張富麗，牛 蓓，常麗娟，宋 君，王 東，尹 全， 劉文娟

(1.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測(cè)試中心，四川 成都 610066；2.成都大學(xué)醫(yī)學(xué)院，四川 成都 610106)

PCR方法在抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻外源基因漂移風(fēng)險(xiǎn)研究中的應(yīng)用

張富麗1，牛 蓓2*，常麗娟1，宋 君1，王 東1，尹 全1， 劉文娟1

(1.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測(cè)試中心，四川 成都 610066；2.成都大學(xué)醫(yī)學(xué)院，四川 成都 610106)

本試驗(yàn)以抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)為研究對(duì)象，將幾種非轉(zhuǎn)基因常規(guī)栽培水稻種植在其周圍，采用PCR檢測(cè)方法對(duì)不同距離收集的F1代水稻種子進(jìn)行轉(zhuǎn)基因雜種鑒定，統(tǒng)計(jì)并分析外源基因漂移的頻率，評(píng)估無標(biāo)記基因抗蟲水稻基因漂移風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)果顯示，外源bt基因向P13381和春江063水稻平均漂移頻率皆為零。而抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)與非轉(zhuǎn)基因水稻合系22-2、天香、明恢63、P1157幾個(gè)品種不同程度地發(fā)生了轉(zhuǎn)基因漂移，平均漂移頻率最高為0.88 %，并且漂移頻率隨著距離加大而逐漸降低，在7 m 以外的所有采樣點(diǎn)平均轉(zhuǎn)基因漂移頻率為零。采用合理田間布局、物理隔離、保持合適距離，以及科學(xué)安排農(nóng)時(shí)、錯(cuò)開花期等方式，可有效減小轉(zhuǎn)基因水稻外源基因漂移風(fēng)險(xiǎn)。本試驗(yàn)表明，采用PCR法可以準(zhǔn)確地進(jìn)行轉(zhuǎn)基因雜種的鑒定，但缺點(diǎn)是工作量很大，耗時(shí)較長(zhǎng)，需進(jìn)一步尋求更簡(jiǎn)便高效的方法用于檢測(cè)無標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)基因漂移頻率。

轉(zhuǎn)基因水稻；抗蟲性；基因漂移；環(huán)境安全；PCR方法

2014年全球轉(zhuǎn)基因種植面積已達(dá)到18.15億公頃，相比1996年轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化之初增加了100倍[1]。轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的快速發(fā)展和轉(zhuǎn)基因作物的不斷培育，為全球糧食安全保障帶來了新的契機(jī)的同時(shí)，轉(zhuǎn)基因作物潛在的生物安全問題也成為各界的關(guān)注焦點(diǎn)之一[2-3]。許多國(guó)家和地區(qū)已經(jīng)頒布實(shí)施了一系列法律法規(guī)強(qiáng)化轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全管理和標(biāo)識(shí)管理。環(huán)境影響評(píng)價(jià)是評(píng)估轉(zhuǎn)基因植物生物安全性的重要內(nèi)容，而轉(zhuǎn)基因植物中外源基因向非轉(zhuǎn)基因常規(guī)栽培稻漂移的頻率是評(píng)價(jià)其對(duì)環(huán)境影響的重要方面，因此，基因漂移是轉(zhuǎn)基因作物商品化生產(chǎn)前環(huán)境安全評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容之一。

