王 鋒

(浙江省寧?？h動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,浙江寧海 315600)

豬偽狂犬病的診斷

王 鋒

(浙江省寧?？h動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,浙江寧海 315600)

通過(guò)對(duì)發(fā)生在浙江省寧波市某豬場(chǎng)的一起豬偽狂犬病的診治,從豬偽狂犬病的診斷技術(shù),預(yù)防措施對(duì)豬偽狂犬病進(jìn)行了較全面的介紹,以期為豬偽狂犬病的預(yù)防和治療提供參考。

豬;偽狂犬病;診斷

1 豬偽狂犬病的診斷技術(shù)

提高豬偽狂犬病的診斷技術(shù)以及診斷準(zhǔn)確率是養(yǎng)豬業(yè)防控豬偽狂犬病的先決條件，只有早發(fā)現(xiàn)和早防控才能更加有效地避免養(yǎng)豬業(yè)遭受巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前有關(guān)豬偽狂犬病的診斷技術(shù)主要有以下幾個(gè)方面。

1.1 臨床診斷

臨床診斷就是根據(jù)典型的臨床癥狀、流行病學(xué)特點(diǎn)、病理剖檢、發(fā)病史等信息判斷豬只是否患有豬偽狂犬病的過(guò)程。不同生長(zhǎng)時(shí)期、不同性別的豬只患病后的臨床癥狀不同。孕期母豬患病后會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)甚至是產(chǎn)死胎的現(xiàn)象；仔豬感染后則會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐、厭食、呼吸困難等臨床癥狀，其中2～3周的仔豬的死亡率高達(dá)100%；公豬感染會(huì)出現(xiàn)繁殖力下降等癥狀。隱性感染的公豬沒(méi)有明顯的臨床癥狀，需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷確診，以便及時(shí)隔離已感染豬只，控制感染的蔓延。

1.2 病原學(xué)診斷

病原學(xué)診斷包括病毒分離與鑒定和動(dòng)物實(shí)回歸驗(yàn)。病毒分離與鑒定就是采集病樣的腦、扁桃體、腎和脾等組織剪碎后研磨，經(jīng)滅菌處理且加有抗生素的平衡鹽溶液或生理鹽水稀釋后接種在培養(yǎng)成單層的適宜細(xì)胞上，觀察直至出現(xiàn)特征性細(xì)胞病變。一般情況下，2～5d即可分離到病毒。有病變的細(xì)胞用H.E染色，鏡檢可觀察到嗜酸性核內(nèi)包涵體，也可進(jìn)一步以電鏡等方法鑒定。動(dòng)物回歸實(shí)驗(yàn)就是把從豬的部分組織上分離出的病毒接種到實(shí)驗(yàn)鼠身上，經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)鼠在經(jīng)過(guò)超過(guò)十代的繁殖后，所有的鼠類(lèi)均出現(xiàn)了典型病毒，并可以在醫(yī)學(xué)電鏡下觀察到明顯的偽狂犬病病毒的存在。

1.3 分子生物學(xué)方法

分子生物學(xué)診斷技術(shù)是近些年發(fā)展起來(lái)的，主要是根據(jù)病毒的特異性進(jìn)行診斷，目前基本所有的流行性傳染病都可以利用分子生物學(xué)診斷技術(shù)進(jìn)行診斷。當(dāng)偽狂犬病毒處于隱性狀態(tài)時(shí)，僅靠臨床診斷方法是無(wú)法準(zhǔn)確判別的，此時(shí)分子生物學(xué)診斷技術(shù)便可以根據(jù)偽狂犬病病毒的敏感性以及特異性進(jìn)行最為細(xì)致的判別，從而可以將病豬及時(shí)的隔離，保障養(yǎng)殖戶(hù)的經(jīng)濟(jì)效益。目前所采用的分子生物學(xué)診斷技術(shù)主要包括核酸探針技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）、基因芯片技術(shù)以及環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，其中核酸探針技術(shù)主要是依靠DNA雜交，從而檢測(cè)病毒的存在；而聚合酶聯(lián)反應(yīng)技術(shù)適合PRV臨床診斷以及流行病學(xué)調(diào)查且檢查速度較快。PCR技術(shù)又包括常規(guī)PCR、鑒別PCR和定量PCR?；蛐酒夹g(shù)是基于PCR技術(shù)的多核酸雜交的原理，從而進(jìn)行基因檢測(cè)，判斷病毒的存在；環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)利用DNA擴(kuò)增技術(shù)可快速檢測(cè)偽狂犬病病毒的存在。

