○唐建玲

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羅非魚鏈球菌病的診治技術(shù)

○唐建玲

近年來，鏈球菌病已成為羅非魚養(yǎng)殖的主要病害，給羅非魚養(yǎng)殖業(yè)造成極大的危害，甚至威脅到羅非魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展。為此，筆者結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐，就羅非魚鏈球菌病的診斷及防治技術(shù)進(jìn)行探討，供廣大羅非魚養(yǎng)殖者參考。

一、流行病學(xué)

羅非魚鏈球菌病主要流行于春、夏和秋季，水溫25～37℃時(shí)較為流行，在32℃以上時(shí)尤為多發(fā)，發(fā)病率達(dá)20%～30%，發(fā)病魚的死亡率可高達(dá)60%～100%。水溫降至20℃以下時(shí)則發(fā)病較少；在高水溫季節(jié)時(shí)，病魚的死亡高峰期可持續(xù)2～3周；在低水溫季節(jié)，病魚呈慢性發(fā)病，死亡率降低，但持續(xù)時(shí)間長。疾病流行高峰為5月～9月，主要危害100g以上的稚魚到1kg左右的成魚。傳染性強(qiáng)，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。無乳鏈球菌病主要以水平方式傳播，體表有損傷或受環(huán)境應(yīng)激過大的魚易感染發(fā)病。

二、典型癥狀

體色發(fā)黑，吻端發(fā)紅，體表黏液增多，失去食欲，靜止于水底，或離群獨(dú)自漫游于水面，有時(shí)作旋轉(zhuǎn)游泳后再沉入水底。最明顯的癥狀是病魚眼球突出，其周圍充血，鰓蓋內(nèi)側(cè)發(fā)紅、充血或強(qiáng)烈出血。在夏季高溫時(shí)期癥狀發(fā)展迅速。在水溫較低時(shí)，除出現(xiàn)以上主要癥狀外，各鰭均發(fā)紅、充血或潰爛，體表局部特別是尾柄往往潰爛或有帶膿血的疥瘡。

解剖病魚，幽門垂、肝臟、脾臟、腎臟或腸管均有點(diǎn)狀出血。肝臟因出血和脂肪變形而褪色甚至組織破損。腎臟腎小球及褐色素巨噬細(xì)胞中心以及腎小管間質(zhì)組織侵染細(xì)菌并大量繁殖引起腎臟腫大、壞死。中腸道上皮的固有層破損，引起腸炎，腸絨毛的基部在革蘭氏染色時(shí)可看到聚集的菌落。病原菌如侵入腦組織，可引起血細(xì)胞浸潤，出血。

三、病理變化

羅非魚患鏈球菌病后，主要影響腦組織，組織切片顯示腦組織的蛛網(wǎng)膜下出血和薄壁單核細(xì)胞浸潤。鏈狀的球菌見于蛛網(wǎng)膜間，并且位于腦組織的膿腫中。巨大細(xì)胞的直徑為100μm，散布的細(xì)胞嗜酸性顆粒呈線狀排列，平行于出血區(qū)域。羅非魚的主要病癥是出血和形成膿腫的腦膜炎癥。

四、診斷方法

對于羅非魚無乳鏈球菌病的確診可以結(jié)合臨床癥狀、病原檢測和分子快診技術(shù)：首先，觀察發(fā)病魚是否具有如嗜睡打轉(zhuǎn)、眼球突出或渾濁發(fā)白、腦膜炎、內(nèi)臟器官及體表出血等典型病理變化；其次，采集發(fā)病魚的組織，制備組織觸片進(jìn)行吉姆薩染色，借助光學(xué)顯微鏡油鏡觀察是否存在成雙或成鏈狀的球性細(xì)菌；然后，在無菌條件下，從發(fā)病魚的組織中是否分離到致病性鏈球菌，有條件的可采用生化方法、免疫學(xué)方法或分子生物學(xué)方法對分離細(xì)菌進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定來確診。

