李旭

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院，福建泉州 362000)

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肺癌患者eIF3a基因多態(tài)性與鉑類藥物化療敏感性及耐藥性的關(guān)系

李旭

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院，福建泉州 362000)

摘要：目的探討肺癌eIF3a基因多態(tài)性與鉑類藥物化療敏感性及耐藥性的關(guān)系。方法選擇確診肺癌患者136例，其中行依托泊苷聯(lián)合順鉑(EP)化療48例，吉西他濱聯(lián)合順鉑(GP)化療40例，多西他賽聯(lián)合順鉑(DP)化療34例，吉西他濱聯(lián)合卡鉑(GBP)化療14例。連續(xù)化療2個周期后6個月隨訪，根據(jù)對鉑類藥物敏感與耐藥情況分為鉑類敏感組80例和鉑類耐藥組56例。抽取患者血樣提取DNA進行基因多態(tài)性檢測，分析肺癌患者eIF3a基因多態(tài)性與鉑類藥物化療敏感性及耐藥性的關(guān)系。結(jié)果鉑類耐藥組和鉑類敏感組rs3808952、rs3824830、rs3740555多態(tài)性位點基因型頻率比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)，其中GG基因型頻率對肺癌鉑類耐藥性與敏感性影響最大。EP方案耐藥患者中rs3824830位點突變率最高，GP、DP和GDP中耐藥患者rs3808952位點突變率最高。EP敏感患者中rs3740553位點突變率最低，GP敏感患者中rs3740555位點突變率最低，DP和GDP敏感患者rs3824830 和rs3740553位點突變率最低。結(jié)論 肺癌eIF3a基因多態(tài)性特別是rs3808952、rs3824830、rs3740555位點變異與鉑類藥物化療的敏感性和耐藥性有關(guān)。

關(guān)鍵詞：肺腫瘤；鉑類藥物；eIF3a基因；化學(xué)療法；敏感性；耐藥性

臨床上，鉑類藥物是肺癌、食管癌等腫瘤化療的的一線藥物[1];但是各類腫瘤對該藥物的耐藥性廣泛存在，嚴重地影響了腫瘤化療成功率，是腫瘤患者生存率降低的重要因素。國內(nèi)外研究[2,3]發(fā)現(xiàn)，不同類型腫瘤患者中eIF3a基因多態(tài)性或者基因突變可影響鉑類藥物的化療敏感性和耐藥性。為此本文對肺癌患者鉑類藥物化療敏感性及耐藥性與eIF3a基因多態(tài)性的關(guān)系進行了探討。

1 資料與方法

1.1臨床資料選擇2014年1～12月在本院確診并收治住院肺癌患者136例，男82例、女54例，年齡45～68(51.23±5.49)歲；其中小細胞肺癌32例(局限期8例、廣泛期24例)，非小細胞肺癌104例(鱗癌49例、腺癌55例)。 患者既往均無其他腫瘤病史，經(jīng)支氣管纖維鏡活檢組織病理學(xué)確定肺癌診斷，均順利接受連續(xù)2個周期化療，化療1個周期為3周。其中接受依托泊苷聯(lián)合順鉑(EP)化療48例，吉西他濱聯(lián)合順鉑(GP)化療40例，多西他賽聯(lián)合順鉑(DP)化療34例，吉西他濱聯(lián)合卡鉑(GBP)化療14例。順鉑75 mg/m2靜滴，每周期第1天給藥；多西他賽75 mg/m2靜滴，每周期第1天給藥；依托泊苷95 mg/m2靜滴，每周期第1、2、3天給藥；吉西他濱1 000 mg/m2靜滴，每周期第1、8天給藥；卡鉑200 mg/m2靜滴，每周期第l天給藥。確診至化療結(jié)束患者未接受手術(shù)、放射、生物等其他方法治療，且化療過程中未出現(xiàn)嚴重不良反應(yīng)?；熀箅S訪，根據(jù)患者對鉑類藥物敏感與耐藥情況分為鉑類敏感組(初始化療完成后6個月或更長時間復(fù)發(fā)者)80例和鉑類耐藥組(腫瘤在6個月內(nèi)復(fù)發(fā)者，包括完成初始化療后6個月內(nèi)復(fù)發(fā)患者及初始化療過程中對鉑類藥物不敏感的患者)56例。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準，患者知情同意。

1.2eIF3a基因多態(tài)性位點的篩選和檢測隨訪時抽取患者血樣提取DNA進行基因多態(tài)性檢測。血液樣本在超級潔凈工作臺上提取DNA，之后采用M200 Pro多功能酶標儀測定DNA濃度，每個樣本重復(fù)測量3次，取平均值，控制OD260/OD280值為1.6～1.9，如不在此范圍說明樣本DNA被污染，需重新提取和測定此樣本DNA。根據(jù)文獻報道，本試驗選取了7個多態(tài)位點進行研究，以觀察其與肺癌化療的敏感性關(guān)系。抽取患者的血液樣本DNA采用Mass ARRAY技術(shù)檢測多態(tài)性位點信息，首先進行PCR反應(yīng)擴增DNA，純化后加入單核苷酸多態(tài)性序列特異性地將引物延伸一個堿基，再次純化DNA后點樣至基因芯片上放入真空管，利用飛行時間質(zhì)譜技術(shù)檢測單核苷酸多態(tài)性位點。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料用百分比表示，組間比較采用χ2檢驗；eIF3a基因多態(tài)性位點采用Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1eIF3a基因多態(tài)性位點分型eIF3a基因rs2271364的多態(tài)性位點沒有檢測出突變基因型，rs3808952、rs3824830、rs3740556、rs3736447、rs3740555、rs3740553的多態(tài)性位點均存在突變基因型，且符合Hardy-Weinberg平衡。

