金得云潘濤董艷

云南省奶水牛同期發(fā)情人工授精技術(shù)應(yīng)用前景的展望

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目前云南省奶水牛同期發(fā)情人工授精技術(shù)應(yīng)用還處于試驗的一個探索階段，但對此項技術(shù)應(yīng)用前景的展望，它將會對云南奶水牛業(yè)可持續(xù)發(fā)展起到推波助瀾的作用，其有較高的推廣價值和廣闊的應(yīng)用前景。

云南省地域十分廣闊，畜禽資源豐富，有地方著名的檳榔江、德宏、滇東南、峨山、鹽津等水牛品種，其養(yǎng)殖歷史悠久，群體基礎(chǔ)較好，是云南發(fā)展山地牧業(yè)、打造奶產(chǎn)業(yè)的重要的畜禽遺傳品種資源基因庫,也是培育新的品種不可或缺的基礎(chǔ)素材。隨著云南高原特色農(nóng)業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略的深入推進，明確要把云南奶業(yè)建設(shè)成為云南特色農(nóng)業(yè)的支柱產(chǎn)業(yè)、中國南方鮮奶的主要供應(yīng)基地及面向東南亞的重要奶制品出口加工基地的三大發(fā)展目標，給奶水牛的養(yǎng)殖迎來了廣闊的發(fā)展空間和市場份額。尤其是水牛奶營養(yǎng)價值比較高，更是大眾消費的趨勢，一般為水分82.8，干物質(zhì)17.2，脂肪7.5，蛋白質(zhì)4.7，乳糖4.8，灰分0.8，無質(zhì)固體9.7，熱能106，當(dāng)前水牛鮮奶收購價在8元/千克以上，能產(chǎn)生顯著的養(yǎng)殖效益，倍受云南省大理、德宏等州（市）廣大奶農(nóng)的喜愛和養(yǎng)殖，發(fā)展前景和市場空間十分看好。尤其是摩拉水牛為良好的乳役兼用品種，泌乳性能好，平均產(chǎn)乳量1400～2000千克，最高日產(chǎn)量達17千克，最高單產(chǎn)達3000千克以上，乳脂率為7%，以產(chǎn)奶量高，乳脂率高而著稱。為此，云南省家畜改良工作站從2011年就開始探索奶水牛同期發(fā)情人工授精技術(shù)的試驗、應(yīng)用及推廣，以摩拉水牛為主推品種，經(jīng)批次試驗結(jié)果顯示，人工授精技術(shù)提高的要求與養(yǎng)殖經(jīng)濟效益成正相關(guān)，推廣價值和應(yīng)用前景有其非常深遠而現(xiàn)實的意義。

水牛發(fā)情特點

人工配種實踐表明，水牛受胎率低，復(fù)配率高，是水牛繁殖和飼養(yǎng)當(dāng)中最大的困擾因素。尤其對于配種員來說，面對母水牛發(fā)情癥狀不明顯，發(fā)情持續(xù)期長，適時輸精時機不好把握，復(fù)配乃至屢配不孕等等復(fù)雜情況，往往感到工作難做，壓力很大。

為了突破水牛受胎困難的瓶頸問題，云南省家畜改良工作站從2011年就致力探索了我省奶水牛同期發(fā)情人工授精技術(shù)的試驗與應(yīng)用，至今在大理州范圍內(nèi)開展了數(shù)期試驗，初步表明能夠較為顯著地提高水牛一個情期的配種受胎率，該項技術(shù)在水牛人工授精繁殖實踐當(dāng)中具有較大的推廣價值。

發(fā)情持續(xù)期

據(jù)配種試驗總結(jié)和觀察，母水牛發(fā)情征象不如奶牛和黃牛明顯，50%以上呈靜默發(fā)情，發(fā)情周期變化幅度大（范圍10～30天）平均21天左右，發(fā)情持續(xù)期較長約為22h（范圍11～49h）。印度青年摩拉水牛平均發(fā)情持續(xù)期為29h（范圍24～72h），排卵一般發(fā)生在停止發(fā)情后10h以后，且變化幅度大，而云南德宏檳榔江水牛發(fā)情持續(xù)期為2～4天。

水牛同期發(fā)情介紹

相關(guān)準備工作

①試驗牛群的組織。必須有一定量的母水牛群體，10頭以上即可；達到繁殖年齡、健康、空懷；經(jīng)過嚴格檢查，排除以下種類型的牛只個體，如先天不孕者、患生殖疾病者、重度營養(yǎng)不良者、患有習(xí)慣性流產(chǎn)者及已配種但對于是否受胎仍未確定者。

②藥品及器材。CIDR栓（黃體酮陰道緩釋劑）：澳大利亞、新西蘭或美國進口，有螺旋型栓或T型栓兩種，對每頭處理母牛埋植1枚，以專用埋植槍進行埋植；PG（前列腺素類似物）：有氯前列稀醇、氯前列醇納等產(chǎn)品，規(guī)格每支2ml，劑量0.2mg，每盒10支裝，有效期2年，國內(nèi)有幾個廠家的產(chǎn)品均可用。專用埋栓槍：購買栓劑時經(jīng)銷商往往會進行搭配贈送，亦可多買幾把，以方便于埋植點較為分散時或是需要補栓時的使用。

