劉現(xiàn)輝， 郭曉娜

（1.河南省中醫(yī)院血液科，河南鄭州450002；2.黃河科技學(xué)院醫(yī)學(xué)院，河南鄭州450063）

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補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血法對(duì)慢性再生障礙性貧血患者的血象、骨髓象及IL-17的影響

劉現(xiàn)輝1， 郭曉娜2

（1.河南省中醫(yī)院血液科，河南鄭州450002；2.黃河科技學(xué)院醫(yī)學(xué)院，河南鄭州450063）

摘要:目的 探討補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血法對(duì)慢性再生障礙性貧血（CAA）患者的血象、骨髓象及白細(xì)胞介素-17（IL-17）的影響。方法 抽選我院2010年2月—2014年7月收治的59例CAA患者，采用隨機(jī)數(shù)字分為對(duì)照組（n =29例，予以西藥常規(guī)治療）和觀察組（n =30例，在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)合中藥補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血法治療），比較兩組治療前后血象指標(biāo)；對(duì)比骨髓增生程度及百分率、非造血細(xì)胞百分率等骨髓象指標(biāo)；并對(duì)比血清白IL-17及IL-17 mRNA水平。結(jié)果 觀察組治療總有效率為86.67％，明顯高于對(duì)照組的62.07％（P＜0.05）；觀察組治療后血紅蛋白（Hb）、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞（ReT）明顯升高（P＜0.05），淋巴細(xì)胞百分率（Ly）、轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度、血清鐵蛋白明顯降低（P＜0.05），且升高或降低幅度顯著大于對(duì)照組（P＜0.05）；治療后，觀察組骨髓增生程度及百分率明顯改善（P＜0.05），且改善程度優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05；觀察組非造血細(xì)胞百分率（40.87±8.05）％，明顯低于對(duì)照組的（50.72±7.94）％（P＜0.05）。IL-17:治療后，兩組IL-17以及IL-17 mRNA水平降低（P＜0.05），且觀察組IL-17以及IL-17 mRNA水平明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。結(jié)論 補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血法治療CAA，可顯著改善患者血象和骨髓象，提高療效，其機(jī)制可能與降低IL-17及IL-17 mRNA細(xì)胞因子表達(dá)有關(guān)。

關(guān)鍵詞:血象；補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血法；IL-17；再生障礙性貧血

dol:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.02.055

慢性再生障礙性貧血（CAA）是臨床常見的一種血液系統(tǒng)疾病，以貧血、感染以及出血為臨床表現(xiàn)［1］。CAA的臨床發(fā)病率較高，且病情反復(fù)、病程長，很難完全根治，嚴(yán)重影響病人的日常生活質(zhì)量。目前，西醫(yī)治療CAA多以雄激素、免疫抑制以及細(xì)胞刺激等為主，雖然短期療效明顯，但遠(yuǎn)期療效不穩(wěn)定、副作用大，并且治療費(fèi)用昂貴，大大限制了其臨床應(yīng)用［2］。國家級(jí)名老中醫(yī)陳安民教授認(rèn)為中醫(yī)治療CAA從腎論治為主，臨床辨證發(fā)現(xiàn)腎陽虛型CAA患者較多，因此，多采用補(bǔ)腎益氣法?！把a(bǔ)腎益氣活血”法是陳安民教授近年來的臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)方，在治療CAA方面取得了良好的療效?，F(xiàn)就其對(duì)CAA患者血象、骨髓象及IL-17方面的影響報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 抽選我院2010年2月—2014年7月收治的59例CAA患者，納入標(biāo)準(zhǔn)①符合《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》［3］關(guān)于CAA的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并符合《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》試行版中腎分型標(biāo)準(zhǔn)［4］，中醫(yī)辨證分型分為腎陰虛型、腎陽虛型和腎陰陽虛型，其腎陰虛型:主癥為心悸，頭暈，周身乏力，面色口唇指甲蒼白，盜汗，出血；次癥為低熱，手足心熱，口渴思飲，大便干結(jié)，舌質(zhì)淡或舌尖紅，苔薄，脈細(xì)數(shù)。腎陽虛型:主癥為心悸，頭暈，周身乏力，面色口唇指甲蒼白，形寒肢冷，腰膝酸軟；次癥為性功能減退，大便塘，多無出血或出血輕微，舌質(zhì)淡，脈沉細(xì)或虛大。腎陰陽虛型:兼有腎陰虛型及腎陽虛型癥候。②年齡18～65歲；③自愿服用中藥，簽署知情同意書。排除合并嚴(yán)重感染，心腦、肝、腎、造血、免疫系統(tǒng)等原發(fā)病者，并排除出血者、妊娠或哺乳期婦女。采用隨機(jī)數(shù)字分為對(duì)照組（n =29例）和觀察組（n =30例）。對(duì)照組:男17例，女12例，年齡20～64歲，平均（39.5± 8.7）歲，平均病程（20.1±3.6）月；觀察組:男15例，女15例，年齡18～65歲，平均（38.8±8.6）歲，平均病程（19.8±4.1）月。兩組臨床一般資料比較差異無顯著性（P＞0.05），見表1。

