王碧玉，黃燕妮

(1.海南省農(nóng)墾三亞醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南 三亞 572000；2.海南醫(yī)學(xué)院熱帶醫(yī)學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，海南 ?？?570102）

乙肝兩對(duì)半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義

王碧玉1，黃燕妮2

(1.海南省農(nóng)墾三亞醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南 三亞 572000；2.海南醫(yī)學(xué)院熱帶醫(yī)學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，海南 ?？?570102）

目的 探討臨床聯(lián)合檢測(cè)乙肝兩對(duì)半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原（Pre-S1）對(duì)乙肝患者的診斷和預(yù)后的臨床意義。方法選取2013年1月至2015年1月海南省農(nóng)墾三亞醫(yī)院收治的乙肝患者120例作為研究對(duì)象，空腹抽取靜脈血液，采用酶聯(lián)免疫吸附法及定量法對(duì)乙肝Pre-S1、乙肝兩對(duì)半定量檢測(cè)，采用熒光定量PCR法對(duì)乙肝病毒DNA(HBV-DNA)定量檢測(cè)。結(jié)果經(jīng)檢測(cè)，乙肝Pre-S1陽性率與HBV-DNA陽性率在不同乙肝兩對(duì)半的模式下比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；在55例HBeAg陽性患者中，乙肝pre-S1陽性檢出率為81.8% (45/55)，HBV-DNA陽性檢出率為72.7%(40/55)，兩者陽性檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論臨床選擇乙肝兩對(duì)半定量、乙肝DNA定量與乙肝Pre-S1進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，能夠更好地反映乙肝患者的疾病進(jìn)展與預(yù)后，值得臨床推廣應(yīng)用。

乙型肝炎病毒；乙肝病毒前S1抗原；HBV-DNA；診斷價(jià)值

乙型病毒性肝炎又稱乙肝，是機(jī)體被乙型肝炎病毒(HBV)感染后引起的疾病。乙型肝炎病毒主要存在于肝細(xì)胞中，會(huì)對(duì)其產(chǎn)生嚴(yán)重?fù)p害，致使肝細(xì)胞發(fā)生炎癥、壞死、纖維化等[1]。目前我國(guó)乙肝病毒攜帶率約為7.18%[2]，且有三分之一的患者表現(xiàn)為活動(dòng)性乙型肝炎或肝硬化，因此，對(duì)乙肝患者進(jìn)行早期診斷具有非常重要的意義。臨床上，乙型肝炎病毒共有3對(duì)免疫學(xué)標(biāo)記，分別為表面抗原(HBsAg)、表面抗體(HBsAb)；e抗原(HBeAg)、e抗體(HBeAb)；核心抗原(HBcAg)與核心抗體(HBcAb)。但是，核心抗原在血液檢測(cè)中通常不會(huì)被檢出，因此只有兩對(duì)半抗原抗體能夠被檢出，臨床上又稱其乙肝兩對(duì)半[3-4]。乙肝病毒復(fù)制的另一個(gè)指標(biāo)為前S1抗原，并且乙肝病毒在感染人體后機(jī)體最早進(jìn)行的免疫應(yīng)答就是針對(duì)的前S1抗原，進(jìn)而該抗原能夠起到早期診斷的作用[5]。本文旨在探討臨床聯(lián)合檢測(cè)乙肝兩對(duì)半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原對(duì)乙肝患者診斷和預(yù)后的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月至2015年1月海南省農(nóng)墾三亞醫(yī)院收治的乙肝患者120例作為研究對(duì)象，所有患者均符合全國(guó)病毒性肝炎學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合全國(guó)病毒性肝炎學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)其他原因引起的肝炎疾??；(2)合并惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病及免疫系統(tǒng)疾病者。120例乙肝患者中，男性68例，女性52例，年齡18～72歲，平均(37.9±7.5)歲。本研究已獲得我院相關(guān)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)與通過，所有受試患者均簽署了知情同意書。

