吳 嵐， 宋文琦， 劉 娟， 王麗紅， 李淑賢， 金哲雄， 杜娟,*

(1.佳木斯大學藥學院，黑龍江佳木斯 154007；2.哈爾濱商業(yè)大學生命科學與環(huán)境科學研究中心，黑龍江哈爾濱 150023)

?

野火球煎劑對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用的影響

吳 嵐1， 宋文琦1， 劉 娟1， 王麗紅1， 李淑賢1， 金哲雄2， 杜娟1,2*

(1.佳木斯大學藥學院，黑龍江佳木斯 154007；2.哈爾濱商業(yè)大學生命科學與環(huán)境科學研究中心，黑龍江哈爾濱 150023)

摘要[目的]研究野火球煎劑的鎮(zhèn)靜催眠作用。[方法]試驗分為空白對照(等容生理鹽水)、地西泮(0.001 g/kg)與野火球煎劑高、中、低劑量(3.12、1.56、0.78 g/kg)組，通過小鼠自主活動試驗觀察其對小鼠活動的影響，通過閾上和閾下劑量戊巴比妥鈉的睡眠試驗觀察其對小鼠入睡潛伏期和睡眠時間的協(xié)同影響和尼可剎米對小鼠的驚厥作用。[結果]與空白對照組比較，野火球煎劑高、中、低劑量組小鼠自主活動次數(shù)顯著減少，可顯著縮短小鼠睡眠潛伏期、延長小鼠睡眠時間，且野火球煎劑有抗尼可剎米致驚厥發(fā)作的作用。[結論]野火球煎劑具有鎮(zhèn)靜催眠作用和抗驚厥作用，為進一步研究野火球鎮(zhèn)靜催眠作用機制奠定基礎。

關鍵詞野火球煎劑；鎮(zhèn)靜；催眠；抗驚厥

The Sedative and Hypnotic Effects ofTrifoliumlupinasterDecoction on Mice

WU Lan1, SONG Wen-qi1, LIU Juan1, DU Juan1,2*et al (1. College of Pharmacy, Jiamusi University, Jiamusi, Heilongjiang 54007; 2. Research and Development Center of Life Sciences and Environmental Sciences, Herbin University of Commerce, Harbin, Heilongjiang 150076)

Abstract[Objective] To research the sedative and hypnotic effects ofTrifoliumlupinasterdecoction. [Method] Mice were randomly divided into five groups, which were blank control (normal saline), diazepam group (0.001 g/kg), high-, middle- and low-dosage groups (3.12, 1.56, 0.78 g/kg) ofT.lupinasterdecoction. Mice activity was studied by spontaneous activity experiment. Sleep test of pentobarbital sodium at suprali minal and subliminal doses was carried out to observe the convulsion effects of nikethamideon mice, as well as the collaborative effects on sleep latency and sleeping time of mice. [Result] Compared with blank control group, autonomic activity times of mice reduced significantly at high-, middle- and low-dosage groups ofT.lupinaster. Thus, the sleep latency of mice decreased significantly; and the sleeping time of mice prolonged.T.lupinasterdecoction had the anti-seizures effects induced by nikethamide. [Conclusion]T.lupinasterdecoction has both anticonvulsant effects and sedative hypnotic effects, which lays foundation for the further research on sedative hypnotic effects ofT.lupinaster.

Key wordsT.lupinasterdecoction; Sedation; Hypnosis; Anti-convulsion

野火球(TrifoliumlupinasterL.)別名野車軸草，是豆科車軸草屬多年生草本植物，廣泛分布于黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山西等地，始載于《中國主要植物圖說》，具有鎮(zhèn)靜安神、止咳、止血等功效。野火球是一種優(yōu)良牧草，由于花期較長、花色鮮艷，還可以作為觀賞植物和蜜源植物[1]。國外對野火球的研究很少，國內(nèi)有對其化學成分[2]、營養(yǎng)價值[3]、組織培養(yǎng)[4-5]等方面的研究，但鎮(zhèn)靜催眠方面的研究目前尚未見報道。筆者通過小鼠自主活動試驗觀察其對小鼠活動的影響，通過閾上和閾下劑量戊巴比妥鈉的睡眠試驗觀察其對小鼠入睡潛伏期和睡眠時間的協(xié)同影響作用[6]，以期為野火球的進一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)和科學數(shù)據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器。YLS-1A多功能小鼠自主活動記錄儀(濟南益延科技發(fā)展有限公司)；1 mL 一次性注射器(上海治宇醫(yī)療器械有限公司)。