目前鏈球菌的商用鑒定系統(tǒng)有RAPIDStrepStrip，Vitecksystem，API20STREP和ATBExpression，這些商用鑒定系統(tǒng)使用方便，準(zhǔn)確可靠。本實(shí)驗(yàn)室以無乳鏈球菌的具有高度保守性的莢膜多糖基因和CAMP因子基因?yàn)闄z測序列，成功建立了快速檢測羅非魚無乳鏈球菌的PCR方法，這個方法具有簡便、快速、靈敏、準(zhǔn)確和特異性等優(yōu)點(diǎn)。

五、病因分析

1.目檢鰓的顏色和病癥，判斷水質(zhì)狀況。鰓顏色鮮紅、鰓絲分布均勻無異常，表明水質(zhì)正常；而鰓顏色灰白或暗黑、鰓上有病灶或異物、鰓絲末端腐爛、鰓絲變形，表明水質(zhì)有問題，應(yīng)進(jìn)行水質(zhì)檢測。

2.剖檢觀察肝、脾、腎的病變程度，判斷飼料的質(zhì)量水平。如果肝臟有花肝、水腫、壞死（紅、白點(diǎn)）、質(zhì)地變脆等現(xiàn)象，脾、腎有腫大、顏色異常等現(xiàn)象，表明飼料質(zhì)量或投喂技術(shù)有問題，可通過“看、聞、嘗”來初步判斷飼料的好壞：看——就是把飼料充分溶化后，看其粉碎細(xì)度及其紫色（多為菜子餅）與黑色（多為棉籽餅）成分的多少，以粉碎細(xì)度越細(xì)、紫色和黑色成分越少的飼料為好；聞——就是抓把飼料靠近鼻子聞，以聞到魚粉清香（新鮮魚肉曬干的香味）為好，若聞到植物油腳的味道則是飼料中的脂肪已經(jīng)變性，對魚類有毒；嘗——取少量飼料放到嘴里慢慢嚼爛、品嘗，吐出后嘴巴有發(fā)麻或辛辣現(xiàn)象，表明飼料中添加有對魚類有毒的原料。

六、防治措施

1.堅(jiān)持預(yù)防用藥原則。平時(shí)預(yù)防時(shí)的用藥原則：能不用藥則不用，必須用則少用；盡量使用中草藥而不是用化學(xué)藥物，一旦使用化學(xué)藥物，必須使用制劑，不使用原藥，嚴(yán)格遵守休藥期。

2.鏈球菌疫苗免疫。免疫接種是一種相對健康安全的疾病預(yù)防措施，雖然魚類的特異性免疫機(jī)制還很不完善，但國內(nèi)外研究已證實(shí)魚類免疫疫苗對魚體能夠產(chǎn)生免疫保護(hù)力。目前在羅非魚上研究最多的是鏈球菌疫苗，其中廣西水產(chǎn)研究所的口服和注射疫苗已在推廣試驗(yàn),推廣比較好的是口服疫苗。一般來說，魚類疫苗最好效果的免疫方式是注射免疫，其次是浸泡免疫，最差是口服疫苗，浸泡疫苗一般只有注射疫苗的1/5～1/10的效果，而口服疫苗只有浸泡疫苗的1/5～1/10。

3.改善和優(yōu)化水環(huán)境。水環(huán)境是魚類賴以生存的必要條件，水質(zhì)的好壞直接決定著羅非魚能否健康、快速生長。盲目擴(kuò)大魚類的養(yǎng)殖密度、強(qiáng)化投餌量都會加重水體的負(fù)擔(dān)，破壞原有的生態(tài)平衡。換水條件好的地方可適當(dāng)換掉部分池塘底層水；藻類生長不佳，pH值低于7.5，混濁的水體，先使用凈水類產(chǎn)品凈水，3小時(shí)后使用有機(jī)酸或腐植酸鈉解毒；若水體不混濁，藻類生長良好，直接使用有機(jī)酸或腐植酸鈉解毒即可；第二天天氣晴好時(shí)，用“肥爽+先得純芽胞桿菌”或“調(diào)水王2號+肥水靈”肥水調(diào)水；兩天后藻類生長良好，水色發(fā)亮?xí)r，再用二氧化氯或苯扎溴銨溶液消毒水體。

4.減少投喂或禁食。當(dāng)鏈球菌病暴發(fā)時(shí)，減少投料或不投料，可以降低病魚的死亡率，待魚群穩(wěn)定，基本不死亡才逐漸恢復(fù)投料。

