片(上海施貴寶制藥有限公司,批號1407117);糖化血紅蛋白檢測試劑盒(Axis-shield poc AS公司,批號:10174006);C肽測定試劑盒(凱諾春天生物科技公司,批號:20150401A);GLP-1試劑盒(批號:20150304)、MDA測試盒(批號:20150212)、SOD試劑盒(批號:20150226)南京建成生物工程研究所;血糖試紙(長沙三諾生物公司,批號2429EN);滋腎雙益復(fù)方(桑葉、桑葚、決明子、丹參、黃芪、葛根、黃連)加6倍量水加熱提取2次,2h/次,濾過,水提物經(jīng)噴霧干燥制得顆粒,動物灌胃給藥時用純凈水制成混懸液。

        1.3動物SPF雄性Wistar大鼠(220±10)g,上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司,合格證:SCXK(滬)2012-0002。

        1.4方法

        1.4.12型糖尿病大鼠模型實驗選用清潔級健康雄性Wistar大鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)7天,正常對照組普通飼料喂養(yǎng);造模組給予高糖、高脂飼料喂養(yǎng)4周后,腹腔注射鏈脲佐菌素30mg/kg,并繼續(xù)給予高糖高脂飼料2周,禁食12h后測定空腹血糖(FBG),F(xiàn)BG≥11.1mmoL/L視為造模成功[2]。

        1.4.2給藥方法二甲雙胍組(Met組),灌胃100mg/(kg·d);滋腎雙益復(fù)方低劑量組(ZL組)灌胃500mg/(kg·d);滋腎雙益復(fù)方中劑量組(ZM組)灌胃1000mg/(kg·d),滋腎雙益復(fù)方高劑量組(ZH組)灌胃2000mg/(kg·d)。每組10只,連續(xù)給藥60天。

        2結(jié)果

        2.1滋腎雙益復(fù)方對2型糖尿病大鼠FBG、HbAlc的影響與正常組比較,模型組大鼠FBG、HbAlc含量升高(P<0.01);滋腎雙益復(fù)方可顯著降低糖尿病大鼠的FBG、HbAlc含量,表明滋腎雙益復(fù)方可有效降低糖尿病大鼠的血糖,見表1。

        表1 各組大鼠FBG 、HbAlc 的比較±s)

        注:與正常組比,△△P<0.01;與模型組比,**P<0.01。

        2.2滋腎雙益復(fù)方對2型糖尿病大鼠C肽、Homa-IR及GLP-1分泌的影響與正常組比較,模型組大鼠GLP-1含量降低(P<0.01)。滋腎雙益復(fù)方各劑量組均能促進(jìn)2型糖尿病大鼠GLP-1的分泌(P<0.05,P<0.01),見表2。

        表2 滋腎雙益復(fù)方對大鼠C-肽、IR指數(shù)及GLP-1的影響

        注:與正常組比較,△P<0.05;△△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05;**P<0.01。

        2.3滋腎雙益復(fù)方對2型糖尿病大鼠SOD 、FFA、 MDA的影響與正常組比較,模型組大鼠SOD的活性明顯下降(P<0.01), MDA、FFA的含量升高(P<0.01)。滋腎雙益復(fù)方高劑量組的SOD活性顯著升高,滋腎雙益復(fù)方高劑量組MDA和FFA水平顯著降低。見表3。

        表3 滋腎雙益復(fù)方對2型糖尿病大鼠SOD 、MDA和FFA的影響

        注:與正常組比較,△△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05;**P<0.01。

        3討論

        胰島素抵抗(IR)是機體對胰島素的生物效應(yīng)減低,機體胰島素介導(dǎo)的葡萄糖攝取和代謝能力減低,包括胰島素的敏感性反應(yīng)性下降。T2DM中90%存在IR,導(dǎo)致T2DM胰島素抵抗的主要因素包括FFA的升高、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞內(nèi)在機制異常等。

