韓俊偉

（新鄉(xiāng)市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 新鄉(xiāng) 453000）

淺談華支睪吸蟲病的診斷方法

韓俊偉

（新鄉(xiāng)市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 新鄉(xiāng) 453000）

華支睪吸蟲病是重要的食源性人畜共患病，人感染后診斷困難，且可引起多種并發(fā)癥，如膽管癌等。近年來，我國華支睪吸蟲病感染率呈上升趨勢，且受威脅地區(qū)和人數(shù)在不斷增加。及時(shí)、有效的檢測診斷方法對(duì)該病的預(yù)防、控制和治療具有重要意義。

華支睪吸蟲??；免疫；診斷

華支睪吸蟲寄是重要的食源性人畜共患病，常寄生于人和犬、貓等動(dòng)物的肝膽管內(nèi)，造成肝膽的一系列疾病。近年來，國內(nèi)華支睪吸蟲病感染和流行有上升趨勢，嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全及人類身體建康，及時(shí)有效的檢測診斷對(duì)該病防控具有重要作用。傳統(tǒng)的病原學(xué)、免疫學(xué)診斷等方法都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，如何選擇快速、準(zhǔn)確的診斷方法對(duì)本病顯得十分重要。本文對(duì)華支睪吸蟲病的診斷方法進(jìn)行簡單概述。

1 病原學(xué)檢查方法

糞檢是最實(shí)用的病原學(xué)檢查方法，但由于糞渣的影響，陽性率不及血清學(xué)方法高。已用于診斷華支睪吸蟲病的糞便檢查法有直接涂片法、水洗沉淀法、倒置沉淀法、硫酸鋅漂浮法、碘化鉀漂浮法、醛醚離心沉淀法（醛醚法）、改良加藤法（定量透明法）和NaOH消化法等多種方法。十二指腸引流膽汁檢查法檢出率接近100%，但技術(shù)較復(fù)雜，發(fā)現(xiàn)蟲卵的機(jī)會(huì)多，可為臨床治療提供明確的依據(jù)。

2 臨床診斷方法

血液常規(guī)檢查和生化檢查法：華支睪吸蟲病患者可有不同程度的貧血，血紅蛋白減少，紅細(xì)胞減少，白細(xì)胞總數(shù)可增多。肝功能檢測可見血清總蛋白減少，白/球比例倒置，嚴(yán)重者血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高。

B型超聲檢查對(duì)華支睪吸蟲引起的膽道梗阻的診斷準(zhǔn)確率較高，達(dá)89.9%，可作為一種常規(guī)的臨床診斷方法。CT檢查，華支睪吸蟲膽道感染具有以下特征：肝內(nèi)膽管從肝門向周圍均勻擴(kuò)張，肝外膽管無明顯擴(kuò)張；肝內(nèi)管狀擴(kuò)張膽管直徑與長度比多數(shù)小于1∶10；被膜下囊樣擴(kuò)張小膽管以肝周邊分布為主，管徑大小相近，這些是特異性征象，對(duì)華支睪病診斷有較大價(jià)值。另外有逆行胰管造影、核磁共振胰膽管成像。

3 免疫學(xué)診斷方法

由于華支睪吸蟲蟲卵小，易被糞渣遮蓋，進(jìn)行糞檢時(shí)漏檢率較高。而大多數(shù)臨床診斷方法都只能作為診斷華支睪吸蟲病的輔助方法，因此，免疫學(xué)診斷方法的迅速發(fā)展為診斷華支睪吸蟲病提供了許多方法。間接熒光抗體試驗(yàn)具有簡便、快速的優(yōu)點(diǎn)，但其敏感性低于ELISA。膠體金標(biāo)記技術(shù)簡便、快速、敏感，已開始大量應(yīng)用于檢測試劑盒的開發(fā)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于華支睪吸蟲的檢測，普遍認(rèn)為此法有良好的效果，操作簡便，敏感性在83.1%～100%。

其他的免疫學(xué)診斷方法包括皮內(nèi)試驗(yàn)，間接血凝試驗(yàn)，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，對(duì)流免疫電泳，血清循環(huán)抗原檢測，免疫酶染色技術(shù)等方法，但這些方法應(yīng)用不多。

4 分子生物學(xué)方法

分子生物學(xué)近年來發(fā)展迅速，在多種寄生蟲的診斷中已有廣泛的應(yīng)用研究。在華支睪吸蟲的鑒別診斷方面的應(yīng)用已有報(bào)道。通過設(shè)計(jì)兩對(duì)線粒體DNA引物，用多重PCR方法能對(duì)華支睪吸蟲和麝貓后睪吸蟲進(jìn)行鑒別診斷。針對(duì)華支睪吸蟲ITS-2 rDNA設(shè)計(jì)一對(duì)特異引物，建立的特異PCR 具有高的敏感性和特異性，能檢測到1×10-13g DNA樣品，并與其他幾個(gè)后睪科的吸蟲都無交叉反應(yīng)，可用于華支睪吸蟲中間宿主的流行病學(xué)調(diào)查。另外，先對(duì)華支睪吸蟲的基因組用隨機(jī)引物進(jìn)行擴(kuò)增測序，選擇合適的部位設(shè)計(jì)兩對(duì)引物進(jìn)行巢式PCR，結(jié)果表明，該方法也具有好的敏感性和特異性，能檢測出10-5ng魚肉中華支睪吸蟲囊蚴的DNA樣品，有望在魚的流行情況調(diào)查中以及動(dòng)物的糞便檢查中得到應(yīng)用。隨著寄生蟲分子生物學(xué)研究的飛速發(fā)展，分子生物學(xué)檢測方法將是以后包括華支睪吸蟲病在內(nèi)的寄生蟲病檢測的主要發(fā)展方向之一。

（編輯：晏兵兵）

S855.9

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1006-799X(2016)24-0089-01

韓俊偉（1982-），河南開封人，獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品檢疫監(jiān)督和動(dòng)物疫病防控研究工作。