1.2 方法 所有患者在入院后由醫(yī)院相關(guān)人員進(jìn)行詳細(xì)的個(gè)人基本信息及相關(guān)病史等情況的記錄，然后進(jìn)行臨床相關(guān)檢查、化驗(yàn)等，同時(shí)根據(jù)患者的實(shí)際病情給予相應(yīng)的對(duì)癥治療。所有患者在入院后的第2天清晨空腹抽取靜脈血液3 mL，于離心機(jī)中進(jìn)行離心10 min，取上清置于-20℃冰箱備用。乙肝前S1抗原與乙肝兩對(duì)半的檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法及定量法，檢測(cè)儀器為Multiskan MK3酶標(biāo)儀，儀器由美國(guó)Abbott公司生產(chǎn)，試劑盒由威海威高生物科技有限公司提供，所有操作步驟按照說明書嚴(yán)格進(jìn)行。HBV-DNA的測(cè)定采用熒光定量PCR法，檢測(cè)儀器為熒光定量PCR檢測(cè)儀，由德國(guó)Roche公司生產(chǎn)，試劑盒由深圳匹基生物工程公司提供，所有操作步驟按照說明書嚴(yán)格進(jìn)行。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) HBsAg、HBsAb及HBeAg：標(biāo)本OD值≥COV為陽性；HBeAb與HBcAb：標(biāo)本OD值＜COV為陽性[7]。HBV-DNA＞500 copies/ml為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料及率的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同乙肝兩對(duì)半模式HBV-DNA陽性率與乙肝前S1抗原陽性率的比較 經(jīng)檢測(cè)，乙肝前S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率在不同乙肝兩對(duì)半的模式下比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表1。

2.2 HBeAg與HBV-DNA、乙肝前S1抗原對(duì)乙肝患者的診斷 在55例HBeAg陽性患者中，乙肝前S1抗原陽性檢出率為81.8%，HBV-DNA陽性檢出率為72.7%，乙肝前S1抗原檢出率與HBV-DNA陽性檢出率比較無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表1 不同乙肝兩對(duì)半模式HBV-DNA陽性率與乙肝前S1抗原陽性率的比較[例（%）]

表2 HBeAg與HBV-DNA、乙肝前S1抗原對(duì)乙肝患者的診斷[例（%）]

3 討 論

在感染性疾病中乙型肝炎感染呈現(xiàn)出世界性流行，全球不同地區(qū)乙型肝炎感染的流行強(qiáng)度存在較大差異，乙型肝炎在我國(guó)具有較高的發(fā)病率，據(jù)相關(guān)報(bào)道顯示，我國(guó)目前乙肝感染率高達(dá)7%以上[8]。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，全球每年約有100萬人死于HBV感染引發(fā)的肝硬化、肝衰竭等疾病[9]。乙型肝炎病毒主要存在于肝細(xì)胞中，在肝細(xì)胞中定居復(fù)制，其中肝功能異常是乙肝患者發(fā)病時(shí)的常見表現(xiàn)，乙型肝炎的肝外損傷主要是由免疫復(fù)合物導(dǎo)致，通過使血清樣發(fā)生病變，進(jìn)而免疫復(fù)合物于血管壁及關(guān)節(jié)腔滑膜處進(jìn)行沉積，同時(shí)使補(bǔ)體得到激活[10-11]。為了延緩乙肝病毒對(duì)肝細(xì)胞的損害，因此臨床上對(duì)乙肝患者進(jìn)行早期診斷，并及時(shí)給予患者相應(yīng)的治療方案對(duì)患者預(yù)后具有非常重要的意義。

