趙笙鈞湯仕恩

(1.圣水鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西圣水 723100；2.黎坪鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西黎坪 723100)

動物防疫樣品采集與運送注意事項

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(1.圣水鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西圣水 723100；2.黎坪鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西黎坪 723100)

本文通過在實踐中對采樣的原則和運送樣品做一闡述，以利今后在重大動物疫病防控工作中發(fā)揮采樣、監(jiān)測、預(yù)警方面的作用，為重大動物疫病防控工作奠定基礎(chǔ)。

采樣原則；運送要求

近年來，隨著重大動物疫病防控工作措施逐步加強，防控的手段越來越多，動物病原學(xué)監(jiān)測和免疫抗體監(jiān)測成為常態(tài)，采樣和運送樣品過程中如果措施不到位，不僅影響結(jié)果判定，而且可能造成前功盡棄，不利于及早揭示動物疫病發(fā)生和免疫效果評價。下面就動物防疫采樣及樣品運送應(yīng)注意的事項做一簡單介紹。

1 動物防疫采樣

1.1 采樣原則

采集檢驗樣品是診斷檢測工作的重要內(nèi)容。采樣的時機是否適宜，樣品是否具有代表性，樣品處理、保存、運送是否合適及時，與檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性關(guān)系極大。采集檢驗樣品時，需要符合以下規(guī)定。

1.1.1 適時采樣

根據(jù)檢測要求及檢測對象和檢測項目的不同，選擇適當(dāng)?shù)牟蓸訒r機十分重要。樣品是有時間要求的，應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定時間采樣；有臨床癥狀需要作病原分離的，樣品必須在病初的發(fā)熱期或癥狀典型時采樣，病死的動物，應(yīng)立即采樣。

1.1.2 合理采樣

根據(jù)診斷檢測要求，須嚴(yán)格按照規(guī)定采集各種足夠數(shù)量的樣品外，不同疫病的需檢樣品各異，應(yīng)按可能的疫病側(cè)重采樣。對未能確定為何種疫病的，應(yīng)全面采樣。

1.1.3 典型采樣

選取未經(jīng)藥物治療、癥狀最典型或病變最明顯的樣品，如有并發(fā)癥，還應(yīng)兼顧采樣。

1.1.4 無菌采樣

采集檢驗樣品初供病理組織學(xué)檢驗外，供病原學(xué)及血清學(xué)檢驗的樣品，必須無菌操作采樣，采樣用具、容器均須滅菌處理，尸體剖檢需采集樣品的，先采樣后檢查，以免人為污染樣品。

1.1.5 適量采樣

采集樣品的數(shù)量要滿足診斷檢測的需要，并留有余地，以備必要的復(fù)檢使用。

1.2 采血方法及采血量

從翅靜脈（禽）采血2～3ml，或耳靜脈（前腔靜脈、頸靜脈）（豬、牛、羊）采血5l，置室溫放置約10in（以血液完全凝固為準(zhǔn)），再置冰箱冷藏（4℃）30min，此時，能清楚看到血清與血凝塊分離，然后分離血清，保存于1.5～2ml離心管中，冷凍保存待檢。

1.2.1 編號要求

所有送檢樣品統(tǒng)一用阿拉伯?dāng)?shù)字1、2、3、-------編號（養(yǎng)殖場請保存好原禽號與送檢編號對照表），用油性記號筆寫在離心管上（或?qū)⒕幪枌懺谀z布上，貼在管壁）。書寫要工整清晰。

1.2.2 填寫采樣單

所有送檢樣品要求附帶采樣場場名、免疫情況（免疫程序、免疫疫苗種類、生產(chǎn)廠、免疫劑量等）、采樣對象等詳細說明材料。

1.3 組織樣品

如果養(yǎng)殖場出現(xiàn)疫病，在采集血清樣品的同時，建議應(yīng)同時采集發(fā)病動物的組織樣品，填寫采樣單后，一并送檢。

1.3.1 采樣組織

應(yīng)只要采集實質(zhì)臟器組織，包括肝臟、脾臟、腎臟、肺臟、腦（禽）、喉頭、心臟、淋巴結(jié)等。每種樣品不得少于組織器官的1/3。

1.3.2 采樣部位

應(yīng)采集病變與正常組織交界處的組織，以便于診斷觀察。

1.3.3 采樣大小

采集的組織樣品不宜過大，一般采集3×3cm大小的組織用于病原分離與鑒定，同時在采集一份1.5×1.5cm大小的同一組織置于10%福爾馬林溶液中（1份福爾馬林溶液加9份蒸餾水）用作病理學(xué)診斷。同一動物的組織應(yīng)保存于一個容器中。