水稻是重要的糧食作物，在解決全球糧食安全問題中擔(dān)當(dāng)重要角色。通過轉(zhuǎn)基因手段提高產(chǎn)量、優(yōu)化性狀的相關(guān)研究越來越多，已成功培育出多個(gè)轉(zhuǎn)基因水稻品種[4]。其中轉(zhuǎn)Bt和CpTI基因的抗蟲、轉(zhuǎn)Xa21基因抗病和轉(zhuǎn)bar，EPSPs基因抗除草劑是幾種主要改良的目的性狀，其節(jié)省農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本、減少農(nóng)藥化肥對(duì)環(huán)境污染等特性將產(chǎn)生巨大經(jīng)濟(jì)和環(huán)境效益，轉(zhuǎn)基因水稻大規(guī)模環(huán)境釋放和商品化生產(chǎn)在未來勢(shì)不可擋。目前轉(zhuǎn)基因水稻在全球僅在伊朗等少數(shù)地方進(jìn)行商品化種植[5]，雖然無數(shù)據(jù)顯示轉(zhuǎn)基因水稻的商業(yè)化釋放對(duì)環(huán)境造成顯著影響，但轉(zhuǎn)基因水稻環(huán)境安全相關(guān)的研究在國(guó)內(nèi)外已作為重要課題全面開展。薛大偉等[6]研究表明，轉(zhuǎn)bar基因抗除草劑水稻外源基因可能漂移到普通野生稻，但不易漂移到藥用野生稻和疣粒野生稻。戎俊等[5]研究發(fā)現(xiàn)雙價(jià)(Bt/CpTI基因)抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻品系及其相應(yīng)的非轉(zhuǎn)基因水稻親本品種在相鄰種植條件下，外源基因具有向非轉(zhuǎn)基因水稻親本品種發(fā)生漂移的可能性，但頻率較低。Jia等[7]的研究亦表明，轉(zhuǎn)bar基因抗除草劑粳稻近距離(0 m)向不育系發(fā)生基因漂移的頻率可以達(dá)到很高(36.116 %)，而向雜交水稻發(fā)生基因漂移的頻率卻很低，不超過0.045 %。研究表明水稻花粉受體的異交率是決定基因漂移頻率的重要因素[8]，不同品種的水稻間具有不同的異交率[9-10]，從而不同水稻品種間發(fā)生基因漂移的概率也可能不同。對(duì)各水稻品種進(jìn)行具體而深入的研究，以此來制定相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因水稻生物安全監(jiān)測(cè)和管理措施更科學(xué)有效。我國(guó)農(nóng)業(yè)部已批準(zhǔn)轉(zhuǎn)cry1Ab/cry1Ac基因抗蟲水稻華恢1號(hào)和Bt汕優(yōu)63在湖北省生產(chǎn)應(yīng)用的安全證書，這預(yù)示著轉(zhuǎn)基因水稻在我國(guó)商品化進(jìn)程更進(jìn)一步了。近年來對(duì)該抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻環(huán)境安全的研究多集中于對(duì)土壤[ 11-12]、微生物群落[13]及其他生物群落[ 14-18]的影響研究，對(duì)其外源基因漂移的文獻(xiàn)報(bào)道較少。目前，基因漂移研究通常以抗藥性或潮霉素篩查和表型鑒定為基礎(chǔ)[4, 19-21]。然而這些方法不適于抗蟲水稻華恢1號(hào)基因漂移頻率的檢測(cè)。抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)外源基因在轉(zhuǎn)入受體后標(biāo)記基因hpt即被敲除了，不能采用潮霉素抗性篩選的方法來鑒定篩選。而針對(duì)外源基因的分子檢測(cè)方法能有效解決無標(biāo)記外源基因檢測(cè)的問題，可準(zhǔn)確檢測(cè)的漂移頻率[22-23]。目前，PCR法是分子檢測(cè)工作中最常用的可靠檢測(cè)方法。因此，本試驗(yàn)以華恢1號(hào)為研究對(duì)象，通過采用PCR方法檢測(cè)F1代種子的雜交率，研究抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻在田間生產(chǎn)的自然條件下外源基因向非轉(zhuǎn)基因常規(guī)栽培水稻漂移的可能性及其頻率，以初步估計(jì)防止基因漂移發(fā)生的安全距離，以期為轉(zhuǎn)基因水稻外源基因漂移的防控和監(jiān)管提供數(shù)據(jù)支持，同時(shí)為常規(guī)栽培稻生產(chǎn)的保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)(HUAHUI-1)，由農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因植物環(huán)境安全監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(杭州)提供。該材料外源抗性基因?yàn)锽t(cry1Ab/Ac)融合基因，轉(zhuǎn)化事件為TT51-1，系華中農(nóng)業(yè)大學(xué)和國(guó)際水稻所共同培育的高抗鱗翅目害蟲轉(zhuǎn)基因水稻品系。

