萬利生

也論牛結(jié)核病流行病學(xué)與診斷技術(shù)研究進(jìn)展

萬利生

（江蘇泗陽縣農(nóng)業(yè)委員會史集獸醫(yī)站，江蘇泗陽 223700）

牛結(jié)核病是一種人畜共患的慢性消耗性傳染病，其傳播流行影響畜牧業(yè)的持續(xù)發(fā)展和人類的健康。闡述了牛結(jié)核病流行病學(xué)和診斷技術(shù)方面的研究進(jìn)展，以期為該病的診治與防控提供依據(jù)。

牛結(jié)核??；流行病學(xué)；診斷技術(shù)；研究進(jìn)展

牛結(jié)核病是主要由牛分枝桿菌和結(jié)核分枝桿菌引起的一種人畜共患的慢性消耗性傳染病，可通過病畜傳播給人類或其他動物。牛結(jié)核病感染宿主譜廣，幾乎可以感染所有的溫血脊椎動物，其傳播流行不但影響到畜牧業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展，更嚴(yán)重影響著人類的身心健康和社會公共安全。

1 牛結(jié)核病流行病學(xué)研究進(jìn)展

20世紀(jì)80年代中期以來，在許多發(fā)達(dá)國家結(jié)核病不僅沒有下降，反而逐漸增加，而在一些貧困國家結(jié)核病已失去控制，特別是中非、南亞，因此1993年世界衛(wèi)生組織（WHO）宣布結(jié)核病處于全球緊急狀態(tài)。對檢出的陽性牛只不能及時處理，檢測手段的有限導(dǎo)致某些染疫牛無法流通限制，未能從根本上消滅傳染源，是造成牛結(jié)核病不斷發(fā)生和流行的主要原因。整體外周環(huán)境不良，如牛舍陰暗潮濕、光線不足、通風(fēng)不良、牛群擁擠、病牛與健康牛同欄飼養(yǎng)以及飼料配比不當(dāng)、飼料中缺乏維生素和礦物質(zhì)等，均可促進(jìn)本病的發(fā)生。由于野生動物獾、野牛、猴子、狐貍等動物結(jié)核病的出現(xiàn)，增加了牛結(jié)核病感染的又一途徑。野生動物通過排泄物將結(jié)核桿菌排出體外，污染了飼草、飼料和飲水等，家畜采食后感染結(jié)核桿菌，進(jìn)而造成牛結(jié)核病的發(fā)生?，F(xiàn)在，多數(shù)國家都不提倡使用疫苗的手段來控制牛結(jié)核病，而采用定期PPD皮試法檢測并屠宰PPD皮試診斷陽性牛的防控策略，許多發(fā)達(dá)國家就是利用該策略有效地控制了牛結(jié)核病。美國是第1個實行根除牛結(jié)核病的國家，自1971年實施消滅牛結(jié)核病的計劃以來，已經(jīng)使牛結(jié)核病發(fā)病率降至0.5%，以后一直呈零星散發(fā)。美國于1998年實現(xiàn)了無結(jié)核病目標(biāo)。歐盟國家于20世紀(jì)50年代簽署了控制牛結(jié)核病的協(xié)定，北歐的丹麥、比利時、挪威、德國和荷蘭等國已基本消滅了牛結(jié)核病，英國和法國處在控制狀態(tài)。

2 牛結(jié)核病診斷技術(shù)研究進(jìn)展

結(jié)核病是一古老而又復(fù)雜的人畜共患病，因為治療難度大，因此早期可靠診斷是防控本病的重要措施。同時，結(jié)核桿菌極難培養(yǎng)，對病原菌的體外培養(yǎng)和鑒定難于有效實施，因此結(jié)核病的診斷技術(shù)定位于免疫學(xué)或血清學(xué)檢測，目前世界上用于牛結(jié)核病的成熟可靠的診斷或檢測技術(shù)僅有提純結(jié)核菌素皮膚接種試驗（包括頸部PPD皮試和尾根皺褶部PPD皮試）和γ干擾素ELISA試驗。 轉(zhuǎn)貼于 233網(wǎng)校論文中

