郝 陽(yáng)， 黃家宇， 張 敏， 李 莉， 白 璐， 母艷華（貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州貴陽(yáng)550004）

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二乙酰大黃酸固體分散體的制備以及體外溶出度的測(cè)定

郝 陽(yáng)， 黃家宇， 張 敏， 李 莉*， 白 璐， 母艷華
（貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州貴陽(yáng)550004）

摘要：目的 制備二乙酰大黃酸固體分散體，提高其體外溶出性能。方法 以聚乙烯吡咯烷酮k30（PVP k30）和泊洛沙姆188（Po1oxamer188）為輔料載體，采用研磨法制備二乙酰大黃酸固體分散體，紅外測(cè)定法和差示掃描量熱法對(duì)固體分散體進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析。結(jié)果 二乙酰大黃酸∶PVP k30∶Po1oxamer188的最佳比例為2∶1∶1，該條件下制備二乙酰大黃酸固體分散體時(shí)，其體外溶出度在30 min達(dá)到了90%。差示掃描量熱法顯示，藥物與輔料形成共聚物；紅外分析顯示，二乙酰大黃酸與兩種輔料未形成氫鍵，結(jié)構(gòu)未發(fā)生變化。結(jié)論 以PVP k30和Po1oxamer188為載體制備的固體分散體能夠顯著提高二乙酰大黃酸的體外溶出度。

關(guān)鍵詞：二乙酰大黃酸；固體分散體；體外溶出度；聚乙烯吡咯烷酮k30；泊洛沙姆188

二乙酰大黃酸（又名雙醋瑞因）是大黃酸通過(guò)雙乙酰化所得到的產(chǎn)物［1］，其作為治療骨關(guān)節(jié)炎的新藥，具有阻止軟骨被破壞、促進(jìn)軟骨合成及修復(fù)的作用［2］。由于它在水和醇中的溶解度低，體外溶出效果差，生物利用度不理想，因此需通過(guò)制劑技術(shù)來(lái)提高其溶出度。目前，以固體分散體技術(shù)提高難溶性藥物的溶出度已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用［3］，藥物制成固體分散體后，以分子或無(wú)定型狀態(tài)高度分散于水溶性載體中，從而提高藥物的溶出速率與溶出度［4］。本實(shí)驗(yàn)以水溶性聚乙烯吡咯烷酮k30（PVP k30）和泊洛沙姆188（Po1oxamer188）為輔料［5-7］，制備二乙酰大黃酸固體分散體，并對(duì)其溶出度進(jìn)行測(cè)定，為將來(lái)相關(guān)制

劑產(chǎn)品的生產(chǎn)提供技術(shù)依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 T6新世紀(jì)紫外分光光度計(jì)（北京普析通用儀器責(zé)任有限公司）；ZIS-6G溶出試驗(yàn)儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；水浴鍋。

1.2 試藥 二乙酰大黃酸（純度＞99%）；聚乙烯吡咯烷酮k30、泊洛沙姆188均為分析純。

2 方法

2.1 固體分散體的制備

2.1.1 二乙酰大黃酸固體分散體的制備 按比例稱取二乙酰大黃酸、PVP k30以及Po1oxamer188適量，將PVP k30和Po1oxamer188溶解于無(wú)水乙醇中，再倒入二乙酰大黃酸固體粉末，50℃水浴蒸干無(wú)水乙醇，-20℃冰箱冷凍2 h，真空干燥器干燥過(guò)夜，研磨，過(guò)100目篩備用［8］。