2.2eIF3a基因多態(tài)性與肺癌鉑類藥物敏感性和耐藥性的關(guān)系鉑類耐藥組與鉑類敏感組的rs3808952、rs3824830、rs3740555多態(tài)性位點基因型頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)，其中GG基因型頻率對肺癌鉑類耐藥性與敏感性影響最大。rs3740556、rs3736447、rs3740553多態(tài)性位點基因型頻率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。見表1。

2.3肺癌鉑類耐藥組與敏感組應(yīng)用不同化療方案患者eIF3a基因突變情況EP耐藥患者中rs3824830位點突變率最高，GP、DP和GDP耐藥患者中rs3808952位點突變率最高。EP敏感患者中rs3740553位點突變率最低，GP敏感患者中rs3740555位點突變率最低，DP和GDP敏感患者中rs3824830 和rs3740553位點突變率最低。見表2。

表1　肺癌鉑類耐藥組與敏感組eIF3a多態(tài)性位點基因型分布(%)

組別rs3736447AAGAGGrs3740555AAGAGGrs3740553AAGAGG鉑類耐藥組48.2(27/56)66.6(18/27)35.3(12/34)56.2(18/32)40.0(16/40)60.7(17/28)46.1(18/39)65.4(17/26)55.3(21/38)鉑類敏感組51.8(29/56)33.3(9/27)64.7(22/34)43.7(14/32)60.0(24/40)39.3(11/28)53.8(21/39)34.6(9/26)44.7(17/38)

表2　 肺癌鉑類耐藥組與敏感組患者不同化療方案eIF3a基因突變情況 (例)

3討論

研究發(fā)現(xiàn)，參與正常細胞有絲分裂的基因表達改變會增加異常的有絲分裂，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生發(fā)展，eIF3a基因異常會導(dǎo)致有絲分裂中紡錘體出現(xiàn)缺陷。國外通過篩選多個基因的205個單核苷酸多態(tài)性位點，發(fā)現(xiàn)eIF3a基因多個位點異常與肺癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)[4]。鉑類藥物被廣泛應(yīng)用于治療各種實體性腫瘤，其中順鉑作為第一代的鉑類藥物，是治療非小細胞肺癌的一線用藥[5]。鉑類藥物可以通過細胞膜進入細胞內(nèi)從而發(fā)揮其抗腫瘤作用。本文采用鉑類藥物包括順鉑和卡鉑，順鉑屬于細胞周期非特異性藥物，抑制癌細胞的DNA復(fù)制過程，使之發(fā)生細胞凋亡；卡鉑干擾DNA合成，產(chǎn)生細胞毒作用。但是，鉑類藥物誘導(dǎo)的毒性作用及腫瘤耐藥性嚴重影響了肺癌化療的成功率[6]。

核苷酸切除修復(fù)途徑是腫瘤對鉑類藥物耐藥的主要作用機制，eIF3a基因是此途徑的上游基因，能調(diào)節(jié)核苷酸切除修復(fù)途徑的活性[7]。單核苷酸多態(tài)性是基因多態(tài)性的一種形式。研究發(fā)現(xiàn)，elF3a的表達水平與鉑類藥物引起的DNA損傷修復(fù)能力直接相關(guān)[8]，因此常采用提取DNA來檢測基因多態(tài)性。研究證實，elF3a在多種癌癥組織和癌癥細胞中呈現(xiàn)過度高表達[9]，且與化療藥物的多種毒副作用有關(guān)[10]。國內(nèi)對282例非小細胞肺癌患者eIF3a基因的22個單核苷酸多態(tài)性位點進行了檢測，發(fā)現(xiàn)eIF3a基因的rs77382849多態(tài)性位點與鉑類藥物誘導(dǎo)的腎毒性相關(guān)[11]。本文通過查閱文獻選取了7個多態(tài)性位點，顯示肺癌患者eIF3a基因rs3808952、rs3824830、rs3740556、rs3736447、rs3740555、rs3740553多態(tài)性位點均有突變發(fā)生。進一步分析耐藥組和敏感組的rs3808952、rs3824830、rs3740555基因型頻率，發(fā)現(xiàn)3個位點的AA、GA和GG基因型對肺癌鉑類耐藥性與敏感性有影響，其中GG基因型頻率對肺癌鉑類耐藥性與敏感性影響最大，而rs3740556、rs3736447、rs37405533位點的AA、GA和GG基因型對肺癌鉑類耐藥性與敏感性無影響。

本研究還顯示，肺癌患者采用不同的鉑類藥物化療時，EP耐藥患者中rs3824830位點突變率最高，GP、DP和GDP耐藥患者中rs3808952位點突變率最高。EP敏感患者中rs3740553位點突變率最低，GP敏感患者中rs3740555位點突變率最低，DP和GDP中敏感患者rs3824830 和rs3740553位點突變率最低。這可能與不同鉑類藥物致DNA損傷過程中的DNA修復(fù)途徑不同有關(guān)[12,13]。

總之，肺癌患者eIF3a基因多態(tài)性與鉑類藥物化療的敏感性和耐藥性有關(guān)，特別是與rs3808952、rs3824830、rs3740555位點的變異有關(guān)，且采用不同化療方案治療患者基因多態(tài)性位點變異也不相同。

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(收稿日期：2015-12-14)

中圖分類號：R734.2

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)05-0072-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.05.030