6個(gè)非轉(zhuǎn)基因水稻品系：春江063 (Chunjiang 063)，系常規(guī)粳稻晚熟品種，由農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因植物環(huán)境安全監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(杭州)提供；合系22-2 (Hexi 22-2)，系常規(guī)旱作粳稻品種，由四川省華龍種業(yè)有限公司提供；天香 (Tianxiang)，系秈型雜交水稻品種，由四川天宇種業(yè)有限公司提供；明恢63 (Minghui 63)，系秈稻恢復(fù)系，由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供；P13381和P1157均為四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所培育，其中P13381為早熟秈稻雜交水稻，P1157為常規(guī)粳稻，兩者均為水稻新品種，為保護(hù)商業(yè)機(jī)密，文中均以代號(hào)稱之。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 供試材料的鑒定 在田間試驗(yàn)開始之前，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)業(yè)部953號(hào)公告-6-2007[24]及農(nóng)業(yè)部1193號(hào)公告-3-2009方法[25]，采用PCR檢測(cè)方法對(duì)供試的抗蟲轉(zhuǎn)基因及非轉(zhuǎn)基因水稻進(jìn)行分子鑒定。從轉(zhuǎn)基因材料 “華恢1號(hào)”中擴(kuò)增到外源Bt基因和轉(zhuǎn)化體TT51-1特異性條帶，其他水稻品系中不能擴(kuò)增到目的條帶，確定供試材料轉(zhuǎn)基因及非轉(zhuǎn)基因的真實(shí)性。所用引物序列見表1，由上海生工(上海)合成。采用植物基因組提取試劑盒(天根生化科技(北京)有限公司)提取供試水稻種子中基因組DNA。超微量紫外分光光度計(jì)ND-1000 (NanoDrop Technologies, Inc, USA)檢測(cè)核酸濃度和純度，并稀釋至25 ng/μl，取2 μl作為模板，在25 μl 含1× QuickTaq?HS DyeMix試劑(Toyobo Co., Ltd.,日本)， 0.4 μM 各引物的反應(yīng)體系中進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物用2 %瓊脂糖膠進(jìn)行電泳分析。

1.2.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)和取樣 試驗(yàn)于四川省農(nóng)科院分析測(cè)試中心溫江轉(zhuǎn)基因植物環(huán)境安全試驗(yàn)基地進(jìn)行。該基地四周建有3 m 高的圍墻，圍墻外面為果園及林地。土壤為沙壤土，肥力良好，排灌情況良好，0 ～ 20 cm 土層有機(jī)質(zhì)含量1.87 g·kg-1，全氮0. 8 g·kg-1， 速效磷9.7 mg·kg-1，速效鉀176.9mg·kg-1，pH 6.2 ～6.9。在基地內(nèi)選擇一塊平整、肥力均勻的田塊，約為660 m2。田間布局如圖1，將抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)種植于試驗(yàn)田塊中央，種植面積為25 m2(5 m × 5 m)，6種非轉(zhuǎn)基因水稻分別種植1 m×10 m，等寬隨機(jī)排列于轉(zhuǎn)基因水稻的四周，以避免試驗(yàn)地微環(huán)境不同可能導(dǎo)致的位置效應(yīng)。田間其余空地及周邊種植當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)水稻品種以作試驗(yàn)保護(hù)帶。將供試種子浸種、消毒、催芽后，培苗30 d，取選擇大小一致、生長(zhǎng)健壯的幼苗按試驗(yàn)設(shè)計(jì)移栽到相應(yīng)區(qū)塊中。種植株距和行距均為 0.2 m。按照常規(guī)方法進(jìn)行田間水肥管理。水稻成熟后，采集非轉(zhuǎn)基因水稻F1代種子樣本。采集點(diǎn)從距離轉(zhuǎn)基因水稻“華恢1號(hào)” 0 m 處(相鄰點(diǎn))開始，每1 m 收取10 株為1個(gè)樣本，最遠(yuǎn)取樣距離為10 m。分別按不同方向、不同距離保存收集樣本，供后期檢測(cè)用。

