陳紅濤，覃小菊，呂　冬，張楚楚，董彩梅

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高脂膳食聯(lián)合鏈脲佐菌建立2型糖尿病大鼠模型研究

陳紅濤，覃小菊，呂冬，張楚楚，董彩梅

摘要：[目的]探索建立一種穩(wěn)定簡(jiǎn)單的2型糖尿病大鼠模型。[方法]將40只無(wú)特定病原體級(jí)雄性大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為造模組(30只)和對(duì)照組(10只)，造模組高脂飼料喂養(yǎng)后腹腔注射鏈脲佐菌(STZ)，對(duì)照組注射等體積緩沖液，監(jiān)測(cè)兩組空腹血糖、體重、飲水量、尿量等。[結(jié)果]造模組血糖和飲水量明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，成功造模25只，造模成功率83.33%。[結(jié)論]高脂膳食聯(lián)合STZ腹腔注射誘導(dǎo)建立大鼠2型糖尿病模型操作簡(jiǎn)單、成功率較高，是一種較理想的造模方法。

關(guān)鍵詞：2型糖尿病；動(dòng)物模型；高脂膳食；鏈脲佐菌；大鼠；血糖

Study on establishment of type 2 diabetic rat model using high fat diet combined with streptozotocin

Chen Hongtao，Qin Xiaoju,Lü Dong，et al

[Shaoyang Medical College (Department of Nursing),Hunan 422000 China]

AbstractObjective:To probe into a stable and simple model of type 2 diabetic rats.Methods:A total of 40 male rats without specific pathogen level were randomly divided into modeling group(30 rats) and control group (10 rats)by using a random number table method,the rats in modeling group were intraperitoneal injected with streptozotocin (STZ) after high-fat diet,while the rats in control group were injected with equal volume of buffer，monitoring the two groups of fasting blood glucose，weight，water intake，urine volume.Results:The blood glucose and water intake of the model group were significantly higher than that in control group(P<0.01)，the number of success establishment of model was 25，and its success rate was 83.33%.Conclusion:High fat diet combined with intraperitoneal injection of STZ to establish the model of type 2 diabetes rats was simple and had higher success rate,which was an ideal method of making model.

Key wordstype 2 diabetes；animal model；high fat diet； streptozotocin；rats；blood glucose

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是生命科學(xué)的重要研究方法，其作為臨床實(shí)驗(yàn)的過(guò)渡，從組織病理生理學(xué)的高度為臨床護(hù)理技術(shù)的革新及安全應(yīng)用提供了理論參考依據(jù)[1]。適當(dāng)可行的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)非常必要，可有效指導(dǎo)護(hù)理理論與臨床實(shí)踐[2]。國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)統(tǒng)計(jì)顯示，截止2014年全球共有3.87億例糖尿病病人，其中2 型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)占85%～95%[3]。我國(guó)2010年調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，20歲以上人群中糖尿病總體患病率達(dá)到了9.7%，病人總數(shù)已超過(guò)9 200萬(wàn)例以上[4]。建立合適的動(dòng)物模型是研究糖尿病發(fā)病機(jī)制和臨床防治的基礎(chǔ)。為了開(kāi)展糖尿病足潰瘍創(chuàng)面護(hù)理的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，本研究采用高脂喂養(yǎng)后腹腔注射鏈脲佐菌(STZ)的方法建立了穩(wěn)定的2型糖尿病大鼠模型?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料無(wú)特定病原體級(jí)雄性大鼠40只，由我校動(dòng)物實(shí)訓(xùn)中心提供，體質(zhì)量(200±15)g。高脂飼料(配方：蛋黃2.5%，蔗糖20.0%，豬油10.0%，基礎(chǔ)飼料67.5%)喂養(yǎng)，自由攝食、進(jìn)水，室溫18 ℃～22 ℃。

1.2制備糖尿病大鼠模型將40只大鼠編號(hào)，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為造模組(30只)和對(duì)照組(10只)。造模組高脂飼料喂養(yǎng)2個(gè)月，禁食16 h后，腹腔注射鏈脲佐菌(STZ)(0.1 M加pH 4.2的枸櫞酸鈉-枸櫞酸緩沖液配制成10 mg/mL溶液)35 mg/kg[5]；對(duì)照組普通飼料喂養(yǎng)2個(gè)月，腹腔注射等體積的枸緣酸鈉-枸櫞酸緩沖液。1周后，造模組大鼠有多飲、多尿、體質(zhì)量減輕，空腹血糖≥16.7 mmol/L的大鼠入選為模型[6]。