        FFA是細(xì)胞膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)和前列腺素合成的供體,為脂肪代謝的中間產(chǎn)物,是機體主要供給能量的來源。升高的FFA可以使胰島素受體底物的絲氨酸殘基磷酸化作用增強,影響了胰島素介導(dǎo)的葡萄糖轉(zhuǎn)運,導(dǎo)致糖代謝障礙;SOD是體內(nèi)合成的氧自由基清除劑,其活性可反映機體抗氧化的能力。MDA是生物膜中多價不飽和脂肪酸受自由基作用生成的脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物,其含量反映機體脂質(zhì)過氧化的速度和程度,代表自由基的活性[4];GLP-1是一種腸促胰島素激素,具有促進(jìn)胰島素分泌、抑制胰高血糖素釋放及改善胰島β細(xì)胞功能。C肽與胰島素以等分子數(shù)共存并同時釋放于毛細(xì)血管循環(huán)中,C肽不被肝臟破壞,其半衰期較胰島素長,測定血循環(huán)中C肽水平能較好的反映胰島β細(xì)胞合成與釋放胰島素功能。

        滋腎雙益復(fù)方為中藥復(fù)方制劑,本實驗結(jié)果表明滋腎雙益方可降低2型糖尿病大鼠的FBC及Hbalc水平,提高C-肽水平,促進(jìn)GLP-1的分泌,并可以使SOD活性升高、 MDA和FFA水平顯著降低,表明滋腎雙益復(fù)方可調(diào)節(jié)2型糖尿病大鼠的糖代謝亂,改善胰島素抵抗,抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)及促進(jìn)GLP-1的分泌可能是其作用機制之一,本實驗的研究為該復(fù)方的深層次研究奠定了基礎(chǔ)。

        參考文獻(xiàn)

        [1]陳翰卿,王旭.2型糖尿病胰島素抵抗中醫(yī)藥治療研究概況[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2012,14(6):72-74

        [2]田春雨,薄海美,喇孝瑾,等.滋腎清肝代平方對2型糖尿病大鼠糖、脂代謝作用的研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2014,41(8):1745-1747

        [3]李霞,周智廣,亓海英,等.用空腹C 肽代替胰島素改良Homa公式評價胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能[J].中南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2004,29(4):419-423

        [4]崔鵬,田春雨,張艷萍,等.雙益方對2型糖尿病大鼠SOD、MDA、FFA影響的實驗研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2013,24(8):1840-1842

        (岳靜玲編輯)

        Study on mechanism and glucose metabolism of type 2 diabetes rats with zishenshuangyi formula

        LIWenhao,TIANChunyu,BOHaimei,et

        al(NorthChinaUniversityofScienceandTechnology,Tangshan063000,China)

        [ABSTRACT]ObjectiveTo study effects of Zishenshuangyi formula on mechanism and glucose metabolism of type 2 diabetes rats.MethodsSelected T2DM rats and randomly divided into groups: model group,Zishenshuangyi formula low dose group(ig,500mg/(kg·d),middle dose group (ig,1000mg/(kg·d),and high dose treatment group(ig,2000mg/(kg·d),metformin group(ig,100mg/(kg·d).Blood glucose,HbAlc,C-P,GLP-1 and FFA,SOD,MDA were detected after 60 d of continuous medication.ResultsCompared with the normal group,FBG,HbAlc of model group was significantly higher(P<0.01).Compared with model group,Zishenshuangyi formula can significantly reduce the levels of blood glucose,HbAlc,(P<0.05,P<0.01),and also can significantly improve the level of C-P,GLP-1(P<0.05,P<0.01),inhibit oxidative stress.ConclusionZishenshuangyi formula can effectively reduce T2DM Rats blood glucose,improve insulin resistance,increase GLP-1 content and inhibit oxidative stress may be the mechanism.

        [KEYWORDS]Zishenshuangyi formula.Type 2 diabetes mellitus. Glucose metabolism

        [中圖分類號]R 22

        [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

        [文章編號]2095-2694(2016)02-148-03

        【通訊作者】田春雨

        【作者簡介】李文浩(1995-),男,本科生。研究方向:中醫(yī)藥防治2型糖尿病。

        【基金項目】華北理工大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(編號:X2015205);河北省自然科學(xué)基金資助項目(編號:H2015209025);河北省高等學(xué)??茖W(xué)技術(shù)研究項目(編號:QN2015119);河北省衛(wèi)生和計劃生育委員會科研項目(編號:ZD20140072)。

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