表1 PCR檢測(cè)所用的引物

試驗(yàn)基地按照國(guó)家對(duì)轉(zhuǎn)基因材料環(huán)境安全有關(guān)管理?xiàng)l例規(guī)定進(jìn)行圍墻和相應(yīng)隔離設(shè)施設(shè)置，并在試驗(yàn)后將所有試驗(yàn)材料進(jìn)行焚燒滅活處理。

1.2.3 非轉(zhuǎn)基因水稻F1代種子發(fā)芽率及分子鑒定 將收獲的F1代種子進(jìn)行風(fēng)干處理，并在干燥的條件下保存3個(gè)月以上，以打破種子休眠。將各個(gè)點(diǎn)收集的種子催芽至露白后，隨機(jī)選取 200 粒種子，均勻擺放在Φ12 cm 的培養(yǎng)皿中，37 ℃恒溫培養(yǎng)。調(diào)查各點(diǎn)樣本的發(fā)芽率。待長(zhǎng)出幼苗后，采用植物基因組提取試劑盒(天根生化科技(北京)有限公司)分別提取幼苗葉片基因組DNA。以提取到的DNA為模板，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)業(yè)部953號(hào)公告-6-2007[25]通過PCR技術(shù)檢測(cè)外源Bt基因，擴(kuò)增產(chǎn)物用2.0 %瓊脂糖進(jìn)行電泳分析。

圖1 田間布置Fig.1 Field arrangement

1.2.4 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析 如DNA模板中能擴(kuò)增到目標(biāo)帶，表明供試基因組DNA中帶有外源Bt基因，也即外源基因從轉(zhuǎn)基因水稻向非轉(zhuǎn)基因水稻發(fā)生了漂移。將能擴(kuò)增出目標(biāo)條帶的種子鑒定為轉(zhuǎn)基因雜種。統(tǒng)計(jì)轉(zhuǎn)基因雜種的數(shù)量，計(jì)算外源基因漂移頻率。本試驗(yàn)中以檢測(cè)到外源Bt基因片段的F1代幼苗數(shù)占檢測(cè)總苗數(shù)的百分比除以發(fā)芽率作為外源基因的漂移頻率，也即抗蟲轉(zhuǎn)基因的漂移頻率=(轉(zhuǎn)基因雜種數(shù)量/檢測(cè)總苗數(shù)×100 %)÷發(fā)芽率。4個(gè)方位同一距離采樣點(diǎn)樣本作為 4 個(gè)重復(fù)，外源基因?qū)Ω鱾€(gè)品種水稻的漂移頻率取相同距離4個(gè)點(diǎn)漂移頻率的平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試材料真實(shí)性鑒定

分別采用SPS、Bt、TT51 3對(duì)引物對(duì)抗蟲轉(zhuǎn)基因材料華恢1號(hào)種子基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果如圖2所示，3 對(duì)引物均能從DNA模板中擴(kuò)增到特異性目標(biāo)帶，從而可以確定本試驗(yàn)所用的抗蟲轉(zhuǎn)基因材料是華恢1號(hào)真實(shí)種子。而從其余幾種非轉(zhuǎn)基因水稻材料中，僅能擴(kuò)增到SPS內(nèi)源基因，不能擴(kuò)增到Bt、TT51的目標(biāo)片段。

