何淑貞，蒲育棟，曹金如，陳美玲，蘇煥厚，鄧漢釗，莫麗芳

(東莞市第三人民醫(yī)院產科暨產前診斷中心，廣東 東莞 523326)

217對不良孕產史夫婦細胞遺傳學分析

何淑貞，蒲育棟，曹金如，陳美玲，蘇煥厚，鄧漢釗，莫麗芳

(東莞市第三人民醫(yī)院產科暨產前診斷中心，廣東 東莞 523326)

目的 探討不良孕產史與外周血染色體核型之間的關系，為遺傳咨詢提供依據(jù)。方法 采集2013年1月至2015年11月來我院就診的217對不良孕產史患者的外周血，分別進行外周血淋巴細胞培養(yǎng)、制做玻片和G顯帶后核型分析。結果 217對不良孕產史夫婦中共發(fā)現(xiàn)染色體異常的核型9例，異常染色體核型檢出率為2.07%，多態(tài)性核型55例，檢出率為12.67%。結論 染色體異常是造成患者發(fā)生不良孕產史的主要原因之一，因此應對存在不良孕產史的夫婦常規(guī)開展細胞遺傳學檢查及適時的遺傳咨詢。

核型分析；不良孕產史；多態(tài)性

優(yōu)生遺傳咨詢門診主要對象是具有不良孕產史的患者，咨詢的主要原因包括自然流產、死胎、死產和胎兒發(fā)育畸形等。造成上述現(xiàn)象的原因很多，除了夫婦雙方受到外界環(huán)境因素的影響及感染因素、孕婦自身的解剖結構異常等因素外，染色體異常是一個主要的原因。為了更好的對不良孕產史與染色體核型異常之間的關系進行分析，筆者對217對不良孕產史夫婦的染色體核型分析結果進行了系統(tǒng)的總結，以便為進一步做好患者的遺傳咨詢，探討不良孕產史與染色體核型異常的相關性提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年1月至2015年11月來我院產前診斷中心和生殖中心進行遺傳咨詢及臨床相關檢查的夫婦217對，其不良孕產史涉及自然流產、死胎、生育先天缺陷兒等，經婦科和男科常規(guī)檢查排除解剖性結構異常?；颊吣挲g20～45歲，平均(30.08±4.68)歲。

1.2 染色體核型分析 無菌條件下采用肝素鈉抗凝管分別抽取夫婦雙方靜脈血3～5 mL，然后用兩個不同廠家的外周血淋巴細胞培養(yǎng)液(廣州拜迪和達暉生物有限公司)進行淋巴細胞培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)70 h后加入20 μg/mL秋水仙素50 μL繼續(xù)培養(yǎng)1.5～2 h，常規(guī)收獲并制片、G顯帶進行處理。顯微鏡下計數(shù)20個核型，經國聯(lián)在線染色體核型分析系統(tǒng)詳細分析3～5個核型。嵌合體則需要加倍計數(shù)核型。按照《人類細胞學國際命名體制(ISCN2013)》的相關規(guī)范對核型結果進行命名。

1.3 數(shù)據(jù)分析 所有數(shù)據(jù)錄入EXCEL表格，數(shù)據(jù)采用頻數(shù)和率表示。

2 結果

2.1 異常核型分析 217對不良孕產史夫婦當中共檢出9例染色體異常的核型，異常染色體核型檢出率為2.07%。其中包括4例羅伯遜易位，4例平衡易位，1例倒位。具體核型描述見表1。

2.2 多態(tài)性分析 217對不良孕產史夫婦中共檢出55例多態(tài)性核型，檢出率為12.67%。其中次縊痕增長10例，D/G組隨體變異37例，9號染色體倒位7例，Y染色體增大1例。具體核型描述見表2。

表1 異常核型分布情況

表2 多態(tài)性核型分布情況

3 討 論

本研究結果顯示，在217對具有不良孕產史的夫婦當中，異常染色體核型檢出率為2.07%，高于余元勛等[1]報道的我國一般人群異常染色體核型0.5%～1%的檢出率。

本次研究發(fā)現(xiàn)，染色體易位的檢出率為1.84%，其中平衡易位和羅伯遜易位各為4例，且不良孕產史均表現(xiàn)為配偶自然流產或復發(fā)性流產。易位主要包括平衡易位和羅伯遜易位。平衡易位理論上沒有遺傳物質的增減，只是引起片段的位置發(fā)生改變，由于易位染色體不能與同源染色體進行正常配對，從而形成不平衡的配子，產生不平衡配子的概率(16/18)遠遠大于產生正常(1/18)的配子和平衡易位(1/18)的配子的概率，從而在受精后形成三體性或單體性的合子而造成流產[2]。羅伯遜易位是指由兩條近端染色體(D/D、D/G、G/G)通過著絲粒融合成一條衍生的染色體，包括非同源羅伯遜易位和同源羅伯遜易位。非同源羅伯遜易位攜帶者的后代只有1/4的機會，1/4的機會是攜帶者，而成為三體型或單體型的機會則占了一半。同源羅伯遜易位攜帶者可以產生兩種類型的不平衡配子，從而造成患者不能夠生育正常的后代[3]。