1.3評(píng)價(jià)指標(biāo)2組均于腹腔注射后第3天、第7天、第14天、第21天、第28天分別記錄大鼠體重、平均飲水量，觀察墊料濕度粗測(cè)記錄尿量，并取尾靜脈空腹血進(jìn)行血糖測(cè)定。

2結(jié)果

2.1一般狀況觀察發(fā)現(xiàn)，造模組大鼠逐漸出現(xiàn)活動(dòng)減少、反應(yīng)遲鈍、皮毛發(fā)黃，第3天出現(xiàn)多飲、多食、多尿等癥狀；對(duì)照組大鼠體態(tài)活潑，皮毛干凈、有光澤，生長(zhǎng)正常。

2.22型糖尿病大鼠模型的制作結(jié)果根據(jù)入選標(biāo)準(zhǔn)，成功造模25只糖尿病大鼠，造模成功率83.33%。兩組大鼠血糖、體重、飲水量變化見(jiàn)表1、表2。

表1　兩組大鼠腹腔注射后不同時(shí)間血糖水平比較±s)　mmol/L

表2　兩組大鼠腹腔注射前后體重、飲水量比較±s)

3討論

糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病，主要由胰島素抵抗和胰島素分泌受損引起的糖、 脂肪和蛋白質(zhì)代謝紊亂。2型糖尿病的特征初期為胰島素作用抵抗，胰島β細(xì)胞漸進(jìn)性功能障礙，進(jìn)而發(fā)展為胰島素分泌缺陷為主，伴或不伴胰島素作用抵抗[7]。有研究指出，膳食引起的肥胖是當(dāng)前糖尿病流行的主要決定因素之一[8]。而STZ是亞硝基脲類(lèi)似物，可通過(guò)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2進(jìn)入胰島β細(xì)胞，干擾葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而誘導(dǎo)DNA的烷基化，導(dǎo)致胰島β細(xì)胞壞死[9]。因此，本研究選用高脂膳食聯(lián)合STZ腹腔注射誘導(dǎo)建立大鼠2型糖尿病模型，可以模擬胰島素作用抵抗，出現(xiàn)血糖升高、體重減輕等臨床癥狀，同時(shí)成本較低，是一種較理想的造模方法。

隨著護(hù)理專(zhuān)科的發(fā)展，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已為各護(hù)理專(zhuān)科科研的發(fā)展發(fā)揮了積極的作用。近10余年來(lái)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)護(hù)理研究論文數(shù)量呈現(xiàn)逐年增加的趨勢(shì)，且部分研究成果已在臨床取得了較好的應(yīng)用效果[1]。但護(hù)理科研中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與應(yīng)用目前仍處于初始階段，還應(yīng)積極進(jìn)行創(chuàng)造性思維，逐步探索結(jié)合護(hù)理專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)的合適可行的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。本研究屬于糖尿病足潰瘍創(chuàng)面護(hù)理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的前期研究，為糖尿病足潰瘍大鼠模型的制備奠定了研究基礎(chǔ)，也是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在護(hù)理研究中的一次有益嘗試。但2型糖尿病病因復(fù)雜，涉及遺傳因素與環(huán)境因素及其相互作用， 目前尚無(wú)一種公認(rèn)的理想造模方法。不過(guò)隨著科學(xué)技術(shù)及科研水平的不斷發(fā)展，2型糖尿病動(dòng)物模型的制作必將取得更深層次的突破。

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(本文編輯李亞琴)

(收稿日期：2015-08-07；修回日期：2016-02-20)

中圖分類(lèi)號(hào)：R471

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

doi:10.3969/j.issn.1009-6493.2016.07.007

文章編號(hào)：1009-6493(2016)03A-0791-02

作者簡(jiǎn)介陳紅濤，講師，碩士研究生在讀,單位：422000，邵陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校(護(hù)理系)(學(xué)習(xí)單位：湖南師范大學(xué)醫(yī)學(xué)院);覃小菊、呂冬、張楚楚單位：422000，邵陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校(護(hù)理系)；董彩梅(通訊作者)單位：412200，湖南師范大學(xué)附屬湘東醫(yī)院。

基金項(xiàng)目湖南省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目，編號(hào)：13C866；2013年湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目，編號(hào)：2013-576。