2.2 外源Bt基因的漂移頻率

采用常規(guī)定性PCR技術(shù)對(duì)各點(diǎn)收集的F1代水稻種子進(jìn)行轉(zhuǎn)基因雜種鑒定，通過統(tǒng)計(jì)各采集點(diǎn)轉(zhuǎn)基因雜種的數(shù)量，計(jì)算各點(diǎn)外源基因漂移到常規(guī)水稻的頻率，結(jié)果見表2。在P13381和春江063水稻所有種子中均未檢測(cè)到外源Bt基因的特異性目的條帶，基因漂移頻率判為零。而在合系22-2、天香、P1157、明恢63幾種水稻F1代種子中檢測(cè)到外源Bt基因，說明轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)與合系22-2、天香、明恢63、P1157幾個(gè)非轉(zhuǎn)基因水稻品種之間發(fā)生了基因雜交，且外源Bt基因向非轉(zhuǎn)基因水稻發(fā)生漂移。結(jié)果還表明F1代中含有外源基因的水稻幼苗株數(shù)多少與距離轉(zhuǎn)基因水稻遠(yuǎn)近有關(guān)。距離越遠(yuǎn)，陽性雜交率越低。漂移頻率最高為0.88 %，發(fā)生在天香、明恢63與轉(zhuǎn)基因材料相鄰(0 m)的采集點(diǎn)。平均漂移頻率隨著距離加大逐漸降低，在距離轉(zhuǎn)基因材料7 m 以外的采樣點(diǎn)F1代種子中沒有檢測(cè)到Bt外源基因，平均轉(zhuǎn)基因漂移頻率為零。據(jù)初步分析，春江063為晚熟品種，其揚(yáng)花時(shí)間比華恢1號(hào)晚20 d 左右，而P13381為早熟品種，其揚(yáng)花時(shí)間比其他水稻都早15 d 左右，可能因花期不遇，阻斷了通過花粉傳播與轉(zhuǎn)基因水稻發(fā)生基因交流的可能，從而在本實(shí)驗(yàn)中春江063和P13381 兩種水稻F1代植株中均未檢測(cè)到基因漂移的發(fā)生。而其他4 種水稻花期均與轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)一致，具有通過花粉傳播與轉(zhuǎn)基因水稻發(fā)生基因交流的可能，而且距離越短，發(fā)生基因漂移的頻率越高。

表2 轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻外源基因向非轉(zhuǎn)基因水稻漂移的頻率

M:2000 bp DNA ladder圖2 供試水稻材料鑒定的電泳圖譜Fig.2 Electrophoresis pattern of identification of the supplied materials

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)表明，采用PCR法用于轉(zhuǎn)基因雜種的鑒定，簡(jiǎn)單易行，且準(zhǔn)確性高，但明顯的缺點(diǎn)是工作量很大，耗時(shí)較長(zhǎng)。因此，對(duì)于無法利用標(biāo)記基因或抗藥性進(jìn)行篩選的轉(zhuǎn)基因作物外源基因自然雜交率的研究，還需要尋求一種更簡(jiǎn)單快速的方法。

從試驗(yàn)可以看出，抗蟲水稻外源基因具有一定逃逸的風(fēng)險(xiǎn)，但基因漂移頻率非常低。本研究中外源Bt基因向其它幾種非轉(zhuǎn)基因常規(guī)栽培品種基因漂移不超過0.88 %，其對(duì)生態(tài)環(huán)境的潛在風(fēng)險(xiǎn)很小。試驗(yàn)中轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因植株間的最短距離僅 20 cm，在這種極端條件下的轉(zhuǎn)基因漂移頻率不超過1 %，那么通常田間栽培情況下發(fā)生的基因漂移概率會(huì)更低。該結(jié)果肯定了Stewart等人[26]認(rèn)為水稻是一種低風(fēng)險(xiǎn)作物的說法。

