王志強，葛 君，陜文生（甘肅省婦幼保健院男科，甘肅 蘭州 730050）

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中藥對精子DNA損傷影響研究進展

王志強，葛 君，陜文生
（甘肅省婦幼保健院男科，甘肅 蘭州 730050）

近年來，精子DNA損傷已成為衡量男性生育力的一個重要指標［1］，同時也可能與輔助生育技術(shù)結(jié)果密切相關(guān)［2］。有研究表明［3］，不育患者精子DNA變性程度明顯高于正常生育者，其精液常規(guī)參數(shù)與精子DNA損傷之間呈顯著負相關(guān)，以精子DNA損傷為特征的精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)異常是男性不育、復發(fā)性自然流產(chǎn)以及輔助生殖技術(shù)治療失敗的重要原因之一。中醫(yī)治療男性不育癥有其獨有的優(yōu)勢，已形成一套完整實用的理論體系，綜述如下。

1 男性不育與精子DNA損傷

隨著輔助生殖技術(shù)的廣泛開展，精子評估已由傳統(tǒng)的精液常規(guī)分析向細胞-分子水平深入。目前發(fā)現(xiàn)，在男性不育癥患者中，有15%的患者精液常規(guī)檢查是正常的［4］，說明精液常規(guī)檢查已不能準確的評估男性的生育能力。近幾年精子DNA損傷作一個新的熱點逐漸進入男性不育的研究。精子DNA損傷可以使精子的受精能力下降，妊娠率降低，流產(chǎn)率增高，出現(xiàn)低妊娠、高不育、高流產(chǎn)。文獻報道，近20%的特發(fā)性不育與精子DNA損傷有關(guān)，其對生育的影響涉及多個環(huán)節(jié)，如受精、著床、植入以及胚胎存活等［5］。有研究指出，在不育癥患者中，精子DNA受損比率較正常人升高［6］。說明精子DNA損傷與男性不育密切相關(guān)，因此精子DNA損傷可作為一項新的預測男性生育能力的指標應用于臨床。對于精子DNA損傷程度的評估，學者們也提出了很多指標，其中以DFI最為常用。DFI可以間接反應精子遺傳物質(zhì)的完整性，因此對于不育癥的患者，可以通過DFI值的變化進一步了解精子DNA損傷的程度，從而更好的用于評估、預測男性的生育能力及治療和預防。報道顯示，DFI與精子正常形態(tài)率呈負相關(guān)，表明精子DNA損傷可以影響精子的形態(tài)，可能與精子DNA損傷引起精子畸形率增高有關(guān)［7］。Derijck等［8］發(fā)現(xiàn)不育癥患者中，異常形態(tài)精子數(shù)目越多，DFI值越大，二者呈顯著正相關(guān)，且以精子頭部異常較明顯。由于DFI可以對精子DNA損傷做出準確的判斷，因此DFI的檢測具有一定的臨床意義。

精子DNA損傷的機制主要包括以下幾種：①精子染色質(zhì)包裝與分離異常。在精子形成過程中，由于拓撲異構(gòu)酶作用和組蛋白超乙?；芯蛹毎籍a(chǎn)生瞬時的DNA斷裂，有助于核蛋白組型轉(zhuǎn)換時釋放扭力。由于精子細胞具有構(gòu)象脆性，所以比體細胞產(chǎn)生更多的自發(fā)DNA損傷，而且精子細胞DNA損傷修復能力較弱［9］。另外，約有5%～15%不育男性完全缺乏魚精蛋白，過多的核組蛋白（＞15%）使染色質(zhì)致密性降低，容易受到外界環(huán)境的影響。動物模型研究提示魚精蛋白缺乏與精子DNA損傷及IVF中精子受精能力的下降相關(guān)［10］。②氧化應激。畸形精子和白細胞是精液中過量活性氧的主要來源，過量活性氧會產(chǎn)生氧化應激，損傷精子DNA結(jié)構(gòu)完整性，產(chǎn)生畸形精子，這是一個相互作用的過程［11］。③細胞凋亡異常。精原細胞和精母細胞的早期凋亡主要通過Fas/FasL途徑以及 Caspase途徑介導，異常凋亡途徑可能會產(chǎn)生功能缺陷的精子。Sakkas等［12］研究表明，一些具有DNA損傷的生精細胞可能逃避了某些凋亡途徑，生成了帶有損傷DNA的精子。

2 中藥對精子DNA損傷的影響

中醫(yī)認為，腎藏精，主生殖，腎精充盛促使天癸成熟，在男子則表現(xiàn)為精氣溢瀉，能和陰陽而有子，若腎精衰少，腎氣不足則無子［13］。脾為后天之本，主運化水谷精微，為氣血生化之源。脾胃健則氣血充，生精有源，種子有望。健運脾胃，補益后天，水谷精微而能聚精歸腎，精旺則子盛。治療以補腎健脾為根本，兼以疏肝、活血等。