1.2 方法 （1）對(duì)照組:采用雄激素藥康力龍（規(guī)格為2 mg×100片，廣西南寧百會(huì)藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國藥準(zhǔn)字H45020728），2 mg/次，3次/d；環(huán)孢素（10 mg×50粒，杭州中美華東制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H10960121），4～6 mg/（kg·d），分2次服用，依據(jù)患者血液中環(huán)孢素水平進(jìn)行劑量調(diào)整，使其保持在200～400 mg/L水平；連續(xù)治療3個(gè)月一療程，治療2個(gè)療程。治療期間予以對(duì)癥支持治療，對(duì)于有細(xì)菌感染者，采用抗生素抗感染；對(duì)于血紅蛋白＜50 g/L，貧血者，予以紅細(xì)胞輸注；對(duì)于血小板＜10×109/L者，輸注血小板。（2）觀察組:在上述基礎(chǔ)上聯(lián)合中醫(yī)辨證治療。①腎陽虛型:溫腎壯陽、益氣補(bǔ)血，采用我院自制的再障1號(hào)方，黃芪30 g，仙茅、巴戟天以及仙靈脾各18 g，當(dāng)歸20 g，菟絲子、淫羊藿以及鹿角膠各15 g，骨碎補(bǔ)、白術(shù)以及白芍12 g，熟地黃20 g，雞血藤30 g。②腎陰虛型:滋陰補(bǔ)腎、涼血補(bǔ)血，采用我院自制的再障2號(hào)方進(jìn)行治療，黃芪30 g，旱蓮草以及熟地黃20 g，黃精、巴戟天12 g，當(dāng)歸12 g，桑椹子、龜板膠、何首烏以及阿膠各15 g，女貞子18 g，白芍12 g，雞血藤30 g。（3）腎陰陽兩虛型:滋陰壯陽、健脾養(yǎng)血，采用我院自制的再障3號(hào)方治療，黃芪、雞血藤各30 g、熟地黃、旱蓮草各20 g，當(dāng)歸、何首烏、巴戟天以及淫羊藿各15 g，仙靈脾、女貞子各18 g，鹿角膠以及龜板膠各20 g，黃精12 g。每日1劑，分2次溫服，連續(xù)治療6個(gè)月。

表1　兩組一般臨床資料對(duì)比

1.3 觀察指標(biāo) ①臨床療效，參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》［5］。治愈:患者貧血、出血癥狀治療后消失，血紅蛋白（Hb）男性、女性分別達(dá)到120 g/L、110 g/L，白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）達(dá)4×109/L，血小板計(jì)數(shù)（PLT）達(dá)100×109/L，并且進(jìn)行1年的觀察隨訪，未見復(fù)發(fā)。顯效:患者貧血、出血癥狀治療后均消失，Hb男性、女性分別達(dá)到120 g/L、100 g/L，WBC達(dá)3.5×109/L左右，PLT也有一定提升，進(jìn)

行3個(gè)月的隨訪觀察，患者病情穩(wěn)定或者是繼續(xù)進(jìn)步。有效:患者貧血、出血癥狀治療后有明顯好轉(zhuǎn)，不需輸血，Hb水平較治療前增長30 g/L以上，并可保持3個(gè)月。無效:患者經(jīng)治療后，臨床癥狀以及血象均未達(dá)標(biāo)。②血象指標(biāo):采用F-800型血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對(duì)患者血象情況進(jìn)行檢查，分別并取2次結(jié)果，進(jìn)行平均值計(jì)算。血象指標(biāo)包括Hb、WBC、PLT、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（ReT）、淋巴細(xì)胞百分率（Ly）、轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度、血清鐵蛋白（SF）水平。③骨髓象［5］:觀察骨髓增生程度，計(jì)算骨髓增生程度百分率和非造血細(xì)胞百分率。④IL-17及IL-17 mRNA表達(dá):采用人IL-17 ELISA試劑盒對(duì)兩組患者治療前后血清中IL-17含有量進(jìn)行檢測。應(yīng)用RT-PCR技術(shù)測定T淋巴細(xì)胞IL-17 mRNA水平，試劑盒購自上海信然實(shí)業(yè)，PE9600型PCR擴(kuò)增儀由美國PE公司生產(chǎn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，組間采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n％表示，采用x2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較 觀察組治療總有效率為86.67％，明顯高于對(duì)照組的62.07％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2= 4.706，P=0.030＜0.05），詳見表2。

