趙娜夏， 夏廣萍， 韓英梅（天津市新藥設(shè)計與發(fā)現(xiàn)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津藥物研究院有限公司，天津300193）

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環(huán)黃芪醇-單葡萄糖苷固體分散體的制備及溶出特性的研究

趙娜夏， 夏廣萍， 韓英梅*
（天津市新藥設(shè)計與發(fā)現(xiàn)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津藥物研究院有限公司，天津300193）

摘要：目的 制備環(huán)黃芪醇-單葡萄糖苷（AMG）固體分散體，并研究其體外溶出度和溶出速率。方法 采用溶劑-熔融法，以聚乙二醇6000（PEG6000）為載體，制備AMG固體分散體。體外溶出實(shí)驗(yàn)評價其溶出速率，紅外光譜、X射線粉末衍射和差示掃描量熱分析法研究其性質(zhì)。結(jié)果 在固體分散體中，AMG以無定形的狀態(tài)存在，其與PEG6000的最佳比例為1∶3。結(jié)論 固體分散體的制備能有效改善AMG的溶出特性。

關(guān)鍵詞：環(huán)黃芪醇-單葡萄糖苷（AMG）；固體分散體；溶出度；溶出速率

KEY W 0RDS：cyc1oastrageno1-6-O-monog1ucoside（AMG）；so1id dispersion；disso1ution；disso1ution rate

環(huán)黃芪醇-單葡萄糖苷（cyc1oastrageno1-6-O-monog1ucoside，AMG，結(jié)構(gòu)見圖1）是黃芪中皂苷類指標(biāo)性成分黃芪甲苷的衍生化產(chǎn)物，具有改善心臟功能和緩解心肌肥厚的作用，但其溶解性較差，口服生物利用度低，影響藥效的發(fā)揮。固體分散技術(shù)應(yīng)用于難溶性藥物的固體制劑時，可以增加其溶解度和溶出速率，提高生物利用度和穩(wěn)定性［1］，為評價該技術(shù)在AMG固體口服制劑開發(fā)中的應(yīng)用可行性，本實(shí)驗(yàn)制備AMG-PEG6000的固體分散體，并考察了其體外溶出特性。

1 材料

515高效液相色譜儀，包括717p1us自動進(jìn)樣器（美國Waters公司）；A11tech 2000蒸發(fā)光散射檢測器（美國A11tech公司）；ZIS-8G智能溶出試驗(yàn)儀（天大天發(fā)科技公司）；PTC-10A TG-DTA分析儀、D/max-2500X射線衍射儀（日本理學(xué)公司）；MAGNA-560傅里葉變換紅外光譜儀（美國Nico1et公司）。

AMG（自制，純度＞99%）。聚乙二醇6000 （PEG6000，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所，分析純）。乙腈為優(yōu)級純；水為純凈水；其他試劑均為分析純。

圖1 環(huán)黃芪醇-單葡萄糖苷的結(jié)構(gòu)Fig.1 Structure of cycloastragenol-6-O-monoglucoside

2 方法

2.1 樣品的制備

2.1.1 AMG-PEG6000固體分散體的制備 采用溶劑-熔融法，制備AMG-PEG6000固體分散體。按照質(zhì)量比1∶3、1∶6、1∶9，分別稱取AMG和PEG6000。將后者置于蒸發(fā)皿中，85℃水浴加熱至完全熔融，另取前者溶于適量無水乙醇中，滴入熔融態(tài)的后者，不斷攪拌至乙醇完全揮去，迅速涂布于預(yù)冷鋼板上，置冰箱冷凍24 h。取出，過80目篩粉碎，干燥器中常溫保存［2］。

