王慶玉

(盤錦市中心醫(yī)院 血管外科，遼寧 盤錦124000)

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胃癌組織中MIF與miR-451的表達(dá)及其臨床意義

王慶玉

(盤錦市中心醫(yī)院 血管外科，遼寧 盤錦124000)

摘要：目的研究胃癌組織中MIF與miR-451的表達(dá)及臨床意義。方法選取60例胃癌患者的腫瘤組織(觀察組)及其癌旁組織標(biāo)本(對(duì)照組)，采用RT-PCR方法檢測(cè)胃癌組織和癌旁組織中MIF和miR-451的表達(dá)水平，并分析其與臨床病理的關(guān)系。結(jié)果RT-PCR結(jié)果顯示，胃癌患者的腫瘤組織標(biāo)本中MIF表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；miR-451表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。比較胃癌中MIF與miR-451的表達(dá)與臨床病理因素關(guān)系可知，MIF與miR-451的表達(dá)與患者的性別、年齡及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(P>0.05)，而與腫瘤分化程度、TNM分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)胃癌組MIF與miR-451表達(dá)具有顯著負(fù)相關(guān)性(r=-0.697,P=0.012)。結(jié)論胃癌組織中MIF的表達(dá)顯著升高，而miR-451的表達(dá)顯著下降，且具有明顯的相關(guān)性，可以作為重要的輔助指標(biāo)對(duì)臨床胃癌的診斷、治療和預(yù)后判斷進(jìn)行指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞：胃癌；MIF；miR-451；表達(dá)

(ChinJLabDiagn,2016,20:0375)

胃癌是最常見(jiàn)的癌癥之一，也是導(dǎo)致癌癥死亡的第二大疾病，由于早期患者的臨床癥狀不明顯，且缺乏特異性的檢查指標(biāo)，多數(shù)患者確診時(shí)已經(jīng)處于晚期，術(shù)后胃癌復(fù)發(fā)率高達(dá)60%[1，2]。研究表明，巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(macrophage migrationinhibitory factor，MIF)與炎癥和免疫反應(yīng)有著密切的關(guān)系，在細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化中起著十分重要的作用[3]。miRNA可以對(duì)細(xì)胞的增殖、凋亡以及分化等多種重要的生物學(xué)過(guò)程進(jìn)行調(diào)控，并且在多種腫瘤組織中異常表達(dá)[4]。本研究檢測(cè)了胃癌及相應(yīng)癌旁組織中MIF和miR-451的表達(dá)情況及相關(guān)性，探討其在胃癌的診斷、治療、預(yù)后判斷中的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年8月至2015年6月我院收治的60例胃癌患者的腫瘤組織石蠟標(biāo)本。術(shù)前，所有患者均未接受放療、化療治療，術(shù)后均經(jīng)過(guò)組織病理檢查證實(shí)，均未同時(shí)患有其他系統(tǒng)惡性腫瘤。其中男性38例，女性22例；年齡36-78歲，平均(55.4±12.6)歲。另外選取上述胃癌患者的癌旁組織作為對(duì)照組，癌旁組織病理標(biāo)本位置距離腫瘤邊緣在5 cm以上，經(jīng)HE染色確診為非癌組織。

1.2方法

1.2.1試劑Trizol試劑、SuperScript.Ⅲ First-Strand Synthesis System，均由美國(guó)Invitrogen公司生產(chǎn)；Revert Aidrm First Strand cDNA Synthesis Kit(由美國(guó)MBI公司生產(chǎn))；SybrGreen PCR Master Mix(2X)(由美國(guó)ABI公司生產(chǎn))；引物由上海生工生物工程公司合成。

1.2.2檢測(cè)方法采用RT-PCR方法檢測(cè)，MIF以β-actin 為內(nèi)參，miR-451以U6為內(nèi)參，實(shí)驗(yàn)步驟具體如下：①收集標(biāo)本，石蠟切片，HE染色后閱片；②二甲苯脫蠟，梯度乙醇(100%、90%、80%、70%、50%)去除殘留的二甲苯；③嚴(yán)格按照試劑盒的步驟提取脫蠟后組織中的總RNA；④分別按照miRNA及MIF反轉(zhuǎn)錄試劑說(shuō)明書合成cDNA第一鏈，合成的cDNA置于-20℃保存；⑤分別按照miRNA及MIF PCR試劑說(shuō)明書將合成的cDNA進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)；采用2-ΔΔCt方法表示miR-451及MIF的相對(duì)表達(dá)量。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1觀察組及對(duì)照組MIF與miR-451表達(dá)情況

