■岳　龍　葉小飛　周　玥　趙建飛　胡官波　陳達圖　賀　喜　張石蕊

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學飼料安全與高效利用教育部工程研究中心（動物營養(yǎng)研究所），湖南長沙410128；2.湖南湘潭康奕達油茶生物科技公司，湖南湘潭411100）

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水酶法茶粕作為豬飼糧原料的試驗效果研究

■岳龍1，2葉小飛1周玥1趙建飛1胡官波1陳達圖1賀喜1張石蕊1

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學飼料安全與高效利用教育部工程研究中心（動物營養(yǎng)研究所），湖南長沙410128；2.湖南湘潭康奕達油茶生物科技公司，湖南湘潭411100）

摘要：試驗旨在研究“水酶法”茶粕在生長育肥豬上的飼喂效果，初步判定其用于豬飼料的可能性。采用單因素試驗設計，茶粕在飼糧中替代麥麩比例分為3%（試驗1組）、4%（試驗2組）、5%（試驗3組），對照組為常規(guī)飼糧組。試驗選取18 kg左右健康杜×長×大三元雜交生長豬72頭，隨機分為4組，每組6個重復，每個重復3頭豬，測定生長性能、健康和相關(guān)血液生化指標，試驗分為生長和育肥兩個階段。生長階段結(jié)果：①對照組的日增重與試驗1組和試驗2組之間差異不顯著（P>0.05），顯著高于試驗3組（P<0.05），4個試驗組組間的料肉比差異不顯著（P>0.05）；②四組的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）活性、尿素氮（UREA）含量均差異不顯著（P>0.05）。腹瀉情況在正常范圍內(nèi)。育肥階段結(jié)果：①對照組的日采食量與試驗1組和試驗2組之間差異不顯著（P>0.05），顯著高于試驗3組（P<0.05）。對照組的日增重顯著高于試驗組（P<0.05），試驗1組的日增重顯著高于試驗3組（P<0.05），與試驗2組之間差異不顯著（P>0.05）。對照組的料肉比顯著低于其余各試驗組（P<0.05），試驗組之間差異不顯著（P>0.05）；②對照組的谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）含量與試驗組差異不顯著（P>0.05），對照組血清超氧化物歧化酶（SOD）含量顯著低于試驗組（P<0.05）；③屠宰后試驗豬各臟器表觀均正常。研究結(jié)果表明，水酶法茶粕具有一定的飼用價值，在豬飼料里可以低量添加（4%以內(nèi)）使用，提油后殘留其中的多糖、多酚等活性物質(zhì)則在一定程度有保護豬健康的作用。

關(guān)鍵詞：水酶法；茶粕；豬；生長性能

doi:10.13302/j.cnki.fi.2016.02.009

茶粕是茶籽經(jīng)過提油后的殘留物，由于加工工藝的不同，所得茶粕的殘渣的成分也不盡相同。本試驗的茶粕來自于湖南康奕達茶油生物有限公司，公司采用“水酶法”技術(shù)對茶籽進行安全高效提油?！八阜ā笔菍⒕x后的油茶籽果仁碾磨至微米級，在常溫下以純凈水和食品級酶為介質(zhì)，將現(xiàn)代食品生物技術(shù)與高效分離技術(shù)貫穿油茶籽油提取全過程，2007實現(xiàn)油茶籽油綠色清潔提取，出油率高，摒棄了“蒸炒-壓榨-浸出-精煉”的傳統(tǒng)油茶籽油提取與加工模式，有效消除了黃曲霉毒素、3,4-苯并芘、反式脂肪酸等有害成分產(chǎn)生的隱患，并且具有較高含量的植物多糖、多酚、類黃酮等物質(zhì)，這些有效成分進入動物機體后，可作用于機體內(nèi)環(huán)境參與各種生理代謝，具有提高動物生產(chǎn)性能、增強機體免疫、抗菌、抗病毒、抗氧化等作用，因此，所得副產(chǎn)物茶粕具有潛在飼料原料的特征[1-5]。

為了評估水酶法茶粕作為新飼料原料的飼用價值，按照國家新飼料法規(guī)，需要開展動物飼養(yǎng)試驗、消化代謝試驗、屠宰試驗、生理生化及毒害試驗等多方面綜合試驗進行研究論證。本次試驗旨在通過飼喂不同階段的豬，測定試驗豬的生長性能、健康評價和相關(guān)血液生化指標，初步判定“水酶法”茶粕用于豬飼料中的可能性和效果。

1　材料與方法

1.1試驗材料

水酶法茶粕由湖南康奕達油茶生物科技有限公司提供，其概略養(yǎng)分為：水分6.71%、粗蛋白12.52%、粗脂肪9.06%、粗纖維21.14%、粗灰分3.17%、皂素2.14%，色澤為黃褐色均勻一致物品。