2.1.2 AMG物理混合物的制備 按照處方配比，稱取AMG和PEG6000，于乳缽中研磨均勻，過80目篩，干燥器中常溫保存。

2.2 AMG的測定

2.2.1 HPLC色譜條件［3］Phenomenex Luna C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相為乙腈-水（4∶6）；體積流量1.0 mL/min；柱溫25℃；漂移管溫度105℃；氣體體積流量2.6 L/min。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍 精密稱取AMG對照品適量，加甲醇制成0.2 mg/mL的對照品溶液。分別精密吸取上述溶液2、5、10、15、20 μL，注入液相色譜儀，測定峰面積，以峰面積的對數(shù)值為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量的對數(shù)值為橫坐標(biāo)（X）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y＝5.801 1＋1.337 64X，r＝0.999 9。結(jié)果表明，AMG在0.4～4.0 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.3 精密度試驗(yàn) 取AMG對照品溶液10 μL，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣5次，測定峰面積。結(jié)果，峰面積ISD為0.46%，表明儀器精密度良好。2.2.4 AMG樣品含有量的測定 精密稱取AMG理論含有量約為5.0 mg的固體分散體及物理混合物，置于25 mL量瓶中，甲醇溶解并稀釋至刻度，混勻，濾過。分別吸取10 μL，注入液相色譜儀，測定峰面積，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算AMG含有量。

2.2.5 AMG樣品的體外溶出試驗(yàn)［4-5］參照《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄XC溶出度測定法第二法（槳法）［6］，以水為溶出介質(zhì)，介質(zhì)溫度37℃，介質(zhì)體積500 mL，轉(zhuǎn)速75 r/min。精密稱取AMG原料、固體分散體及物理混合物（含AMG約30.0 mg），均勻散布于介質(zhì)液面，從樣品粉末開始接觸液面時開始記時攪拌，分別于5、10、20、40、60、90及120 min取樣2 mL，補(bǔ)加同體積溶出介質(zhì)，溶液用0.8 μm濾膜濾過。取續(xù)濾液50 μL，注入液相色譜儀，測定峰面積，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算出AMG含有量，進(jìn)而計算出累積溶出率，并對時間作圖。

2.3 AMG樣品的DSC分析 以A12O3為參比物；升溫速度10℃/min；溫度范圍為室溫～250℃；保護(hù)氣為空氣。分別對AMG原料、PEG6000及比例為1∶3的AMG-PEG6000物理混合物和固體分散體進(jìn)行DSC分析。

2.4 AMG樣品的X-射線粉末衍射分析 工作條件為Cu靶；管電壓40 kV；管電流100 mA。分別對AMG原料、PEG6000及比例為1∶3的AMGPEG6000物理混合物和固體分散體進(jìn)行分析。

2.5 AMG樣品的紅外光譜分析 KBr壓片制備樣品，分辨率4 cm-1，掃描次數(shù)20，掃描范圍400～4 000 cm-1。分別對AMG原料、PEG6000及原-輔料比為1∶3的AMG-PEG6000物理混合物和固體分散體進(jìn)行分析。

3 結(jié)果

3.1 體外累積溶出曲線（圖2） 由圖可知，各比例固體分散體在各時間點(diǎn)的溶出度均高于AMG原料，而由于PEG6000本身具有助溶作用，故物理混合物的溶出度也高于原料藥。在溶出5 min時，各分散體間的溶出差異不大；隨著溶出時間的延長，比例為1∶3的固體分散體顯示出明顯的優(yōu)勢，在40 min時已達(dá)到91.95%的溶出度，而1∶6和1∶9的在120 min時，溶出度只有80%左右。

圖2 AMG及其物理混合物和固體分散體的體外累積溶出曲線（n＝3）Fig.2 In vitro accumulation dissolution curves of AMG，AMG physical m ixture and AMG solid dispersion （n＝3）

3.2 差示掃描量熱分析圖（圖3） 由圖可知，AMG無明顯的熔融峰，PEG6000及AMG-PEG6000物理混合物在70℃附近有一尖銳的熔融峰，而固體分散體的熔融峰呈現(xiàn)一寬峰，并且位移至56℃，說明在分散體中，藥物與載體形成了低共熔物［7］。

圖3 AMG固體分散體的差示掃描量熱分析圖Fig.3 Differential scanning calorimetric curves of AMG solid dispersion