2 樣品的處理及運送

2.1 樣品處理

采集的樣品應(yīng)一種樣品一個容器，立即密封，根據(jù)樣品的形狀及檢驗要求不同，做暫時的冷藏、冷凍或其他處理。供病毒學(xué)檢驗的樣品，數(shù)小時內(nèi)可送到實驗室，只作冷藏處理。超過數(shù)小時的應(yīng)凍結(jié)處理。（凍結(jié)方法：可將樣品放入-30度冰箱內(nèi)凍結(jié)，然后再裝入小冰塊或干冰冷藏瓶（箱）內(nèi)運送，亦可將裝入樣品的容器放入隔熱保溫瓶內(nèi)，再放入冰塊，然后按100g冰塊加入食鹽約35g，立即將隔熱瓶瓶口塞緊。瓶內(nèi)溫度可達-21℃左右）。供細菌學(xué)檢驗或血清學(xué)檢驗的樣品，冷藏送實驗室即可。裝樣品的容器應(yīng)貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽要防止因凍結(jié)而脫落，標(biāo)簽標(biāo)明采集時間、地點、號碼和樣品名稱并附上發(fā)病、死亡等相關(guān)資料，盡快送實驗室。

2.2 樣品包裝

裝載樣品的容器可選擇玻璃的或塑料的，可以是瓶式、試管式或袋式。容器必須完整無損，密封不漏出液體。裝供病原學(xué)檢驗樣品的容器，用前徹底清潔干凈，必要時經(jīng)清潔液浸泡，沖洗干凈后以干熱和高壓滅菌并烘干。如選用塑料容器，能耐高壓的經(jīng)高壓滅菌，不能耐高壓的經(jīng)環(huán)氧乙烷熏蒸消毒或紫外線距離20cm直射2h后使用。根據(jù)檢驗樣品形狀及檢驗?zāi)康倪x擇不同的容器，一個容器裝量不可過多，尤其液態(tài)樣品不可超過容量的80%，以防凍結(jié)時容器破裂。裝入樣品后必須加蓋，然后用膠布或封箱膠帶固封。如是液態(tài)樣品，在膠布或封箱膠帶外還需用熔化的石蠟加封，以防液體外泄。如果選用塑料袋，則應(yīng)用兩層袋，分別用線結(jié)扎袋口，防止液體漏出或入水污染樣品。

2.3 樣品運輸

每個養(yǎng)殖場的樣品必須單獨密封于兩層自封口塑料袋中，粘貼單位名稱標(biāo)簽，外包一層脫脂棉后，連同采樣單一并放入稍大一些的自封口塑料袋，置于冰盒或裝有冰袋的泡沫箱。如不能及

時送檢，應(yīng)將血清凍存于冰箱中。用作病原分離鑒定的樣品應(yīng)密封于密閉容器中，冷藏保存立即送至實驗室進行檢驗。用作病理學(xué)診斷的樣品可在48h內(nèi)送至實驗室。樣品經(jīng)包裝密封后，必須盡快送往實驗室，延誤送檢時間，常會嚴(yán)重影響診斷結(jié)果。因此，在送樣品過程中，要根據(jù)樣品的保存要求和檢驗?zāi)康?，妥善安排運送計劃。供細菌檢驗、寄生蟲檢驗及血清學(xué)檢驗的冷藏樣品，必須在24h內(nèi)送到實驗室；供病毒檢驗的冷藏處理樣品，須在數(shù)小時內(nèi)送達實驗室，經(jīng)凍結(jié)的樣品需在24h內(nèi)送到，24h內(nèi)不能送到實驗室的，需要在運送過程中保持樣品溫度處于-20℃以下。送檢樣品過程中，為防止樣品容器破損，樣品裝入冷藏瓶（箱）后應(yīng)妥善包裝，防止碰撞，保持盡可能的平穩(wěn)運輸。

[1] 邢清潔.基層動物防疫工作中血樣采集注意事項[J].中國獸醫(yī)雜志，2012，48（3）：86-87.

趙笙鈞（1972—），男，大專學(xué)歷，助理獸醫(yī)師，主要從事動物防疫、檢疫工作。