5.降低水溫。高水溫是造成魚群應(yīng)激和細(xì)菌繁殖的條件。所以，在可能的情況下降低水溫有助于控制鏈球菌病的發(fā)生。小的魚池可以在上面建遮陽棚，或者在夜間開攪水機(jī)，以適當(dāng)降低水溫。

6.中草藥治療。Pongsak和Parichat研究了大蒜、穿心蓮、對葉豆、山竺、番石榴和鵲腎樹六種草藥對尼羅羅非魚無乳鏈球菌感染的抗菌作用，發(fā)現(xiàn)這六種草藥對無乳鏈球菌均有不同程度的抗菌作用。

7.抗菌素治療?；瘜W(xué)藥物治療疾病是最直接和簡便的措施手段，但長期使用或使用不當(dāng)就難免使病原體產(chǎn)生耐藥性導(dǎo)致防治失敗，不僅破壞了養(yǎng)殖微生態(tài)環(huán)境，而且存在的藥物殘留也會危及人類健康。采用抗菌素治療羅非魚鏈球菌病一定要做到早期用藥，一旦發(fā)現(xiàn)魚群發(fā)病，及早用藥，越早用藥效果越好。此外，藥物要經(jīng)過飼料喂服進(jìn)入魚體內(nèi)方能有效，對已經(jīng)發(fā)病而不吃飼料的病魚，投喂藥物是沒有效果的。再者，藥物的質(zhì)量和細(xì)菌對藥物的抗藥性是決定藥物效果的關(guān)鍵因素，有些水產(chǎn)用藥物的有效成分含量極低，當(dāng)然沒有多少效果；即便藥物的量足質(zhì)佳，但發(fā)病魚體中的鏈球菌抗藥性很強(qiáng)，藥物也不會有效。所以，對于有條件的養(yǎng)殖場，可以通過了解并掌握養(yǎng)殖場內(nèi)病原菌耐藥狀況的變化，來篩選有效的疾病預(yù)防和治療用藥物。

8.可調(diào)整飼料配方。通過對飼料配方調(diào)整，可減輕鏈球菌病的嚴(yán)重程度。如羅非魚飼料油脂水平不要超過6%；高溫季節(jié)要適當(dāng)增加飼料中維生素的使用量，可以在原有基礎(chǔ)上增加20%-30%的使用量，其中維生素C可以添加0.3kg/t飼料。

七、注意事項(xiàng)

1.要根除病因。病情發(fā)生后，首先停止喂料2天，并根據(jù)分析的病因，及時(shí)采取措施根除病因。是飼料中有對魚類有毒物質(zhì)引起的，及時(shí)更換飼料。是水質(zhì)惡化引起的，應(yīng)根據(jù)水質(zhì)監(jiān)測結(jié)果采取相應(yīng)措施：水質(zhì)偏酸，潑灑生石灰水；氨氮超標(biāo)的，用腐植酸鈉改水，并延長開機(jī)增氧時(shí)間。

2.要徹底消毒水體。第一天到第三天，用生石灰或二氧化氯消毒水體，每天一次，切斷病原菌傳播。

3.要注意內(nèi)服敏感藥物。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室藥敏試驗(yàn)結(jié)果篩選敏感藥物（鏈球菌對青霉素、先鋒必敏感程度較高）和黃芪多糖（還可添加一種保肝護(hù)肝中藥），每天一次，連喂15天，內(nèi)服藥物期間，每天只喂料一次，日投喂量為正常日投喂量的60%。養(yǎng)有豬或鴨的水體，其鏈球菌對青霉素、先鋒必的敏感程度大大降低，療效不顯著，只能通過內(nèi)服黃芪多糖來提高抗病力達(dá)到治療效果。

4.要確保療效。確診為鏈球菌病的，因鏈球菌已經(jīng)侵入魚的腦部，內(nèi)服的藥物要?dú)缒X部的病菌比較難、也比較慢，所以用藥時(shí)間相對比較長，建議內(nèi)服15天；同時(shí)治愈后每15～20天再內(nèi)服3～5天，確保不復(fù)發(fā)。

（通聯(lián)：537500，廣西容縣容州鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站）