1.4 免疫學(xué)診斷

免疫學(xué)診斷是指采用血清學(xué)反應(yīng)的方法，對(duì)某些疾病進(jìn)行的診斷。主要是利用抗原抗體特異性結(jié)合的性質(zhì)，用已知的抗原測(cè)定患者血清中的未知抗體，來(lái)診斷患者是否患某種傳染病，也可用已知的抗體測(cè)定患者血清中是否含有相應(yīng)的抗原，來(lái)診斷疾病。檢測(cè)豬偽狂犬病病毒的方法有免疫熒光技術(shù)（FA）、反向間接血凝（抑制）試驗(yàn)（RPHA/RPHI）、單抗夾心ELISA、雙抗夾心ELISA；檢測(cè)豬偽狂犬病病毒抗體的方法有血凝和血凝抑制試驗(yàn)（HA-HI）、微量血清中和試驗(yàn)（MSN）、免疫電泳技術(shù)（IE）、瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）、間接ELISA、競(jìng)爭(zhēng)ELISA。中和試驗(yàn)主要是診斷隱性感染，檢測(cè)的特異性比較高、反應(yīng)靈敏，但可操作性低；凝集性試驗(yàn)主要通過(guò)利用抗原的特異性來(lái)檢測(cè)偽狂犬病病毒的存在，其中常用的輔助品為瓊脂、乳膠以及血凝劑來(lái)檢測(cè)抗原的存在；而標(biāo)記抗體技術(shù)主要通過(guò)標(biāo)記抗體，從而觀測(cè)病原體的存在，其中利用熒光進(jìn)行標(biāo)記以及酶的特異性來(lái)觀測(cè)抗體；利用血清診斷技術(shù)的準(zhǔn)確度相對(duì)較高。

2 防治措施

2.1 隔離消毒

豬只發(fā)病后要及時(shí)進(jìn)行隔離和治療，以免傳染造成更大的損失。對(duì)病豬豬舍要及時(shí)進(jìn)行清洗和消毒，每天用1%噴霧靈溶液帶豬消毒；舍外墻壁、道路用4%NaOH溶液噴霧消毒。將工作服、鞋、帽等用消毒液浸泡或高壓滅菌消毒。對(duì)豬的流產(chǎn)胎兒、胎衣、死胎、木乃伊胎和病死豬尸體按《病死動(dòng)物及產(chǎn)品深埋處理技術(shù)規(guī)范》深埋處理，污染物、排泄物也要做無(wú)害化處理。減少外來(lái)人員和車(chē)輛進(jìn)入發(fā)病豬場(chǎng)，禁止場(chǎng)內(nèi)人員串舍，防止人為擴(kuò)散病原。

2.2 緊急免疫

一旦懷孕母豬出現(xiàn)豬偽狂犬病，要進(jìn)行緊急免疫，免疫的對(duì)象是發(fā)病豬場(chǎng)的全場(chǎng)公豬、未發(fā)病母豬、哺乳仔豬、育肥豬。免疫疫苗的種類(lèi)為偽狂犬病基因缺失弱毒活疫苗。疫苗注射的量根據(jù)豬只的種類(lèi)和年齡來(lái)確定：一是成齡公豬、母豬。注射豬偽狂犬病滅活苗，用量為4頭份/頭，采用臀部肌肉注射。加強(qiáng)免疫在配種前和產(chǎn)前26d各用豬偽狂犬病滅活苗4頭份/頭加強(qiáng)免疫。二是小豬和育肥豬。注射豬偽狂犬病弱毒苗，用量為1頭份/頭，采用臀部肌肉注射。三是哺乳仔豬?？梢杂?～5日齡用豬偽狂犬病雙基因缺失苗滴鼻、1頭份/頭。

3 治療

一是對(duì)發(fā)病豬使用干擾素，稀釋后按1ml/頭肌注，同時(shí)按2ml/頭注射抗病毒多肽，按0.12ml/kg·體重注射黃芪多糖注射液，然后再用頭孢噻呋鈉按3mg/kg·體重肌注，1次/d，連用3d。二是對(duì)高燒不退、病情嚴(yán)重的仔豬肌注安乃近、氨芐青霉素，1次/d，連用3～5d。三是防止繼發(fā)感染，在每500kg飼料中加愛(ài)樂(lè)新500g、70%阿莫西林200g、強(qiáng)力霉素150g；每500kg飲水中加70%阿莫西林150g、多維250g、黃芪多糖250g，連用7d。經(jīng)采取以上綜合防治措施7d后，除個(gè)別病重仔豬死亡外，疫情得到有效控制。

[1] 彭金美，安同慶，趙鴻遠(yuǎn)，等.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2013，（1）：1-4.