表2　兩組臨床療效比較［n（％）］

2.2 兩組治療前后血象指標(biāo)變化 治療前，兩組的血象指標(biāo)對(duì)比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；觀察組治療后Hb、WBC、PLT、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、RBC等血象指標(biāo)明顯

表3　兩組治療前后血象指標(biāo)1變化（±s）

表3　兩組治療前后血象指標(biāo)1變化（±s）

注:與治療前比較，*P＜0.05；與對(duì)照組比較，#P＜0.05

組別　　時(shí)間　Hb/（g·L-1）　WBC/（×109·L-1）　PLT/（×109·L-1）　　中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)/（×109·L-1）觀察組　　治療前49.96±12.14　2.47±0.63　30.39±8.09　0.56±0.48治療后　96.48±11.86*#　3.58±0.68*#　57.43±8.58*#　2.11±1.13*#對(duì)照組　　治療前　49.93±12.15　2.46±0.60　30.33±8.01　0.54±0.41治療后　82.33±12.94*　2.98±0.59*　46.02±8.63*　1.58±1.03*

升高（P＜0.05），Ly、轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度、SF明顯降低（P＜0.05），且升高或降低幅度顯著大于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見表3和表4。

表4　兩組治療前后血象指標(biāo)2變化（±s）

表4　兩組治療前后血象指標(biāo)2變化（±s）

注:與治療前比較，*P＜0.05；與對(duì)照組比較，#P＜0.05

組別　　時(shí)間　ReT/（×109·L-1）　Ly/％　　轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度/％　SF/（μg·L-1）觀察組對(duì)照組治療前治療后治療前治療后12.34±6.93 38.94±20.51*#12.56±8.27 30.12±18.64*64.01±11.92 41.82±10.74*#65.98±13.91 48.72±9.73*58.52±9.74 40.63±8.06*#56.95±11.23 48.12±8.96*311.34±115.38 187.92±82.34*#298.93±109.23 238.13±120.71*

2.3 兩組治療前后骨髓象變化 治療前，兩組的骨髓增生程度及百分率、非造血細(xì)胞百分率對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，觀察組骨髓增生程度及百分率明顯改善（P＜0.05），且改善程度優(yōu)于對(duì)照組，差異顯著（P＜0.05）。觀察組治療后的非造血細(xì)胞百分率（40.87± 8.05）％，明顯低于對(duì)照組的（50.72±7.94）％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表5。

表5　兩組治療前后骨髓象變化

2.4 兩組治療前后IL-17以及IL-17 mRNA水平比較 兩組治療前IL-17以及IL-17 mRNA水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，兩組的IL-17以及IL-17 mRNA水平降低（P＜0.05），且觀察組IL-17以及IL-17 mRNA水平明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見表6。

表6　兩組治療前后I L-1 7以及IL-1 7 mRNA水平比較（±s）

表6　兩組治療前后I L-1 7以及IL-1 7 mRNA水平比較（±s）

注:與治療前比較，*P＜0.05；與對(duì)照組比較，#P＜0.05

組別　　時(shí)間　IL-17/（ng·L-1）　IL-17 mRNA觀察組對(duì)照組治療前治療后治療前治療后192.71±31.19 60.09±21.01*#202.72±31.21 89.69±17.05*2.63±0.23 1.27±0.24*#2.61±0.22 1.61±0.21*

3 討論

慢性再生障礙性貧血（CAA）是某些因素引起的造血功能低下，全血細(xì)胞明顯下降的一種難治性血液系統(tǒng)疾病。近年來多數(shù)學(xué)者認(rèn)為免疫功能異常是CAA的主要發(fā)病機(jī)制: T細(xì)胞亢進(jìn)，造血干細(xì)胞凋亡過度導(dǎo)致骨髓衰竭。造血微環(huán)境以及干祖細(xì)胞水平改變是由于異常免疫功能損傷所引起的［6］。中醫(yī)治療CAA主要以補(bǔ)腎為本，近年來補(bǔ)腎中藥的研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎中藥能夠顯著提高患者骨髓造血功能，調(diào)節(jié)機(jī)體應(yīng)激及陰陽平衡，治療符合西醫(yī)CAA發(fā)病機(jī)理［7］。