乙肝病毒主要是由環(huán)狀雙鏈DNA、DNA聚合酶、核心抗原及e抗原共同合成，其中檢測(cè)患者是否患有乙肝傳染性最為有效的指標(biāo)之一即為檢測(cè)血清中的HBV-DNA。因此，通過檢測(cè)乙型肝炎患者血清中的抗原、抗體是一種能夠達(dá)到預(yù)防該疾病受到感染的重要方式。目前臨床上診斷HBV感染的最直接，且特異性強(qiáng)、靈敏度高的指標(biāo)即為HBV-DNA的檢測(cè)，其中HBV-DNA檢測(cè)呈陽性則表明HBV復(fù)制，具有傳染性。病毒復(fù)制越厲害，傳染性越強(qiáng)，則HBV-DNA越高[12-13]。在病毒侵入肝細(xì)胞過程中，乙肝前S1蛋白起到了非常重要的作用，病毒附著于肝細(xì)胞上之后，其中最容易受到介導(dǎo)、感染以及影響的部分即為乙肝S前區(qū)S1蛋白的氨基酸(AA)21～47片段，該完好區(qū)域只要受到變異病毒的接觸就會(huì)具有傳染性[14]。機(jī)體內(nèi)含有乙肝前S1蛋白主要于Dane顆粒與管型顆粒上，在病毒感染、裝配、復(fù)制以及刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)等方面，乙肝前S1蛋白均起到非常重要的作用[15-16]。此外，在人體中，前S區(qū)的前S抗原也是最早出現(xiàn)在血清中的抗原，因此，當(dāng)血清中檢測(cè)出乙肝前S1蛋白陽性，這就表示患者的HBV已經(jīng)受到了感染，并且病毒已經(jīng)成功進(jìn)行了復(fù)制。臨床上，乙型肝炎病毒共有3對(duì)免疫學(xué)標(biāo)記，分別為表面抗原(HBsAg)、表面抗體(HBsAb)；e抗原(HBeAg)、e抗體(HBeAb)；核心抗原(HBcAg)與核心抗體(HBcAb)。但是，核心抗原在血液檢測(cè)中通常不會(huì)被檢出，因此只有兩對(duì)半抗原抗體能夠被檢出，臨床上又稱其乙肝兩對(duì)半。其中HBeAb表示乙肝病毒復(fù)制活躍，具有較強(qiáng)的傳染性，通過與其進(jìn)行密切接觸則具有較大被傳染的可能性[17]。

本研究中，在不同乙肝兩對(duì)半的模式下乙肝前S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，這就表明兩種方法都能夠準(zhǔn)確的對(duì)HBV-DNA與乙肝前S1抗原的陽性情況進(jìn)行檢測(cè)，HBV-DNA與乙肝前S1抗原都能夠?qū)BV的復(fù)制情況進(jìn)行真實(shí)反映。在55例HBeAg陽性患者中，乙肝前S1抗原陽性檢出率為81.8%，HBV-DNA陽性檢出率為72.7%，乙肝前S1抗原檢出率與HBV-DNA陽性檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，這就表明無論HBeAg陽性還是陰性，都有可能存在病毒的復(fù)制。與目前臨床報(bào)道較為一致[18]。

在本次臨床監(jiān)測(cè)中，對(duì)于乙肝患者血清中的HBV-DNA檢測(cè)采用熒光定量PCR方法，該方法的優(yōu)勢(shì)在于具有較高的特異性以及敏感性，且其檢測(cè)準(zhǔn)確性與對(duì)患者前S1抗原及兩對(duì)半進(jìn)行檢測(cè)的ELISA比較要高。在本文研究中，在不同乙肝兩對(duì)半的模式下，乙肝前S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但HBV-DNA診斷出的陽性率還是略高。然而，熒光定量PCR檢測(cè)的方法成本與技術(shù)難度都比較高，目前只能常見于我國(guó)的一些大中型醫(yī)院。我國(guó)是乙肝發(fā)生率較高的國(guó)家，很多地區(qū)醫(yī)療條件非常有限，因此，在一些條件受到限制的地區(qū)可采用ELISA方法進(jìn)行乙肝檢測(cè)，該方式操作較為簡(jiǎn)單，成本較低，且其檢測(cè)的特異性與敏感性與PCR相比差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，能夠被廣大基層醫(yī)院應(yīng)用推廣[19]。但是，對(duì)于一些有醫(yī)療條件的地區(qū)，本文認(rèn)為可結(jié)合上述幾種方法進(jìn)行共同檢測(cè)，這樣能夠有效的提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，使臨床誤診率有效降低。因此，社區(qū)相關(guān)衛(wèi)生組織應(yīng)加強(qiáng)相關(guān)知識(shí)的宣教，加強(qiáng)相關(guān)疾病的保健指導(dǎo)，從根本上改變空巢老人對(duì)保健知識(shí)的認(rèn)知，加強(qiáng)對(duì)保健知識(shí)科學(xué)性的思想認(rèn)識(shí)。

綜上所述，臨床選擇乙肝兩對(duì)半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，能夠更好地反映乙肝患者的疾病進(jìn)展與預(yù)后情況，值得臨床進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

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1003—6350（2016）07—1182—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.07.055

2015-10-28)

黃燕妮。E-mail：6163162@qq.com