結(jié)核菌素提純蛋白衍生物（PPD）試驗一直應(yīng)用于動物和人結(jié)核病的免疫診斷法，世界動物衛(wèi)生組織（OIE）和我國農(nóng)業(yè)部均將此方法列為牛結(jié)核病檢疫的標(biāo)準(zhǔn)試驗，此法至今仍是國內(nèi)外實際檢疫中最為實用的診斷方法。而其他檢測牛血清抗體的ELISA方法或免疫金標(biāo)方法，因為結(jié)核病引發(fā)的體液免疫的滯后性，無法用于獸醫(yī)臨床試驗。PCR試驗已用于許多動物疫病的快速檢測，但因分枝桿菌間的相互交叉干擾，或者待檢樣品中細(xì)菌過低過雜，易于造成假陽性和假陰性，因而檢測結(jié)核病的PCR診斷試驗大都停留在實驗室制備和應(yīng)用階段，在牛結(jié)核病的實際診斷中少有報道。澳大利亞已研制出牛結(jié)核病的γ干擾素ELISA試驗，應(yīng)用結(jié)果表明，本方法比傳統(tǒng)的結(jié)核菌素法診斷牛結(jié)核病更敏感，并可有效解決假陽性的問題，γ干擾素ELISA試驗將是牛結(jié)核病診斷的一個主要發(fā)展趨勢。

牛γ干擾素測定法的廣泛性田間試驗已在世界上許多國家完成，并在澳大利亞和新西蘭被認(rèn)可為正式試驗，美國和其他歐美國家也正在進(jìn)行本方法的區(qū)域試驗和驗證，以探討徹底替代PPD皮試法的可能性。目前已有20多萬頭經(jīng)過測試，本法敏感性為77.0%～93.6%，而相比較的結(jié)核菌素試驗敏感性為65.6～84.4%。西班牙學(xué)者選擇了85個牛群1136頭牛進(jìn)行了牛頸部PPD比較皮試（SICCT）和γ干擾素ELISA試驗比對，并且用細(xì)菌培養(yǎng)和PCR予以確認(rèn)，結(jié)果γ干擾素ELISA檢測法的敏感性為84.9%，SICCT的敏感性為80.2%，將2種方法結(jié)合起來的敏感性為92.9%。中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心也開展了頸部PPD皮試和γ干擾素ELISA比較，證實二者間陽性符合率較高，達(dá)90.6%。

牛頸部PPD比較皮試（SICCT）操作要點：一是部位。牛頸部同一側(cè)，中上部1/3處區(qū)域。二是注射器。針尖不能太寬太長，直徑0.45 mm、長度3～4 mm為宜。三是劑量。牛和禽PPD劑量不低于2 000 IU/0.1 mL，一般為2 000～3 250 IU，如采取TB根除計劃則提高為5 000 IU，接種量基本為0.1 mL，不高于0.2 mL。四是間隔距離。牛和禽PPD注射部位間距15～20 cm。五是結(jié)果判定。72 h后判定，如皮厚差4 mm以上，有紅腫熱痛等炎性反應(yīng)則判定為陽性；2.1～3.9 mm的判為可疑；2 mm以下的為陰性。凡判定為疑似反應(yīng)的牛只，于第1次檢疫60 d后進(jìn)行復(fù)檢，其結(jié)果仍為疑似反應(yīng)時，經(jīng)60 d再復(fù)檢，如仍為疑似反應(yīng)，應(yīng)判為陽性。牛尾根皺褶部PPD皮試（CFT）操作要點：一是部位。牛尾根皺褶部。二是劑量。因敏感性低于頸部皮試，因此接種劑量應(yīng)適當(dāng)提高，可以提高至頸部皮試量的1倍左右。三是結(jié)果判定。72 h后判定，如皮厚差4 mm以上，出現(xiàn)可摸到或可見的腫塊時則判定為陽性。如呈現(xiàn)陽性則10 d后以頸部PPD皮試進(jìn)行確認(rèn)。

［1］ 胡來根.牛結(jié)核病的診斷與防制［J］.畜牧與飼料科學(xué)，2012，（4）：110-111.

［2］ 馬秀玲.奶牛結(jié)核病的發(fā)病特點及防控對策［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009，（24）：172.

萬利生（1970-），女，江蘇泗陽人，主要從事畜牧生產(chǎn)與疫病防治技術(shù)推廣研究工作。