研究［8］證實(shí)，CAA發(fā)病與CD4+輔助T淋巴細(xì)胞紊亂關(guān)系密切。輔助性T淋巴細(xì)胞17（Th17）是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種CD4 +T細(xì)胞亞群，具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)Th17在自身免疫疾病、腫瘤以及移植排斥反應(yīng)中起著重要作用。IL-17是Th17分泌的一種細(xì)胞因子，促進(jìn)炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)TNF-α、IL-12、IL-6以及IL-8等炎性因子分泌，還有利于Th17細(xì)胞分化、誘導(dǎo)活化產(chǎn)生Tc細(xì)胞。有研究［9］發(fā)現(xiàn)，CAA患者外周血以及骨髓中Th17表達(dá)水平明顯高于正常人，而治療完全緩解者Th17表達(dá)水平較治療前降低，提示Th17參與CAA發(fā)病過程。另有研究［10］表明，與健康患者相比，CAA病人骨髓以及外周血IL-17 mRNA表達(dá)明顯上調(diào)，血清IL-17水平升高，且與Th17細(xì)胞呈正相關(guān)。由此可見，血清IL-17及外周血IL-17 mRNA表達(dá)可作為評(píng)定CAA治療療效的指標(biāo)之一。

“補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血”法是我院近年來的臨床實(shí)踐總結(jié)。經(jīng)日:血之于氣，異名同類。補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血方以補(bǔ)腎生血為基本法則，補(bǔ)腎使先天之精得充，骨髓充盈，血液化生有源以治其本；補(bǔ)氣生血，使周身得養(yǎng)，改善患者的癥狀是為治其標(biāo)；兼用固表實(shí)衛(wèi)之品，使衛(wèi)表得固，免受外邪侵襲，能使已病之正氣得安。方中多味中藥能對(duì)造血干細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用，刺激骨髓造血；部分中藥能調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，改善機(jī)體的免疫紊亂，減少對(duì)造血的抑制；還有能通過對(duì)造血微環(huán)境的調(diào)整，為正常造血提供良好的“土壤”。本研究采用黃芪為補(bǔ)氣要藥，藥理研究發(fā)現(xiàn)黃芪能夠調(diào)節(jié)免疫功能，且具有促巨核細(xì)胞成熟的作用；黃精具有益氣養(yǎng)陰、滋腎養(yǎng)脾的作用；白術(shù)健脾益氣，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)其能提高免疫功能低下動(dòng)物細(xì)胞在體外培養(yǎng)的存活率，增加TH細(xì)胞，糾正T細(xì)胞亞群紊亂，提升IL-2水平，起到免疫調(diào)節(jié)作用［11］。女貞子、龜板膠、熟地黃以及何首烏合用具有補(bǔ)腎養(yǎng)陰的功效；當(dāng)歸、雞血藤以及白芍合用養(yǎng)血活血；現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)巴戟天能增加小鼠血中皮質(zhì)醇水平、抑制其胸腺萎縮，激發(fā)骨髓造血功能，改善白細(xì)胞功能障礙；仙茅以及仙靈脾均具有雄激素樣作用；女貞子能夠提升白細(xì)胞；熟地有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用；雞血藤能夠起到保護(hù)造血系統(tǒng)的作用，改善患者骨髓微環(huán)境，提升白細(xì)胞水平，促進(jìn)造血干細(xì)胞增生以及分化。

本研究結(jié)果表明，觀察組治療后，Hb、WBC、PLT、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、ReT等血象指標(biāo)升高幅度顯著大于對(duì)照組，Ly、轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度、血清鐵蛋白降低幅度顯著小于對(duì)照組（P＜0.05）；觀察組治療總有效率明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。由此可見，補(bǔ)腎益氣養(yǎng)血法治療CAA療效顯著，能明顯改善CAA患者臨床癥狀，促進(jìn)骨髓造血功能恢復(fù)，升高外周血象。其機(jī)制可能與抑制Th17細(xì)胞分泌，降低血清IL-17等炎性因子表達(dá)，避免骨髓自身免疫破壞造血干細(xì)胞以及影響微環(huán)境，從而發(fā)揮治療作用。

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作者簡介:劉現(xiàn)輝（1978—），男，碩士，主治醫(yī)師，研究方向?yàn)橹形麽t(yī)結(jié)合對(duì)血液系統(tǒng)疾病的診斷和防治。Te1: 13938231534，E-mai1: hxyk1xh@126.com

收稿日期:2015-05-10

中圖分類號(hào):R287

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B

文章編號(hào):1001-1528（2016）02-0467-04