1.2試驗地點、時間

本研究于2013年5月～9月在湖南農(nóng)業(yè)大學動物營養(yǎng)研究所試驗基地進行。

1.3動物分組及管理

試驗采用單因素完全隨機試驗設計。試驗分為生長和育肥兩個階段開展。

試驗選用18 kg左右健康杜×長×大三元雜交生長豬72頭，隨機分為4組，每組6個重復，每個重復（欄）3頭豬，公、母比例一致開展飼養(yǎng)試驗。生長階段（18～ 58 kg）為50 d，育肥階段（58～90 kg）為74 d。

試驗期間人工投料，試驗豬模擬自由采食，每日投料2次（上午08:30、下午16:00各投料1次，保證每次投料前槽內(nèi)尚有少量余料）。自由飲水，其它的衛(wèi)生防疫和日常管理按照養(yǎng)殖場常規(guī)方法進行。

1.4飼糧配方及營養(yǎng)水平

基礎(chǔ)飼糧配方參照NRC豬營養(yǎng)需要(1998)和中國豬飼養(yǎng)標準（2004）配制。

生長階段飼糧在基礎(chǔ)飼糧（對照組）配方的基礎(chǔ)上用茶粕替代麥麩3%、4%和5%，組成試驗1組、試驗2組和試驗3組，基礎(chǔ)飼糧配方見表1。

對照組另添加藥物飼料添加劑金霉素20 mg/kg，抗敵素20 mg/kg，試驗1組、2組、3組均不添加任何藥物飼料添加劑。

育肥階段，試驗豬按體重重新分組，飼糧在基礎(chǔ)飼糧（對照組）配方的基礎(chǔ)上用茶粕替代麥麩2%、3% 和4%，組成試驗1組、試驗2組和試驗3組日糧，基礎(chǔ)飼糧配方見表2。本階段全部飼糧不添加任何藥物添加劑。

表1　生長階段基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎(chǔ)）

表2　育肥階段基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎(chǔ)）

1.5檢測指標

1.5.1生長性能

在試驗開始和結(jié)束的清晨，分別以重復（欄）為單位對試驗豬進行空腹稱重；同時以重復（欄）為單位每天準確記錄投料量、剩料量和耗料量，以計算平均日增重（ADG）、平均采食量（ADFI）、料肉比（F/G）。

1.5.2血液生化指標

試驗結(jié)束后清晨，每組隨機選取6頭豬在空腹情況下，用真空采血管于前腔靜脈采血10 ml，室溫傾斜放置30 min，用離心機以3 500 r/min速度離心約15 min后，分離得血清樣品，將血清樣放在-20℃冰箱中冷凍保存，以備用于血清生化指標檢測。

血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、尿素氮（UREA）和堿性磷酸酶（ALP）均采用MINDRAY BS-200全自動生化分析儀及相關(guān)試劑盒測定。

抗氧化指標包括谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）、超氧化歧化酶（SOD）酶活和丙二醛（MDA）含量，均采用MINDRAY BS-200全自動生化分析儀及相關(guān)試劑盒測定。

1.5.3腹瀉率

每天記錄試驗豬腹瀉的頭數(shù)并計算腹瀉率。

腹瀉率(%)=試驗期腹瀉仔豬頭次/(試驗仔豬頭數(shù)×試驗天數(shù))×100。

1.5.4屠宰臟器評估

試驗過程中觀察記錄豬日常行為表現(xiàn)是否正常，有無異常。育肥階段結(jié)束后，從對照組和3個試驗組中分別各自隨機取3頭體重相當?shù)脑囼炟i進行屠宰，由專業(yè)人員屠宰后比較觀察其重要臟器的表觀狀況，做出健康評估。

2　結(jié)果與分析

2.1生長階段豬生長性能結(jié)果（見表3）

表3　生長階段豬生長性能測定結(jié)果

由表3可知，對照組的日采食量(ADFI)比試驗1組、試驗2組和試驗3組分別高4.65%、9.76%和14.41%，與試驗1組和試驗2組之間差異不顯著（P> 0.05），與試驗3組差異顯著（P<0.05）。試驗組之間無顯著差異（P>0.05）。

對照組的日增重（ADG）比試驗1組、試驗2組和試驗3組分別高3.61%、10.30%和27.68%，與試驗1組和試驗2組之間差異不顯著（P>0.05），與試驗3組相比差異顯著（P<0.05）。試驗組間，試驗1組的日增重顯著高于試驗3組23.23%，差異顯著（P<0.05）。

2.2生長階段血液生化指標(見表4)