1.1.2藥品。野火球煎劑(佳木斯大學藥學院制備)；地西泮注射液(天津藥業(yè)集團有限公司，批號1408271)；戊巴比妥鈉(德國merk公司，批號20140820)；尼可剎米注射液(天津藥業(yè)集團新鄭股份有限公司，批號1407091)。

1.1.3動物。清潔級昆明種雄性小鼠180只，體重18～22 g，由哈爾濱醫(yī)科大學實驗動物中心提供[動物使用許可證號為SCXK(黑)2013-001]。飼養(yǎng)溫度為(23±1)℃，12 h 人工循環(huán)光照(光照期為08：00~20：00)，自由攝食飲水。試驗前，于飼養(yǎng)環(huán)境中適應7 d。

1.2方法

1.2.1野火球煎劑的制備方法。常規(guī)方法煎煮，稱取野火球藥材200 g，加10倍于藥材的溫水，浸泡30 min后微火煎煮15 min，文火煎20 min，濾出藥渣，將藥液濃縮成100 mL，制得含生藥量為2 g/mL 野火球水煎液。

1.2.2野火球煎劑對小鼠自主活動的影響。試驗分為5 組，即空白對照(等容生理鹽水)、地西泮(0.001 g/kg)與野火球煎劑高、中、低劑量(3.12、1.56、0.78 g/kg，分別為臨床成人用量的2、1、0.5 倍)。灌胃給藥，每天1 次，連續(xù)10 d，末次給藥60 min后，測定小鼠5 min內(nèi)自主活動次數(shù)[7]。

1.2.3野火球煎劑對閾下劑量戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜、催眠作用的影響。分組與給藥同“1.2.2”方法。各組均于末次給藥60 min后，按照小鼠體重腹腔注射閾下劑量戊巴比妥鈉(45 mg/kg)，記錄60 min 內(nèi)的入睡只數(shù)、睡眠潛伏期和睡眠時間。從腹腔注射戊巴比妥鈉到翻正反射消失為睡眠潛伏期。以翻正反射消失1 min 以上者為入睡，以翻正反射消失到翻正反射恢復為睡眠時間。未入睡者睡眠潛伏期定為60 min。

1.2.4野火球煎劑對閾上劑量戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜、催眠作用的影響。分組與給藥同“1.2.2”方法。各組均于末次給藥60 min后，按照小鼠體重腹腔注射閾上劑量的戊巴比妥鈉(60 mg/kg)，按“1.2.3”方法記錄睡眠潛伏期和睡眠時間。

1.2.5抗尼可剎米致小鼠驚厥作用。分組與給藥同“1.2.2”方法。各組均于末次給藥60 min后，按照小鼠體重腹腔注射尼可剎米(0.018 g/kg)，記錄驚厥小鼠數(shù)(以小鼠出現(xiàn)跌倒并呈現(xiàn)陣攣性驚厥為指標)[8]。

2結果與分析

2.1野火球煎劑對小鼠自主活動的影響由表1可見，與空白對照組比較，野火球煎劑高、中、低劑量組小鼠5 min 內(nèi)自主活動次數(shù)顯著減少(P<0.01)。

2.2野火球煎劑對閾下劑量戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜、催眠作用的影響表2顯示，與空白對照組比較，野火球煎劑高、中、低劑量組小鼠入睡只數(shù)顯著增加，睡眠潛伏期顯著縮短，睡眠時間顯著延長(P<0.01)。

表1　野火球煎劑對小鼠自主活動的影響(n=10)

注：*、**分別表示與空白對照組比較P<0.05、P<0.01。

Note: Compared with blank control group, * and ** indicatedP<0.05 andP<0.01， respectively.

表2　野火球煎劑對閾下劑量戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜、催眠作用的影響(n=12)

注：*、**分別表示與空白對照組比較P<0.05、P<0.01。

Note: Compared with blank control group, * and ** indicatedP<0.05 andP<0.01,respectively.