本試驗(yàn)選擇常規(guī)粳稻栽培品種和秈稻雜交水稻品種作為受體供試材料，結(jié)果表明在花期相遇的情況下，轉(zhuǎn)基因水稻中外源基因是可能逃逸到非轉(zhuǎn)基因常規(guī)水稻中的，但漂移頻率較低，且距離轉(zhuǎn)基因花粉源的越遠(yuǎn)，外源基因漂移的頻率越低，這與Song等人[27]的研究結(jié)果是基本一致的。也即距離轉(zhuǎn)基因花粉源越遠(yuǎn)，空氣中攜帶外源基因的花粉密度就越低，加上周圍非轉(zhuǎn)基因水稻的干擾，大大降低了轉(zhuǎn)基因的漂移頻率。本試驗(yàn)中，即使在可能有基因交流的 2 個(gè)品種間，在7 m 以外采樣點(diǎn)的F1代種子中皆未檢測(cè)到Bt外源基因，這有力地證實(shí)了距離隔離可以有效地降低轉(zhuǎn)基因水稻向非轉(zhuǎn)基因水稻的基因漂移頻率。結(jié)果還表明，春江063和P13381 2種水稻與轉(zhuǎn)基因水稻華恢1號(hào)之間因花期不遇沒有發(fā)生基因漂移。綜合分析可看出，田間合理布局、物理隔離、保持合適距離，以及科學(xué)安排農(nóng)時(shí)，錯(cuò)開花期等方式，能有效控制轉(zhuǎn)基因水稻外源基因漂移，降低轉(zhuǎn)基因逃逸帶來的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。然而，轉(zhuǎn)基因植物與非轉(zhuǎn)基因植物之間的基因交流影響因子很多，很復(fù)雜，需要進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)期的跟蹤監(jiān)測(cè)，積累大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，才能得出最終結(jié)論，才可對(duì)轉(zhuǎn)基因植物的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行有效的評(píng)估。因此，對(duì)抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻外源Bt基因漂移及其環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)的研究將是一個(gè)長(zhǎng)期的過程。

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(責(zé)任編輯 陳 虹)

PCR Detection Method for Assessment Risk of Gene Flow from Insect-resistance Transgenic Rice

ZHANG Fu-li1, NIU Bei2*, CHANG Li-juan1, SONG Jun1, WANG Dong1, YIN Quan1, LIU Wen-juan1

(1.Analysis and Determination Center, Sichuan Academy of Agricultural Sciences, Sichuan Chengdu 610066, China; 2. Medical College, Chengdu University, Sichuan Chengdu 610106, China)

In this paper, the genetically modified rice HUAHUI-1 was used as test material which was planted around by some non-transgenic rice cultivars, their F1seeds from the HUAHUI-1 were collected at different distance, and their hybrid seedlings with foreignBtgene were identified by PCR technique. The frequency of gene flow from insect-resistance transgenic rice to conventional rice varieties at each sampling site was count and analyzed. The results showed that the frequency ofBtgene flow to P13381 and Chunjiang063 were zero. And the foreignBtgene would flowed more or less to the HEXI22-2, TIANXIANG, MINGHUI63 and P1157, the mean value of frequency was no more than 0.88 % and dropped gradually with the distance increasing until it were zero at sampling point 7 m far away. Those useful measures, such as rational field arrangement, suitable distance for physical segregation, scientific farming planning to avoid flowering at the same time, could control effectively and prevent the foreign gene of transgenic rice flowing away, and then lower the ecological risks from foreign gene escaping. The results indicated that PCR method could detect the hybrid strains accurately, but it would take a long time and had a heavy workload. More simple and efficient methods would be explored to evaluate the flow frequency of those transgenic plants without marker gene.

Transgenic rice; Insect-resistance; Gene flow; Environmental safety; PCR detection method

1001-4829(2016)10-2269-06

10.16213/j.cnki.scjas.2016.10.003

2015-11-10

四川省財(cái)政創(chuàng)新能力提升工程項(xiàng)目(2014LWJJ-011，2016LWJJ-010，2016GYSH-032)

張富麗(1978-)，女，四川大竹人，副研究員，主要研究轉(zhuǎn)基因植物環(huán)境影響評(píng)價(jià)，*為通訊作者：牛 蓓(1974-)，女，四川成都人，副教授，生物化學(xué)與生物技術(shù)相關(guān)研究，E-mail:anne4935@qq.com。

S511

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