表4　生長階段豬血液生化指標測定結(jié)果（mmol/l）

血清AST活性在四組之間差異均不顯著（P> 0.05），對照組比試驗1組，試驗2組和試驗3組分別高10.41%、21.87%和6.59%。

四組之間血清ALT活性差異不顯著（P>0.05），對照組比試驗1組高5.63%，比試驗2組和試驗3組低10.04%和26.34%。

四個組間血清UREA含量差異均不顯著（P> 0.05），對照組比試驗1組低9.46%，比試驗2組和試驗3組分別高9.54%和14.20%。

四個組之間血清ALP活性差異不顯著（P>0.05），對照組比試驗1組和試驗2組分別低9.49%和7.30%，比試驗3組高8.28%。

2.3生長階段健康評價

腹瀉率是評價試驗豬在試驗期間健康狀況的一個重要和直觀的指標。生長階段中試驗豬腹瀉情況見表5。

表5　生長階段腹瀉率評價結(jié)果（%）

從表5可以看出，各組偶有腹瀉，腹瀉率均不高，在正常范圍。此外，豬在試驗期間均無其他異常表現(xiàn)。

2.4育肥階段豬生產(chǎn)性能（見表6）

表6　育肥階段豬生產(chǎn)性能測定結(jié)果

從表6中可以看出，對照組的日采食量比試驗1組低4.95%，比試驗2組和試驗3組分別高2.93%和21.26%，與試驗1組和試驗2組之間差異不顯著（P> 0.05），與試驗3組相比差異顯著（P<0.05）。試驗組間以試驗1組采食量最高，比試驗2組和試驗3組高8.29%和27.59%，與試驗2組相比差異不顯著（P> 0.05），與試驗3組差異顯著（P<0.05）。

對照組的日增重比試驗1組、試驗2組和試驗3組分別高16.82%、23.42%和41.79%，對照組顯著高于其余試驗組（P<0.05）。試驗組之間，試驗1組顯著高于試驗3組（P<0.05），但與試驗2組之間差異不顯著（P>0.05）。

對照組的料肉比顯著低于其余各試驗組(P<0.05)，比試驗1組、試驗2組和試驗3組分別低19.83%、16.08%和15.59%。試驗組之間差異不顯著(P>0.05)。

2.5育肥階段抗氧化指標(見表7)

表7　育肥階段豬血清抗氧化指標測定結(jié)果（mmol/l）

由表7中的試驗結(jié)果可以看出，對照組的GSHPx結(jié)果與試驗組之間很接近，差異不顯著（P>0.05）。

對照組的SOD活性顯著低于試驗組，比試驗1組、試驗2組和試驗3組分別低9.94%、12.15%和8.76%，試驗組之間差異不顯著（P>0.05）。

對照組MDA結(jié)果與試驗組之間差異不顯著（P> 0.05），其中以試驗2組最高，為3.37 mmol/l。

2.6育肥階段健康評價

試驗過程中豬的日常表現(xiàn)無異常。從對照組和試驗3個組中分別各自隨機取3頭體重相當試驗豬進行屠宰、觀察，其心、肝、肺、腎、脾、腸等重要臟器大小、色澤等表觀正常。

3　討論

3.1水酶法茶粕對豬生長性能的影響

從生長階段和育肥階段的生長性能結(jié)果可以看出，隨著茶粕替代麥麩量的增加，試驗豬的生長性能呈逐步下降趨勢，可能的原因有兩方面：第一，水酶法茶粕的粗纖維含量較高，第二，水酶法茶粕中含有一定的茶皂素等抗營養(yǎng)因子，這些因素綜合影響了飼料的適口性和消化吸收，對生長性能產(chǎn)生了一定影響。

3.2水酶法茶粕對豬的健康狀況的影響

整個試驗期間，試驗豬健康表現(xiàn)良好。豬的屠宰比較觀察證實，各內(nèi)臟器官未發(fā)現(xiàn)有何異常，初步反映水酶法茶粕在本試驗條件下對豬的健康、內(nèi)臟器官無不良影響。

3.3水酶法茶粕對豬血液生化指標的影響

血清中AST和ALT的活性是檢查肝功能是否正常的理化指標，肝功能不全時，血清中的酶活性將會升高。本試驗中試驗組的AST和ALT活性均比對照組低，在正常范圍，這說明水酶法茶粕沒有對肝功能造成不利影響。

UREA可以較準確地反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝情況和日糧氨基酸的平衡情況，蛋白質(zhì)代謝異常時，UREA濃度升高，蛋白質(zhì)代謝良好時，UREA濃度降低。四個組UREA均在正常范圍內(nèi)，表明水酶法茶粕對機體蛋白質(zhì)的代謝無不良影響。

血清中ALP與脂肪、糖類和蛋白質(zhì)的吸收與運輸密切相關(guān)。正常情況下，ALP由于細胞膜的屏障作用，不易逸出，僅由細胞的不斷更新破壞而少量釋入血液。本試驗的ALP的結(jié)果顯示，四個組的ALP均在正常范圍內(nèi)。