表3　野火球煎劑對閾上劑量戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜、催眠作用的影響(n=12)

注：*、**分別表示與空白對照組比較P<0.05、P<0.01。

Note: Compared with blank control group, * and ** indicatedP<0.05 andP<0.01， respectively.

表4各組尼可剎米致小鼠驚厥作用的比較(n=12)

Table 4Comparison of convulsion effects of mice induced by nikethamide

組別Group劑量Doseg/kg發(fā)生驚厥只數(shù)Numberofseizuremice抗驚厥率Anti-convulsionrate∥%空白劑量組Blankcontrolgroup12100.00地西泮組Diazepamgroup0.001541.67**野火球高劑量組High-dosagegroupofT.lupinaster3.12758.33*野火球中劑量組Middle-dosagegroupofT.lupinaster1.56866.67野火球低劑量組Low-dosagegroupofT.lupinaster0.781191.67*

注：*、**分別表示與空白對照組比較P<0.05、P<0.01。

注：Compared with blank control group, * and ** indicatedP<0.05 andP<0.01， respectively.

2.3野火球煎劑對閾上劑量戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜、催眠作用的影響從表3可看出，與空白對照組比較，野火球煎劑高、中、低劑量組小鼠睡眠潛伏期縮短，睡眠時間顯著延長(P<0.01)。

2.4抗驚厥作用由表4可見，與空白組比較，地西泮組及野火球高、低劑量組可顯著降低小鼠的驚厥發(fā)生率，野火球中劑量組能降低小鼠的驚厥發(fā)生率但無明顯差異。表明野火球有一定的抗驚厥作用。

3小結

該試驗分別采用小鼠自主活動試驗及閾上、閾下劑量戊巴比妥鈉誘導小鼠睡眠試驗及尼可剎米致小鼠驚厥試驗來

評價野火球煎劑對小鼠的鎮(zhèn)靜催眠效果。結果表明，與空白對照組比較，野火球煎劑高、中、低劑量組可以明顯減少小鼠5 min內(nèi)自主活動次數(shù)；戊巴比妥鈉誘導小鼠睡眠試驗中，野火球煎劑高、中、低劑量組可顯著縮短小鼠睡眠潛伏期、延長小鼠睡眠時間；尼可剎米致小鼠驚厥試驗驗證了野火球煎劑能夠降低小鼠的驚厥發(fā)生率。由此可知，野火球煎劑具有一定的鎮(zhèn)靜催眠作用。

參考文獻

[1] 王躍東.三葉草[M].昆明：云南科技出版社，2000：94-98.

[2] 王麗艷,邢鳳蘭,高春林,等.野火球的化學成分研究[J].中草藥,2010,11(41):1776-1779.

[3] 崔日順,羅忠默,張萬哲,等.野火球草粉開發(fā)利用及調(diào)制技術[J].中國飼料,1995(17):25-27.

[4] 趙桂蘭,羅希明,劉顏芝.野火球懸浮培養(yǎng)細胞原生質(zhì)體再生植株[J].植物學報,1991,33(7): 547-551.

[5] 羅希明,謝雪菊,陳忠亮.沙打旺、紅豆草和野火球外植體一次培養(yǎng)再生植株[J].中國草地,1991(6):79,471.

[6] 劉瑾,李巖,王愛潔,等.桑椹補腦膏對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用實驗研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報,2015,17(3):17-19.

[7] 趙江麗,趙婷,張敏.半夏不同溶劑提取物鎮(zhèn)靜催眠活性比較[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2011,30(35):21627-21628.

[8] 黎同明,高潔,王桂香.烏梅水煎液鎮(zhèn)靜催眠及抗驚厥作用實驗研究[J].中醫(yī)學報,2011,26(7):818-820.

收稿日期2015-12-28

作者簡介吳嵐(1989- )，女，山東蓬萊人，碩士研究生，研究方向：中藥質(zhì)量標準。*通訊作者，副教授，碩士，碩士生導師，從事中藥質(zhì)量標準研究。

基金項目黑龍江省自然科學基金項目(D201209)；黑龍江省教育廳科研項目(12531714)；佳木斯大學研究生科技創(chuàng)新項目(LM2015-085)。

中圖分類號S 567.23+9

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2016)03-149-02