張孝旭等［14］研究聚精丸對弱精子癥患者精子DNA完整性的影響，將59例按照精子DNA損傷參數(shù)（DFI）值異常與否分層研究，治療3個月后，精子密度、總數(shù)、活力、活率、畸形率、DFI與治療前比較差異有統(tǒng)計學意義，說明聚精丸可顯著提高弱精子癥患者精子密度、總數(shù)、活力、活率和精子DNA完整性。楊麗霞等［15］研究生精散對男性不育患者精子DNA損傷的修復作用，56例少、弱精子癥不育患者隨機分為中藥組和對照組，觀察兩組行IVF-ET周期中獲卵數(shù)、MII卵子數(shù)、受精數(shù)、卵裂數(shù)、可用胚胎數(shù)、種植率、臨床妊娠率及流產(chǎn)率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)生精散能夠明顯降低精子DFI值，提示其能夠通過對損傷DNA修復而提高精子質(zhì)量，改善IVF-ET治療患者的妊娠結(jié)果。金保方等［16］研究養(yǎng)精膠囊聯(lián)合鋅硒寶治療男性不育患者精子DNA完整性的影響。60例合并精子DNA完整性異常的不育患者隨機分為治療組與對照組各30例，治療3個月，檢測DFI和精液常規(guī)參數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)養(yǎng)精膠囊聯(lián)合鋅硒寶可顯著降低不育患者的精子DFI值，提示養(yǎng)精膠囊和鋅硒寶治療男性不育可顯著改善精子DNA完整性。王淑紅等［17］研究益腎生精方對弱精子癥不育患者精液質(zhì)量及精子DNA完整性的影響，采用自身對照方法，用單細胞凝膠電泳法測定精子DNA完整性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)精子總彗星細胞率較治療前顯著降低，提示益腎生精方具有提高不育癥患者精子活力及改善精子DNA損傷的作用。孫振高等［18］研究補腎中藥對精液參數(shù)及精子DNA質(zhì)量的影響。將68例腎陰虛型男性不育患者隨機分為觀察組和對照組，觀察組服用六味地黃軟膠囊，對照組服用維生素E膠丸，12周為一療程。結(jié)果精子活動力、精子畸形率、精子DNA碎片化指數(shù)改善觀察組較對照組明顯，說明補腎中藥可改善精液參數(shù)，其作用機制可能與改善精子DNA質(zhì)量有關(guān)。譚廣興等［19］研究養(yǎng)精贊育顆粒對弱精子癥患者精子DNA完整性的影響。弱精子癥86例口服養(yǎng)精贊育顆粒，通過吖啶橙試驗（OAT）與計算機輔助精液分析（CASA）檢測DFI和精液常規(guī)參數(shù)。治療3個月，結(jié)果精子的活力和精子DNA的完整性顯著改善，補脾益腎是提高精子DNA完整性的有效方法。王英俊等［20］研究十子二仙湯對腎陽虛型弱精子癥患者的精子DNA完整率及精子頂體完整率的臨床效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)十子二仙湯能有效改善腎陽虛型弱精子癥的精子DNA完整率和頂體完整率。宋兵等［21］研究復方玄駒膠囊聯(lián)合維生素E對輕度少精子癥和（或）弱精子癥患者精子染色質(zhì)損傷的臨床療效。50例精液異常的不育患者隨機分為實驗組和對照組，運用計算機輔助精液分析系統(tǒng)（CASA）及精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析（SCSA）方法分析兩組患者治療前后精液常規(guī)參數(shù)和精子DNA損傷指數(shù)（DFI）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)復方玄駒膠囊聯(lián)合維生素E治療可有效改善不育患者精液質(zhì)量，對精子染色質(zhì)損傷有一定的改善作用。陳逸青等［22］研究淫羊藿總黃酮對酗酒模型小鼠精子質(zhì)量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)淫羊藿總黃酮具有拮抗酒精對小鼠生殖系統(tǒng)的毒害作用。明顯改善酗酒小鼠的睪丸/附睪質(zhì)量指數(shù)，增加精子的數(shù)量與活力，減少酒精致精子畸形率，對酗酒小鼠精子細胞DNA損傷具有明顯的保護作用。

3 小 結(jié)

DNA是生物體內(nèi)最重要的遺傳物質(zhì)，在生命活動過程中，DNA會不斷受到各種環(huán)境因素的攻擊而導致?lián)p傷。DNA損傷直接影響DNA復制、轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成，進而影響細胞生長、發(fā)育、遺傳、代謝和繁殖等生命活動［23］。精子DNA的完整性對遺傳信息的準確傳遞是必須的，任何形式的精子DNA損傷都與男性不育有直接關(guān)系，會導致男性生育力下降［24］。精子DNA的損傷能夠影響精子的受精能力、受精卵的分裂，以及胚胎的發(fā)育，但其病因錯綜復雜，至今尚未找到確切致病原因，也尚未發(fā)現(xiàn)效果顯著且得到公認的藥物。

目前研究認為中藥可以起到抗氧化應激作用而改善精子成熟的微環(huán)境，從而起到對精子 DNA 完整性的保護作用，提高精子質(zhì)量，促進精子成熟，最終提高生育力。但是，尚缺少大量更深層機制的研究，很少從氧化應激某個或多個通路入手探討其作用機制，未體現(xiàn)出中藥多途徑、多靶點作用的優(yōu)勢，因此還有大量研究工作需要完成。

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［中圖分類號］R256.59

［文獻標識碼］A

［文章編號］1004-2814（2016）04-0384-02

［基金項目］甘肅省中醫(yī)藥管理局科研課題（GZK-2014-48）

［通訊作者］陜文生

［收稿日期］2015-11-30