染色體倒位分為臂間倒位和臂內倒位。臂間倒位攜帶者從遺傳學角度分析可以形成4種不同的配子，包括1種正常的染色體，1種倒位攜帶者，其余兩種是帶有部分重復或部分缺失的重排染色體[4-5]。從理論上講，非平衡的片段越小，胎兒存活的幾率就越大。若倒位的片段越短，則倒位兩側重復和缺失的部分越大，患者表現(xiàn)為月經期延長、流產、死胎或不孕不育的比例將會越高[6]。本研究發(fā)現(xiàn)1號染色體臂間倒位1例，臨床表現(xiàn)為復發(fā)性流產。

染色體多態(tài)性表現(xiàn)為同源染色體結構和染色體的著色強度的細小差別。通常指D/G組染色體隨體區(qū)的變異、1、9、16號染色體著絲粒和次縊痕增加或缺失等，傳統(tǒng)觀點認為上述異染色質區(qū)域不會引起表型效應也無功能。但是，目前越來越多的研究表明，染色體多態(tài)性與不良孕產史之間可能存在著一定的關聯(lián)[7-9]。

次縊痕異染色質區(qū)是容易發(fā)生斷裂的地方，次縊痕的增加或缺失可能影響細胞的減數(shù)分裂，從而形成不平衡的配子而導致流產。隨體的增大或減小可能導致染色體不分離或者發(fā)生重排的概率增加，從而在早期引起死胎或者流產等生殖異常[10]。本研究發(fā)現(xiàn)37例存在隨體柄增長，10例存在次縊痕增長，其臨床表現(xiàn)主要是自然流產、復發(fā)性流產、畸胎生育史等。

inv(9)被認為是一種多態(tài)性，它不涉及遺傳物質的丟失和產生相應的遺傳效應。但近年來也有報道認為，inv(9)在復發(fā)性流產、不育癥、出生缺陷的人群中發(fā)生率明顯的增高[11]。9號染色體pter-q12片段上存在松弛素(RLX)基因，該基因在生殖調節(jié)中發(fā)揮著重要的作用，它不僅能夠影響女性的卵泡發(fā)育和子宮內膜的分化，還對男性的精子運動和穿卵能力有一定的影響。9號染色體臂間倒位，使其發(fā)生位置效應導致攜帶者RLX作用減弱從而引起不孕不育。本研究發(fā)現(xiàn)inv(9)患者7例，占總受檢人群的1.61%，略高于羅小金等[3]報道的1.20%。

近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，Y染色體異質性與不良孕產史之間有一定的相關性[3，9-10]。研究發(fā)現(xiàn)Yqh+具有一定的遺傳效應，且與流產、智力低下、無精子癥、畸形兒等有關。大Y可能是由于異染色質區(qū)域DNA序列的高度重復，導致在早期細胞分裂的時候發(fā)生異常，從而影響胚胎的正常發(fā)育而導致流產。

綜上所述，不良孕產史與染色體核型異常之間有著密切的聯(lián)系，因此對于有不良孕產史的夫婦雙方應進行外周血淋巴細胞染色體檢查，結合其他檢測指標和臨床指征進行綜合的分析，從而指導他們進一步做好遺傳咨詢及產前診斷，為預防出生缺陷，提高出生人口素質服務。

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Cytogenetic analysis of 217 couples with adverse pregnancy history.

HE Shu-zhen,PU Yu-dong,CAO Jin-ru,CHEN Mei-ling,SU Huan-hou,DENG Han-zhao,MO Li-fang.Obstetrics and Prenatal Diagnosis Center,the Third People's Hospital of Dongguan,Dongguan 523326,Guangdong,CHINA

Objective To investigate the relationship between abnormal pregnancy and peripheral blood karyotype,and provide the basis for genetic counseling.Methods The peripheral blood of 217 couples with adverse pregnancy history were collected in our hospital from January 2013 to November 2015.Then the peripheral blood lymphocytes were cultured,and karyotype analysis of G banding was carried out.Results Among 217 couples,9 cases were found with abnormal karyotype(with the detection rate of 2.07%),and 55 cases were found with polymorphic karyotype(with the detection rate of 12.67%).Conclusion Chromosomal abnormality is an important reason that leads to adverse pregnancy history.Therefore,the couples with adverse pregnancy history should receive routine prenatal cytogenetic examination and consultation to prevent birth defects,and improve the quality of the birth service.

Karyotype analysis;Adverse pregnancy history;Polymorphism

R394.2

A

1003—6350（2016）15—2542—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.15.047

2016-01-21)

莫麗芳。E-mail：478974155@qq.com