RT-PCR結(jié)果顯示，胃癌患者的腫瘤組織標(biāo)本中MIF表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；miR-451表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1　觀察組及對(duì)照組MIF與miR-451表達(dá)情況

2.2胃癌組織中MIF和miR-451的表達(dá)與臨床病理的關(guān)系

比較胃癌中MIF和miR-451的表達(dá)與臨床病理因素關(guān)系可知，MIF和miR-451的表達(dá)與患者的性別、年齡及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(P>0.05)，而與腫瘤分化程度、TNM分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2　胃癌組織中MIF與miR-451的表達(dá)與臨床病理的關(guān)系

2.3胃癌組織中MIF與miR-451表達(dá)的關(guān)系

胃癌組織中MIF的相對(duì)表達(dá)為(1.516±0.142)，miR-451的相對(duì)表達(dá)為(0.297±0.104)，經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)胃癌組MIF與miR-451表達(dá)具有顯著負(fù)相關(guān)性(r=-0.697,P=0.012)。

3討論

MIF是于20世紀(jì)60年代被發(fā)現(xiàn)的，是一種來(lái)源于T淋巴細(xì)胞的細(xì)胞因子，可以抑制巨噬細(xì)胞向血管外的游走。Meyer-Siegler等[4]在對(duì)前列腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，在存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的前列腺癌組織中，MIF的表達(dá)明顯升高。近年來(lái)，大量的國(guó)內(nèi)外研究顯示[5-7]，在肝癌、大腸癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌以及膀胱癌等多種惡性腫瘤中，MIF均有過(guò)度表達(dá)。MicroRNA (miRNA)是一類長(zhǎng)約20-25個(gè)核苷酸的非編碼的單鏈RNA分子，可以通過(guò)與靶mRNA互補(bǔ)配對(duì)，促進(jìn)目標(biāo)mRNA的降解，或是使得蛋白翻譯受到抑制，在細(xì)胞增殖、分化、凋亡、基因調(diào)控、免疫應(yīng)答以及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用[8]，也與血液系統(tǒng)、心血管、神經(jīng)發(fā)育等過(guò)程有著十分密切的聯(lián)系[9]。目前，圍繞胃癌mRNA研究較多的還有miR-21、miR-27a以及miR-146a等[10]。

本研究采用RT-PCR方法檢測(cè)了胃癌標(biāo)本以及癌旁組織標(biāo)本中MIF與miR-451的表達(dá)水平，結(jié)果表明，胃癌的病理標(biāo)本中MIF表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；miR-451表達(dá)水平均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。通過(guò)比較胃癌中MIF與miR-451 的表達(dá)與其臨床病理關(guān)系可知，MIF與miR-451的表達(dá)與患者的腫瘤分化程度、TNM分期、浸潤(rùn)深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)(P<0.05)。馬寧[11]用RT-PCR方法研究了30例胃癌組織中MIF與miR-451的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織中的MIF的表達(dá)明顯升高，而miR-451的表達(dá)明顯降低，兩者的表達(dá)均與胃癌的組織類型、TNM 分期、浸潤(rùn)深度及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，這與本研究的結(jié)果較一致。

本研究經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，胃癌組MIF與miR-451表達(dá)具有顯著負(fù)相關(guān)性(P<0.05)。MIF是一種獨(dú)特的、可以促進(jìn)惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的細(xì)胞因子，在腫瘤發(fā)展中可能起著雙重的作用，既可以通過(guò)自分泌途徑對(duì)炎癥細(xì)胞的殺瘤活性進(jìn)行調(diào)節(jié)，又可以通過(guò)旁分泌途徑促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[12]。腫瘤的血管新生過(guò)程需要多種促血管生長(zhǎng)因子的調(diào)控，比如白細(xì)胞介素(IL)、組織生長(zhǎng)因子等。MIF可以控制促血管生長(zhǎng)因子的分泌，參與到惡性腫瘤的血管生成的過(guò)程中[13]。miR-451可能具有抑癌基因樣作用，而MIF可能是miR-451的作用靶點(diǎn)之一。研究表明，胃癌細(xì)胞中外源過(guò)表達(dá)miR-451可以使得MIF蛋白的表達(dá)下調(diào)，表明miR-451的表達(dá)下調(diào)部分可能是由于MIF的表達(dá)上調(diào)所導(dǎo)致的[14-15]。

總之，MIF和miR-451與胃癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程有著十分密切的關(guān)系。雖然在胃癌發(fā)展過(guò)程中MIF和miR-451表達(dá)的具體分子機(jī)制以及其作用尚未完全闡明，但結(jié)果表明，其異常的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、浸潤(rùn)以及轉(zhuǎn)移相關(guān)，可以為胃癌的診斷、治療以及預(yù)后預(yù)測(cè)提供重要的參考價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]Menges M，Hoehler T.Current strategies in systemic treatment of gastric cancer and cancer of the gastroesoghageal junction[J].J Cancer Res Clin Oncol,2009,135(1):29.

