雍香宇

(蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心,江蘇蘇州 215021)

研究籠養(yǎng)下BMI對食蟹猴遺傳性的影響

雍香宇

(蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心,江蘇蘇州 215021)

運(yùn)用調(diào)查法及數(shù)理統(tǒng)計(jì)法等研究方法對54只公猴進(jìn)行身高體重的測量,進(jìn)行特征分析,計(jì)算出BMI指數(shù)。利用基因提取的方法,測得多態(tài)性信息含量PIC。研究結(jié)果表明不同BMI指數(shù)的公猴在籠養(yǎng)的條件下對遺傳特性產(chǎn)生一定的影響。總之本文研究摸索出了一條野生猴實(shí)驗(yàn)動物化的研究路線以及技術(shù)方案。對公猴的生理特性及后代的基因都有一定程度的影響,為以后管理方面提供了一定經(jīng)驗(yàn)。

BMI;公猴;生理特性

1 前言

實(shí)驗(yàn)動物（Laboratory animals）中的動物選取可以來自野生動物，經(jīng)濟(jì)動物以及用來觀賞的動物，它們這些在人類的生命發(fā)展歷程當(dāng)中承擔(dān)著無比巨大的作用，在我們?nèi)祟惖陌l(fā)展歷程中許許多多的發(fā)現(xiàn)都是靠這些實(shí)驗(yàn)取得的，取得每一項(xiàng)巨大成果的背后，都有它們的努力。為提供高質(zhì)量、足夠數(shù)量和種類的實(shí)驗(yàn)動物來滿足生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)的發(fā)展，并且減少野生動物的捕獲，野生動物實(shí)驗(yàn)動物化成了必要現(xiàn)在被廣泛使用的實(shí)驗(yàn)動物

2 調(diào)查對象

隨即抽取檢疫房食蟹猴54只，進(jìn)行編號，選取全是公猴，在工作人員的協(xié)助下，對選取的公猴進(jìn)行坐高，體重測量，根據(jù)計(jì)算公式計(jì)算出BMI 指數(shù)，并隨即選取不同BMI值得公猴進(jìn)行多態(tài)信息含量測量。多測出幾組數(shù)據(jù)，進(jìn)行研究。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用EXCEL統(tǒng)計(jì)軟件，利用BMI 計(jì)算公式計(jì)算出結(jié)果，結(jié)果 BMI＞=40的公猴數(shù)量為30只，BMI＜=40的公猴數(shù)量為28只，從中隨即選取不同BMI值的公猴，進(jìn)行EDTA的抗凝管中收集約1ml的血液，然后進(jìn)行基因提取。

3 野生群的遺傳特性

基因組微衛(wèi)星，又稱為簡單序列重復(fù)（SSR）或短串聯(lián)重復(fù)（STR）。一般是以1-6個(gè)堿基為核心序列，首尾相連組成的串聯(lián)重復(fù)序列。本研究利用微衛(wèi)星標(biāo)記對“ 安徽實(shí)驗(yàn)稱猴進(jìn)行遺傳學(xué)研宄，包括遺傳多樣性分析、遺傳背景分析和遺傳監(jiān)測微衛(wèi)星位點(diǎn)的蹄選方法。

微衛(wèi)星位點(diǎn)的初步蹄選引物對基因組進(jìn)行PCR擴(kuò)增：模板DNA、正反向引物、lOxEasyTaq Buffer、2.5mMdNTPS、EasyTaqDNA Polymerase加經(jīng)高溫滅菌的去離子水共25ul，于94°C預(yù)變性5min，94°C變性30s，50-60°C復(fù)性30s，72'C延伸 Imin，30個(gè)循環(huán)后72°C延伸7min，最后降至4°C保溫。使用PCR儀（美國Bio-Rad伯樂S1000）設(shè)退火溫度梯度和DNA模板濃度梯度進(jìn)行擴(kuò)增，摸索各對引物的適宜退火溫度和模板DNA最佳用量。PCR產(chǎn)物經(jīng)加入核酸染料的1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測，在凝膠成像系統(tǒng)中觀察擴(kuò)增效果，并拍照記錄。判斷各對引物是否能從安徽獼猴血液DNA擴(kuò)增特異性片段，選擇擴(kuò)增效果好的電泳成像。

從研究對象中隨即選取38只公猴，在EDTA的抗凝管中收集約1ml的血液，然后進(jìn)行基因提取，我們從中選取10個(gè)位點(diǎn)，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10分析結(jié)果如下。

多態(tài)性信息含量LOUSNKHPIC 13742.7120.920.88 2384550.4680.45 33836100.1230.2 43644130.5640.62 5384590.5340.56 63649.5120.7640.76 73748.69100.6320.66 83547.8150.8430.87 9374550.7950.80 10383760.3650.40位點(diǎn)樣本數(shù)BMI等位基因數(shù)群體綜合度

根據(jù)以上結(jié)果我們可以看出食蟹猴的平均等位基因數(shù)為10.5，平均綜合度為0.632，平均多態(tài)性含量為0.653.通過以上方法測得的多態(tài)性信息含量基本上都是大于0.5的，就此我們可以知道，以上這些位點(diǎn)都是多態(tài)性高度較高。我們用微衛(wèi)星位點(diǎn)檢測到在國外一些國家的一些食蟹猴的群體雜合度的值大約為0.68和0.65，測得的我國海南地區(qū)的猴群群體雜合度平均值在0.75和0.695，它們比該地區(qū)的食蟹猴的群體雜合度較為高一點(diǎn)，所以我們該地區(qū)的食蟹猴的遺傳多樣性相對與其他地方來說稍微高一些，比較適合馴養(yǎng)成為基因一直性質(zhì)比較好的，具有豐富的封閉群，這樣有助于避免系數(shù)上升過快。這樣的話，對我們以后的多樣性遺傳保持非常有利。

目前應(yīng)用封閉群實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行試驗(yàn)的結(jié)果重復(fù)性較差，主要因?yàn)檫z傳性狀穩(wěn)定性較差，我們必須對影響其遺傳質(zhì)量的因素進(jìn)行控制。

4 結(jié)論

對籠養(yǎng)食蟹猴進(jìn)行遺傳學(xué)研究的目的是對其進(jìn)行遺傳學(xué)控制，隨著封閉年限的增長稱食蟹猴體遺傳多樣性會降低盡管每年引進(jìn)新種，由于種源來自于同一地區(qū)，以這些種有可能和原有種是一個(gè)家系，所以近親交配不可避免，為配種過程中的基因丟失在宣配置時(shí)，對外形特征的偏好會導(dǎo)致種群基因庫中基因的丟失按- Hardy-Weinberg定律，非隨機(jī)配種和不完全配種使種群的遺傳基礎(chǔ)發(fā)生變化，是人工養(yǎng)殖的種群種性退化的重要原因，猴供應(yīng)時(shí)導(dǎo)致的遺傳多樣性丟失由于遺傳背景信息不清晰，供種時(shí)非?；靵y，極易將一個(gè)家系的后代全部供出。本文通過對野生食蟹猴和子一代普通級種群的遺傳結(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示，BMI低于一定的值時(shí)，雜合度和多態(tài)性信息含量均有所降低，說明籠養(yǎng)狀態(tài)下BMI值得不同在一定程度上影響了食蟹猴的遺傳多樣性。

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