3.4水酶法茶粕對豬血清抗氧化指標的影響

血清GSH-Px、SOD是機體重要的抗氧化的生物活性成分，具清除自由基、保護細胞的功能[6]，MDA為自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化終產(chǎn)物，與蛋白質(zhì)和核酸結(jié)構(gòu)上氨基、巰基等發(fā)生交聯(lián)作用，從而破壞蛋白質(zhì)和核酸的正常結(jié)構(gòu)，并使之喪失原有功能[7]。

機體防御系統(tǒng)的抗氧化能力與機體的健康程度存在著密切的關(guān)聯(lián)。劉蓉（2013）研究發(fā)現(xiàn)，茶皂素對·O2-自由基和·OH自由基有明顯的清除作用，具有良好的體外抗氧化活性。茶多酚的分子結(jié)構(gòu)上含有大量的羥基（-OH），特別是鄰位羥基，可以起供氧作用，與脂肪中的游離基相結(jié)合而中斷脂肪酸氧化的連鎖反應，從而起到抗氧化作用[8]。從試驗結(jié)果可以看出，對照組與試驗組血清GSH-Px和MDA差異不顯著，但對照組SOD顯著低于試驗組，可能茶粕中茶皂素和茶多酚在起抗氧化作用的同時，能在一定程度上協(xié)同提高SOD的活性，從而能提高豬機體的抗氧化能力。具體機理還需要進一步研究。

4　結(jié)論

研究表明，水酶法茶粕綜合營養(yǎng)作用低于小麥麩，但具有一定的飼用價值。在豬飼料里可以低量添加使用，其主要抗營養(yǎng)因子應為粗纖維，殘留的皂素等亦有一定影響。提油后殘留其中的多糖、多酚等活性物質(zhì)則在一定程度有保護豬健康的作用。

建議進一步降低水酶法茶粕中皂素含量(<1%)，盡可能保留有用的活性物質(zhì)，以利水酶法茶粕作為功能性新飼料原料的開發(fā)利用。

參考文獻

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（編輯：沈桂宇，guiyush@126.com）

Study on the effect of aqueous enzymatic extraction of tea seed meal as raw material in feed of pig

Yue Long, Ye Xiaofei, Zhou Yue, Zhao Jianfei, Hu Guanbo, Chen Datu, He Xi, Zhang Shirui

Abstract：This experiment was conducted to study the effect of "water enzyme method" tea seed meal on growing and finishing pigs, the possibility that tea seed mea used as feed ingredient was dis?cussed. Through single factor experiment design, the ratio of tea seed meal replace wheat bran in feed formula were 3%(group 1), 4%(group 2), 5%(group 3), the control group was nomarl feed without tea seed meal. This experiment was conducted to choose 72 barrows(Duroc×Landrace×Yorkshire), which were allotted to 4 treatments with 3 replicates per treatment and 6 barrows per replicate.Growth perfor?mance, and related blood biochemical indexes were determined. The results in growing process showed as follows:①The ADG among control group, group 1 and group 2 were no significantly different(P> 0.05), control group was significantly higher than group 3(P<0.05); F/G showed no significantly differ? ent among four groups(P>0.05).②serum aspar?tate aminotransferase(AST), alanine aminotrans?ferase(ALT), blood urea nitrogen(UREA) and al?kaline phosphatase (ALP) showed no significant difference among four groups(P>0.05). The diar?rhea was in the normal range.

The results in finishing process showed asfollows:①The daily intake among control group, group 1 and group 2 were no significantly different(P> 0.05), control group was significantly higher than group 3(P<0.05); The ADG of control group was sig?nificantly higher than others(P<0.05), The ADG of group 1 was significantly higher than group 3(P< 0.05). The F/G of control group was significantly lower than others(P<0.05), the F/G among group 1, group 2 and group 3 had no significant difference (P>0.05).②The content of glutathione peroxidase (GSH-Px) and malondialdehyde (MDA) in control group were not significantly higher than others(P> 0.05), the content of serum superoxide dismutase (SOD) in control group were significantly lower than others(P<0.05).③Organs were normal after slaughtered. This experiment showed that: water enzyme method tea seed meal has certain value in the feed, with low adding(less than 4%); The active ingredi?ent such as polysaccharide and polyphenol which was left from oil extraction was help to protect the health of pigs.

Key words：aqueous enzymatic method；camellia pancake；pig；growth performance

基金項目：國家高新技術(shù)研究發(fā)展計劃項目[2013AA102107]；湖南省科技廳項目[2007NK3088]

收稿日期：2015-11-10

通訊作者：張石蕊，教授。

作者簡介：岳龍，碩士，研究方向為飼料營養(yǎng)。

中圖分類號：S816.32

文獻標識碼：A

文章編號：1001-991X（2016）02-0042-05