2.1.2 藥物與輔料物理混合物的制備 取二乙酰大黃酸、泊洛沙姆188和PVP k30適量，按2∶1∶1比例混合，即得。

2.2 二乙酰大黃酸溶出度測(cè)定

2.2.1 最大吸收波長(zhǎng)的選擇 稱取二乙酰大黃酸對(duì)照品適量，磷酸鹽緩沖液（pH＝7.0）溶解稀釋成4 μg/mL的溶液。另取泊洛沙姆188和PVP k30適量，磷酸鹽緩沖液溶解稀釋，進(jìn)行紫外掃描。發(fā)現(xiàn)二乙酰大黃酸在258 nm處有最大吸收波長(zhǎng)，泊洛沙姆188和PVP k30對(duì)其最大吸收沒(méi)有影響。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取二乙酰大黃酸對(duì)照品50.30 mg，置于1 000 m L量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH＝7.0）適量，超聲溶解，定容至刻度，搖勻，即得對(duì)照品貯備液。再分別精密量取貯備液適量，置于25 mL量瓶中，磷酸鹽緩沖液稀釋定容成1.006、2.013、4.026、6.038、8.051、10.064 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以磷酸鹽緩沖液為空白，在258 nm處測(cè)定吸光度值。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（χ），吸光度為縱坐標(biāo)（y）進(jìn)行線性回歸，回歸方程為y＝0.098 7χ＋0.011 4，r＝0.999 9。表明二乙酰大黃酸在1.006～10.064 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.3 回收率試驗(yàn) 精密量取溶出度測(cè)定條件（pH＝7.0的磷酸緩沖液，溶出溫度［37±0.5］℃，轉(zhuǎn)速100 r/min）下的溶出樣品0.5 mL，共9份，置于25 mL量瓶中，同時(shí)分別加入質(zhì)量濃度為50.32 μg/mL的對(duì)照品貯備液1.0、2.0、3.0 mL，定容至25 mL，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法測(cè)定吸光度值，計(jì)算回收率。結(jié)果，平均回收率為94.99%，ISD為1.78%。

2.2.4 溶出度的測(cè)定 采用《中國(guó)藥典》2010年版第二部附錄XC溶出度測(cè)定第一法（籃法）測(cè)定［9］，量取pH 7.0的磷酸緩沖液（脫氣）900 mL，作為溶出介質(zhì)，以溶出溫度（37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速100 r/min為溶出條件進(jìn)行測(cè)定。再精密稱取含二乙酰大黃酸50 mg的固體分散體適量，置于溶出杯中，開(kāi)始計(jì)時(shí)，分別于1、2、4、8、20、30 min取樣5 mL，0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾。同時(shí)，向溶出杯中補(bǔ)充等量等溫的溶出介質(zhì)，取續(xù)濾液稀釋10倍，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算藥物累積釋放百分率，繪制溶出曲線。

2.3 固體分散體物相鑒別

2.3.1 差熱分析（DSC） 工作條件為升溫范圍20～600℃；升溫速率10 k/min；參比物為空鋁坩堝；氣體為氮?dú)?；差熱量?1.0～2.5 mW。分別對(duì)二乙酰大黃酸原料藥、PVP k30、泊洛沙姆188、物理混合物和所制備的固體分散體樣品進(jìn)行分析。

2.3.2 紅外光譜分析（II） 波數(shù)范圍為4 000～400 cm-1，溴化鉀壓片。將二乙酰大黃酸、PVPk30以及Po1oxamer188所制備的固體分散體與物理混合物進(jìn)行紅外光譜分析。

3 結(jié)果

3.1 體外溶出結(jié)果及溶出曲線

3.1.1 不同輔料比例下溶出結(jié)果 分別將二乙酰大黃酸、PVP k30和泊洛沙姆188按照4∶1∶1、2∶1∶1、2∶1.5∶1.5、1∶1∶1的比例制備固體分散體，測(cè)定不同比例下的藥物溶出度，并制作溶出曲線，見(jiàn)圖1。由圖可知，比例為2∶1∶1的固體分散體有較高的溶出速率和載藥量，達(dá)到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)目的，故選定其作為制備固體分散體的最佳輔料比例。

圖1 不同比例輔料制備固體分散體的溶出曲線（n＝5）

3.1.2 不同揮干溫度下溶出結(jié)果 將二乙酰大黃酸、PVP k30和泊洛沙姆188按照2∶1∶1的比例制成固體分散體，選擇30、40、50℃的水浴溫度揮干無(wú)水乙醇，制備不同溫度下的藥物溶出曲線，見(jiàn)圖2。由圖可知，不同溫度條件下?lián)]干乙醇對(duì)藥物固體分散體的溶出度無(wú)明顯差異。