同期發(fā)情處理程序

第1天埋植CIDR栓；第10天肌肉注射PG，劑量為0.6mg/頭，即每頭注射3支針劑；第13天上午撤栓。

發(fā)情鑒定及輸精

第14天開始對試驗?zāi)概＿M行發(fā)情觀察和鑒定，通過外部觀察，出現(xiàn)了外陰部的腫脹、吊線、其中部分牛只相互爬跨等現(xiàn)象，即可初步鑒定為已發(fā)情，技術(shù)熟練的配種人員可以結(jié)合直腸檢查卵巢上卵泡發(fā)育的情況進行進一步的準確判斷；第15天開始輸精，上午進行直腸檢查，通過觸摸卵巢，發(fā)現(xiàn)有卵泡發(fā)育的個體即可安排進行輸精配種，或者對于發(fā)情癥狀已經(jīng)比較明顯的母牛均可直接安排進行輸精；第15天至第17天每天輸精1次，連續(xù)輸精3天，每次輸精使用1支細管凍精。

妊娠檢查。配種后觀察記錄返情情況，連續(xù)返情者視為未受胎；不再返情者，至90天時進行直腸檢查判定是否妊娠。

數(shù)據(jù)記錄。對于從母牛個體檢查選擇開始至妊娠檢查結(jié)束的整個過程，使用專門的試驗記錄表格對以上情況進行詳細記錄登記，以備進行數(shù)據(jù)收集和分析總結(jié)。

下批次試驗。在第一批次試驗完畢檢查受胎之后，間隔一段時間，待攢足一定數(shù)量的空懷牛只以后，可再重復(fù)進行下一批次的試驗，經(jīng)過上次試驗未能懷孕的牛只，符合選擇條件者仍可選入下個批次的試驗，這些牛只仍有可能在該批次受孕。

應(yīng)用成本核算。對每頭母牛的同期發(fā)情處理成本可計算為1個CIDR購買價80元；3劑PG價格12元（每盒40元，1劑4元）；成本投入計92元，這是比常規(guī)人工授精配種所增加出來的凈投入。相比于遲遲配不上所產(chǎn)生的飼養(yǎng)費用，這個新增投入并不能算昂貴，這項技術(shù)應(yīng)用起來應(yīng)該還是比較劃算的。

分析討論

試驗效果已同意大利專家的介紹相似

據(jù)2009年云南省家禽改良工作站實施引智項目，曾經(jīng)邀請意大利專家到大理、騰沖等地進行經(jīng)驗交談和授課，據(jù)專家介紹使用同期發(fā)情的方法，對同一批母牛經(jīng)過連續(xù)3次處理和配種后，能使總受胎率達到96%。據(jù)觀察和發(fā)現(xiàn)，云南省的試驗效果與意大利專家講的有點類似，當(dāng)然云南省的操作程序、使用藥品與意大利專家介紹有區(qū)別，另外也還難以組織一個批量較大的牛群，連續(xù)開展3次處理和配種，因此還無法同意大利專家試驗的數(shù)據(jù)進行全面比較。

一個情期的配種受胎率獲得了較大的提升

上述數(shù)據(jù)是一個情期的配種受胎率，如果同大面上的情況進行比較，2009～2011年，大理州水牛凍精改良受胎率分別為58.5%、55.3%、61.7%，三年平均值為58.6%，這是全年的總受胎率，可以發(fā)現(xiàn)，上面第一次在奶水牛場的試驗和第三次在巍山縣的試驗，其一個情期的受胎率比大面上全年的總受胎率還高出不少，這就是這個技術(shù)的應(yīng)用價值之所在。

對難配牛取得了較好的應(yīng)用效果

上述第3次試驗在巍山縣幸福村進行，專門設(shè)置了A組（初配）和B組（復(fù)配）進行對比，意在觀察這項技術(shù)對于難配牛的應(yīng)用效果，結(jié)果復(fù)配牛比初配牛受胎率高出7.1%，這初步說明在難配牛身上應(yīng)用效果更好；由此推測，可能外源激素的干擾對于水牛的正常排卵和受胎過程具有良好的影響和作用，甚至這種影響于復(fù)配牛而言比初配牛更具效果，這是否找到了專門對付難配牛的一種有效方法，還有待繼續(xù)試驗探索并證實，但這一發(fā)現(xiàn)還是比較喜人的。

