糧油食品中黃曲霉素檢測方法及比較

黃桂軍 廣西壯族自治區(qū)糧油質(zhì)量檢驗(yàn)站

黃曲霉素具有較強(qiáng)的致癌性，是一種劇毒的真菌霉素，在食品中廣泛存在，對人們的身體健康造成嚴(yán)重傷害，因此，需對其進(jìn)行高效、便捷的檢測并進(jìn)行分離，將其控制在允許的范圍內(nèi)。在國際上進(jìn)行食品檢測過程中，農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉素的含量的檢測是必須進(jìn)行檢測的指標(biāo)。因此，要不斷提升食品以及農(nóng)副產(chǎn)品中對黃曲霉素的檢測工作。本文在大量查閱有關(guān)資料的基礎(chǔ)上，簡要分析黃曲霉素對人們身體造成的傷害和常用的黃曲霉素檢測方法。

黃曲霉素造成的危害分析

黃曲霉素被認(rèn)為是致癌性最強(qiáng)的化學(xué)致癌物之一，在臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，黃曲霉素會導(dǎo)致禽類、靈長類和魚類等試驗(yàn)動物出現(xiàn)誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性肝癌，主要的疾病表現(xiàn)為出現(xiàn)壞死、肝硬化、肝出血等病變。黃曲霉素對于生物體造成的危害同黃曲霉素直接阻止蛋白質(zhì)的合成直接相關(guān)，黃曲霉素中的雙呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)是對人體造成危害最為重要的結(jié)構(gòu)。胰蛋白酶、彈性蛋白酶和凝血酶等均屬于絲氨酸蛋白酶，可對部分細(xì)胞活動產(chǎn)生直接或間接的調(diào)控作用。如血栓或癌癥形成時會出現(xiàn)一定的病理變化，主要是由這些酶及其潛在的調(diào)節(jié)分子間的微妙平衡變化導(dǎo)致的。實(shí)際上，通過外界分子導(dǎo)致這些酶造成錯誤的調(diào)控也是導(dǎo)致出現(xiàn)病變的主要原因。黃曲霉素不僅僅會對肝臟造成危害，同時也會對人體其他系統(tǒng)造成危害，黃曲霉素如果暴露的話，可能會導(dǎo)致家禽胃腸道的前段出現(xiàn)炎癥病變。一些生物體在攝入一定的黃曲霉素后，易導(dǎo)致機(jī)體造血功能和血液的成分出現(xiàn)一定的變化。暴露的黃曲霉素還會導(dǎo)致有機(jī)體的免疫功能造成損害，進(jìn)而降低細(xì)胞和體液的免疫力。同時，黃曲霉素產(chǎn)生的毒性還會通過母體遺傳到子體中，進(jìn)而對子體在胚胎期的免疫系統(tǒng)發(fā)育造成危害，導(dǎo)致子體的免疫功能受到危害。

黃曲霉素檢測方法分析

酶聯(lián)免疫法

該方法又被稱之為酶聯(lián)免疫吸附法，主要是把可溶性的抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固相載體上，同時進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性及定量方法。根據(jù)酶、免疫和升生化記數(shù)，將其應(yīng)用到黃曲霉素檢測分析，使用固相酶聯(lián)免疫吸附的相關(guān)原理，利用AFTB1抗原促使兩者同抗體之間可以進(jìn)行免疫競爭反應(yīng)，之后加上酶底物進(jìn)行顯色，顏色的深淺程度取決于酶標(biāo)和抗體抗原結(jié)合的量，樣品中AFTB1則多被抗體結(jié)合的酶標(biāo)AFTB1抗原較少，其表現(xiàn)為顏色總體較淺，如果較多，其顏色也會逐漸加深。

酶聯(lián)免疫法的優(yōu)點(diǎn)在于試驗(yàn)毒性較小，可在較短時間內(nèi)獲得檢測結(jié)果，其缺點(diǎn)在于試劑壽命較短，且重復(fù)率較低，要求使用低溫保存的形式，其假陽性的概率較高，因此，應(yīng)配備專用的酶標(biāo)儀，在基層檢測過程中存在有著較大難度，對于樣品的要求較嚴(yán)格。一般都會對需要的樣品，如脂肪含量和含鹽量較高的樣品等進(jìn)行較為合適的處理，這種方法一般應(yīng)用于初篩，對于其陽性結(jié)果需要進(jìn)行檢測，及時去除陰性結(jié)果。

液相色譜法

該方法將液體作為流動相，通過使用高壓系統(tǒng)進(jìn)行輸液，把有著不同極性單一或混合溶劑等流動相泵入裝入固定相的色譜柱，在柱中其成分逐漸被分離，進(jìn)入到檢測器進(jìn)行下一步的檢測，實(shí)現(xiàn)對試樣的分析工作。使用該方法的優(yōu)勢在于檢測下限較低、具有較快的檢測速度、定性準(zhǔn)確。檢測應(yīng)在20 min內(nèi)完成所有實(shí)驗(yàn)，才可較為準(zhǔn)確地將黃曲霉素分離出來，其檢測限一般會達(dá)到0.5 μg/kg，國家對于糧油食品的濃度要求較低。其存在的缺點(diǎn)主要有配套儀器價(jià)格較高，對于樣品的要求也較高。

熒光光度法

使用該方進(jìn)行檢測的主要過程中為試樣先經(jīng)過甲醇提取，提取后經(jīng)過濾、稀釋，濾液通過包含黃曲霉素的特殊抗體免疫親和柱進(jìn)行凈化，黃曲霉素鍵合在免疫親和小柱的抗體上，使用蒸餾水及時去除柱上的雜質(zhì)，將甲醇作為目標(biāo)化合物脫洗下來，加顯色劑，在熒光光度計(jì)中測定樣品中黃曲霉素的實(shí)際含量。該方法的主要優(yōu)勢在于健康、綠色，對檢測人員無大的危害，同時樣品檢測速度較快，具有較高的靈敏性，較為適合在一些大量樣品檢測中，同時定量準(zhǔn)確，其缺點(diǎn)在于檢測費(fèi)用較高，應(yīng)配備較高的專門設(shè)備，目前無法實(shí)現(xiàn)對單一的毒素檢測。

結(jié)語

隨著時代的發(fā)展，會有全新的檢測方法出現(xiàn)，與此同時也可進(jìn)行脫毒處理，這不僅可滿足分析測試的相關(guān)要求，也可降低浪費(fèi)，有著良好的社會和經(jīng)濟(jì)效益。