圖2 不同揮干溫度制備固體分散體的溶出曲線（n＝5）

3.2 固體分散體的鑒別

3.2.1 差示掃描量熱分析 DSC結(jié)果表明，二乙酰大黃酸原料藥在252.3℃處有一吸熱峰；PVP k30在88.1和425.5℃處各有一吸熱峰；泊洛沙姆188在57.9和389.7℃處各有一放熱峰；藥物與載體比為2∶1∶1的固體分散體中，二乙酰大黃酸的吸熱峰遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于原料藥，物理混合物中二乙酰大黃酸的吸熱峰略有降低，但高于固體分散體，在335℃處有一較強(qiáng)放熱峰，說(shuō)明藥物與載體形成低共熔物［10-11］，見(jiàn)圖3。3.2.2 紅外光譜分析 二乙酰大黃酸中含有C＝O、COOH 及CH3COO，其中CH3COO中的C＝O在1 770 cm-1處有一強(qiáng)吸收峰；COOH中的C＝O在1 695 cm-1處有一強(qiáng)吸收峰；C＝O在1 680 cm-1處有一強(qiáng)吸收峰。另外，在1 215 cm-1處還有CH3COO中的C-O強(qiáng)吸收峰；PVP k30分子中含有C＝O，在1 654 cm-1處有一強(qiáng)吸收峰；Po1oxamer188主要是由丙二醇和環(huán)氧丙烷形成的共聚物，在紅外2 889和1 112 cm-1處有相對(duì)較強(qiáng)的吸收峰，為其亞甲基和醚鍵的特征峰。對(duì)原料藥、物理混合物和固體分散體的紅外圖譜進(jìn)行比較分析，發(fā)現(xiàn)三者在1 695、1 680 cm-1處的強(qiáng)吸收峰都沒(méi)有發(fā)生位移，峰位均無(wú)明顯變化，推測(cè)其與載體未發(fā)生化學(xué)變化，見(jiàn)圖4。

圖3 泊洛沙姆188（1）、固體分散體（2）、物理混合物（3）、原料藥（4）、PVPk30（5）的差示熱分析掃描圖

圖4 PVPk30（1）、泊洛沙姆188（2）、原料藥（3）、物理混合物（4）、固體分散體（5）的紅外光譜圖

4 討論

由圖1可知，不同比例輔料所制備的固體分散體根據(jù)輔料用量的不同，溶出度也有相應(yīng)變化。當(dāng)藥物、PVP k30、泊洛沙姆188的用量比例為4∶1∶1時(shí)，溶出效果較原料藥有所增加，但是并未達(dá)到最大；當(dāng)三者用量分別為2∶1∶1、2∶1.5∶1.5、1∶1∶1時(shí)，溶出效果顯著，而且其體外溶出度無(wú)明顯差異。為節(jié)約成本，本實(shí)驗(yàn)選擇2∶1∶1作為二乙酰大黃酸固體分散體的制備工藝。由圖2可知，不同溫度對(duì)藥物的溶出度沒(méi)有顯著影響，為提高揮干速率，故選擇50℃為揮干乙醇的溫度。

由于藥物熔點(diǎn)較高，高溫下穩(wěn)定性較差，同時(shí)二乙酰大黃酸的溶解性也不理想，無(wú)法在水或醇中溶解，所以采用研磨法制備固體分散體。同時(shí)，以泊洛沙姆188以及PVPk30為固體分散體的載體輔料，可提高原料藥的溶出度。由于PVPk30能夠以無(wú)定形狀態(tài)存在，而泊洛沙姆188的熔點(diǎn)在52～57℃之間，親水性強(qiáng)，載藥量大，本身也是一種表面活性劑，因此均能很好地應(yīng)用于固體分散體的制備中。實(shí)驗(yàn)顯示，選用這兩種輔料制備二乙酰大黃酸固體分散體能夠顯著提高其溶出度。

另外，本品對(duì)光線不穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在藥物溶出度達(dá)到最大值后，其最大溶出百分率沒(méi)有在最高點(diǎn)維持，而會(huì)略微降低。由此表明，在生產(chǎn)和分析的過(guò)程中，應(yīng)注意避光操作。

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*通信作者：李 莉（1973—），女，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)樗幬镔|(zhì)量控制。Te1：13765110871，E-mai1：1226072965@qq.com

作者簡(jiǎn)介：郝 陽(yáng)（1991—），女，碩士，研究方向?yàn)樗幬锓治?。Te1：18285060152，E-mai1：443811043@qq.com

基金項(xiàng)目：貴陽(yáng)市科技計(jì)劃項(xiàng)目（［2013204］4-4）；2014年貴州省教育廳大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)（培育）項(xiàng)目（201410660029）

收稿日期：2015-05-15

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.051

中圖分類號(hào)：I 944

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1001-1528（2016）03-0702-03

網(wǎng)絡(luò)出版日期：2015-08-28

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detai1/31.1368.I.20150828.1155.004.htm1