[2]包泱,常家聰,王道斌.MIF、MMP-9在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2014,49 (3):363.

[3]劉晶華,冷維春,劉俊寶,等.MIF和VEGF在子宮內(nèi)膜異位癥組織中的表達(dá)及臨床意義[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2010,14(9):1405.

[4]Meyer-Siegler K,Hudson PB.Enhanced expression of macrophage migration inhibitory factor in prostatic adenocarcinoma metastases[J].Urology,1996,48(3):448.

[5]Agarwal R,Whang DH,Alvero AB,et al.Macrophage migration inhibitory factor expression in ovarian cancer[J].Am J Obstet Gynecol，2007,196(4):348.

[6]王苗鋒,熊茂明,李火友,等.大腸癌組織中VEGF、MIF的表達(dá)及臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué),2015,44(11):1478.

[7]卞麗娟,李智.巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子與腫瘤[J].國(guó)際腫瘤學(xué)雜志,2006,33(9):661.

[8]Garzon R,Calin GA,Croce CM.MicroRNAs in Cancer[J].Annu Rev Med,2009(60):167.

[9]汪偉,孫曉娜,張玉峰,等.miR-451與MIF在胃癌組織中表達(dá)的相關(guān)性研究[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013,48 (11):1384.

[10]汪偉,劉曉峰,李文波,等.miR-451在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].山東醫(yī)藥,2012,52 (l3):16.

[11]馬寧,周云.胃癌組織中 miR-451與MIF的表達(dá)及與臨床病理的關(guān)系[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2015 (35):655.

[12]康敏，承澤農(nóng)，李莉，等.MIF在幽門螺桿菌L型相關(guān)胃癌中的表達(dá)及臨床意義[J].中華全科醫(yī)學(xué),2012,10 (9):1332.

[13]鄧瑋,易永芬,閆田靜,等.胃癌組織和細(xì)胞中P115、MIF的表達(dá)及意義[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,33(3):241．

[14]Wang Z,Zhang H,Zhang P,et al.Upregulation of miR-2861 and miR-451 expression in papillary thyroid carcinoma with lymph node metastasis[J].Med Oncol,2013,30(2):577.

[15]張雪梅,孫延亮,姚志勇,等.miR-451通過(guò)靶向調(diào)控MIF抑制胃癌細(xì)胞的遷移與侵襲[J].中國(guó)醫(yī)師雜志,2014,16(9):1172.

Expression and clinical significance of miR-451 and MIF in gastric cancer

WANGQing-yu.

(Departmentofvascularsurgery，CentralHospitalofPanjinCity,Panjin124000，China)

Abstract:ObjectiveTo study the expression and clinical significance of miR-451 and MIF in gastric cancer tissues.Methods60 cases of gastric cancer patients with tumor tissue (observation group) and its adjacent tissue specimens (control group) was selected.The RT-PCR method was used to detect the expression level of miR-451 and MIF in gastric cancer tissues and adjacent tissues.Its relationship with clinical pathology was observed.ResultsRT-PCR results showed that the expression level of MIF in tumor tissues was significantly higher than that in control group (P<0.05).The expression level of miR-451 was significantly lower than that in control group (P<0.05).Compared the expression of miR-451 and MIF in gastric cancer,the expression of and MIF was associated with miR-451(P>0.05).Which was associated with tumor differentiation,TNM stage,invasion depth and lymph node metastasis (<0.05 P).Spearman rank correlation analysis showed that the expression of miR-451 and MIF in gastric cancer group had significantly negative correlation(r=-0.697,P=0.012).ConclusionThe expression of MIF in gastric cancer tissues is significantly increased,while the expression of miR-451 was significantly decreased,and it had significant correlation,which can be used as an important assistant index for diagnosis,treatment and prognosis of gastric cancer.

Key words:gastric cancer;MIF;miR-451;expression

(收稿日期：2015-10-11)

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：R375.2

文章編號(hào)：1007-4287(2016)03-0375-03