3.3 紅外光譜圖（圖4） 比較AMG和AMGPEG6000物理混合物的紅外圖譜發(fā)現(xiàn)，羥基峰（3 481 cm-1左右）基本未產(chǎn)生位移，而AMGPEG6000固體分散體的紅外圖譜中，其產(chǎn)生了明顯的低頻位移，位移至3 417 cm-1，說明AMG與輔料間形成了分子間氫鍵。也正是由于氫鍵的形成，提高了AMG在PEG6000中的分散度，從而改善其溶解度，并提高了溶出度［8］。

圖4 AMG固體分散體中各物質(zhì)的紅外光譜圖Fig.4 Infrared spectrum of various substances in AMG solid dispersion

3.4 X-射線衍射圖（圖5） 在物理混合物中，可見AMG晶體和PEG6000的特征衍射峰，而固體分散體中僅可見后者，并且未見新晶體的衍射峰出現(xiàn)，說明沒有新物質(zhì)產(chǎn)生。另外，在固體分散體中，AMG以無定形狀態(tài)分散于輔料中［9］。

圖5 AMG固體分散體中各物質(zhì)的X射線衍射圖Fig.5 X-ray diffraction images of various substances in AMG solid dispersion

4 討論

在體外溶出實(shí)驗(yàn)中，考察了不同pH值水溶液和低體積分?jǐn)?shù)乙醇對溶解度的影響。結(jié)果，pH值對溶解度無明顯改善，而水比低體積分?jǐn)?shù)乙醇更接近體內(nèi)環(huán)境?？紤]到調(diào)整原料藥和水的比例后，可使藥物滿足漏槽條件，故選用水作為溶出介質(zhì)。

從AMG-PEG6000的溶出曲線可以看出，溶出度并不與載體所占比例成正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)中觀察到，分散體粉末進(jìn)入溶出介質(zhì)后，1∶6和1∶9的固體分散體更易聚集成團(tuán)，從而影響樣品的釋放，這可能與載體本身的性質(zhì)有關(guān)。

DSC及粉末衍射實(shí)驗(yàn)表明，在原-輔料比1∶3的固體分散體中，樣品以極細(xì)微的無定形狀態(tài)均勻分散，當(dāng)遇到溶出介質(zhì)時可以實(shí)現(xiàn)快速釋放，故累積溶出度要高于同比例的物理混合物。

AMG溶解性差，極大地限制了其作為口服制劑的應(yīng)用。本研究結(jié)果提示，固體分散技術(shù)可大幅提高該化合物溶出速率和溶出度，為其口服固體制劑開發(fā)的新嘗試。另外，固體分散技術(shù)對AMG口服吸收的改善情況正在進(jìn)一步評價中。

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Preparation and characteristics of dissolving of cycloastragenol-6-O-monoglucoside solid dispersion

ZHAO Na-xia， XIA Guang-ping， HAN Ying-mei*

（TianJin Municipal Key Laboratory for Drug Design &Discovery；TianJin Instituteof Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co.，Ltd.，TianJin 3OOI93，China）

ABSTRACT：AIM To prepare cyc1oastrageno1-6-O-monog1ucoside（AMG）so1id dispersion and to study its disso1ution and disso1ution rate in vitro.METH 0 DS The AMG so1id dispersion was prepared by so1vent-me1ting method with PEG6000 as the carrier.Then its re1ease rate was determined by disso1ution experiment in vitro，and the propertieswere investigated by infrared spectra，powder X-ray diffraction and differentia1 scanning ca1orimetry （DSC）.RESULTS Existing in an amorphous form in the so1id dispersion，AMG he1d the best ratio of 1∶3 to PEG6000.C0 NCLUSI0N The preparation of so1id dispersion can significant1y improve the disso1ving characteristics of AMG.

*通信作者：韓英梅（1970—），女，研究員，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物活性成分及新藥開發(fā)。Te1：（022）23006959，E-mai1：hanyingmei @163.com

作者簡介：趙娜夏（1979—），女（滿族），碩士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物活性成分及新藥開發(fā)。Te1：（022）23006959，E-mai1：farfarns @163.com

收稿日期：2015-10-12

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.013

中圖分類號：I 944

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1001-1528（2016）03-0539-04