近幾年關(guān)于奶水牛同期發(fā)情技術(shù)應(yīng)用在省內(nèi)的大理州和芒市等地開展了一系列的試驗示范，具體情況如下：

試驗頭數(shù)為512頭，其中大理209頭，受胎頭數(shù)122頭，平均受胎率為64.8%；芒市處理303頭，受胎123頭，平均受胎率40.6%。方法：大理主要采用CIDR（埋栓）+PG（注射）法，芒市分別用2種方法（埋栓法CIDR+PG和注射法GnRH+PG）；表明“CIDR+ PG”法總體上優(yōu)于“GnRH+PG”法。效果總結(jié)：上述數(shù)據(jù)均是一次配種的受胎率數(shù)據(jù)，相當(dāng)于第一情期受胎率，與常規(guī)人工授精的第一情期受胎率相比，仍然高出很多，說明該項技術(shù)具有較大的推廣應(yīng)用價值，尤其是對于難配難孕牛來說，效果更好。

下一步的研究要點

①關(guān)于處理程序和方法的進一步改進完善，現(xiàn)在云南省在試驗寧波三生藥業(yè)提供的藥品和定時輸精方法，要對幾種方法進行比較，找出最優(yōu)方案。

②關(guān)于不同季節(jié)受胎率的觀察比較，前邊的試驗已初步顯示在發(fā)情配種旺季比淡季受胎率要高，需要進一步得出結(jié)論。

③進一步試驗證實對難妊牛群的應(yīng)用效果，此前試驗的數(shù)據(jù)還較少，仍不足以闡明問題。

同期發(fā)情相關(guān)介紹

同期排卵則是同期發(fā)情的內(nèi)在表現(xiàn)和本質(zhì)，也是云南省試驗中所追求的結(jié)果—即定時輸精技術(shù)。

試驗藥品選擇

云南省家畜改良工作站計劃2016-2018年牛凍改水牛同期發(fā)情技術(shù)試驗和推廣預(yù)算說明：試驗水母牛3200頭；投入經(jīng)費50萬元，其中藥品36萬元。試驗中采用藥品介紹如下：

氯前列醇鈉（PG-CI）：①藥理作用：能使血液中孕酮濃度降低，高度溶解黃體，使發(fā)情周期恢復(fù)正常，有效促進生理性和病理性黃體形態(tài)和功能的消退，從而改變家畜的生殖生理功能和治療黃體性疾病。可興奮妊娠子宮，非妊娠子宮，對子宮頸肌肉有舒張作用，可改變子宮及輸卵管的張力，有利于精子和卵子結(jié)合。②適應(yīng)癥：一是治療持久黃體，黃體囊腫不發(fā)情；二是同期發(fā)情，發(fā)情調(diào)控；三是誘導(dǎo)分娩；四是母畜產(chǎn)后護理，產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎防治，促進卵巢，子宮機能恢復(fù)。

GnRH（生源）：①主要成分：戈那瑞林；②藥理作用：生源能引起血漿LH（促黃體素）的明顯升高和FSH（促卵泡素）輕度升高，促使雌性動物卵巢的卵細胞成熟排卵或雄性動物的精巢發(fā)育及精子形成；③適應(yīng)癥：治療牛的卵巢機能靜止，誘導(dǎo)發(fā)情和定時輸精。

喜達：①功能主治：置入陰道后。緩慢釋放出的黃體酮經(jīng)陰道粘膜進入體內(nèi)，使血漿中黃體酮濃度保持在正常的有效濃度，與內(nèi)源性黃體酮起一樣的作用，反饋抑制垂體促性腺激素和下丘腦促性腺激素釋放激素的分泌，從而抑制發(fā)情和排卵，人為地延長黃體期。一旦取出喜達，黃體酮的作用消失，動物的垂體開始分泌促性腺激素，促進卵泡的生成和動物的發(fā)情。本品可與雌激素，生源，氯前列醇鈉配合使用；②主要用于控制青年育成母牛和經(jīng)產(chǎn)母牛的發(fā)情周期，適用于牛的同期發(fā)情可胚胎移植，以及治療產(chǎn)后不發(fā)情。

誘導(dǎo)黃體溶解

①在對母牛進行直腸檢查后，只對卵巢上有黃體的母牛注射氯前列醇鈉（PG）0.6毫克。通常注射后3～5d出現(xiàn)發(fā)情和排卵，此時可根據(jù)需要進行人工授精或留作胚胎移植使用。

②使用促性腺激素釋放激素（GnRH），來重新設(shè)計卵泡發(fā)育波的程序，使一個優(yōu)勢卵泡出現(xiàn)的可能性達到最大。

③在實踐中獲得較好的效果。據(jù)廣西奶水牛研究所試驗報道，試驗結(jié)果是在水牛發(fā)情旺季試驗，試驗水牛335頭，孕檢265頭懷孕，受胎率是79.1%；在發(fā)情淡季試驗，試驗水牛265頭，孕檢88頭懷孕，受胎率33.1%。

目前，云南省奶水牛同期發(fā)情人工授精技術(shù)應(yīng)用還處于試驗的一個探索階段，現(xiàn)報道的相關(guān)試驗數(shù)據(jù)還有待證實，技術(shù)上還不夠成熟，但對此項技術(shù)推廣前景的展望，有其較高的推廣價值和廣闊的應(yīng)用前景。

（作者單位：1.寧洱縣德安鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心；2.勐先鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心；3.寧洱縣動物疫病預(yù)防控制中心）