葛曉衛(wèi)

（商丘市傳染病醫(yī)院檢驗科，河南 商丘 476100）

乙型肝炎病毒-DNA檢測在乙型肝炎中的診斷價值研究

葛曉衛(wèi)

（商丘市傳染病醫(yī)院檢驗科，河南 商丘 476100）

目的研究乙型肝炎病毒-DNA（HBV-DNA）檢測在乙型肝炎中的診斷價值。方法選擇商丘市傳染病醫(yī)院檢驗科2014年11月-2016年11月收治的乙型肝炎患者60例為研究對象，檢測HBV血清標志物乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎核心抗體（抗-HBc）、乙型肝炎e抗體（抗-HBe）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）分為五組，測定五組患者HBV-DNA水平及陽性率。結(jié)果依HBV血清標志物檢測結(jié)果可將研究對象分Ⅰ組18例（30.00%）、Ⅱ組26例（43.33%）、Ⅲ組8例（13.33%）、Ⅳ組6例（10.00%）、Ⅴ組2例（3.33%），Ⅱ組人數(shù)多于其余4組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；Ⅰ組患者HBV-DNA水平高于其他各組；其陽性率明顯高于其他4組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論乙型肝炎病毒-DNA檢測輔以HBV血清標志物檢測可提高乙型肝炎早期診斷的準確率和靈敏度。

乙型肝炎；HBV-DNA；診斷價值

乙型肝炎屬臨床慢性傳染性疾病的一種，我國發(fā)病率居全球首位[1]。研究表明，乙型肝炎由機體感染HBV引發(fā)，根治較為困難，而其所致的肝硬化、肝衰竭等致死率極高[2]。因此，早期診斷從而給予積極干預措施在改善乙型肝炎患者預后、減輕家庭及社會壓力中具有重要意義[3]。本研究對定量檢測60例乙型肝炎患者的血清HBV-DNA水平，旨在為乙型肝炎的診斷提供臨床依據(jù)。具體信息如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇商丘市傳染病醫(yī)院檢驗科2014年11月～2016年11月收治的乙型肝炎患者60例為研究對象，其中男36例，女24例；年齡17～76歲，平均（34.17±6.52）歲；病程3d～6年，平均（3.69±0.24）年。

1.2 方法

患者60例均于凌晨取空腹靜脈血6mL，經(jīng)離心處理后分為2管，3mL/管；采用ELISA法檢測HBV血清標志物抗-HBs、HBsAg、抗-HBc、抗-HBe、HBeAg；HBV-DNA采用Option DNA Engine型PCR擴增儀（美國MJ公司）以熒光定量法測定。相關(guān)試劑盒分別由中山生物有限公司、上海科華生物科技有限公司提供，所有操作嚴格依照試劑盒說明書進行。

1.3 評價指標

依HBV血清標志物檢測結(jié)果分為Ⅰ組（HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性）；Ⅱ組（HBsAg、抗-HBc、抗-HBe陽性）；Ⅲ組（抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe陽性）；Ⅳ組（HBsAg、抗-HBc陽性）；Ⅴ組（抗-HBs陽性），未有提及指標則為陰性。以HBV-DNA＞500copy/mL為陽性，≤500copy/mL則為陰性。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS21.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理，以例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料以百分數(shù)（%）表示，行x2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 血清標志物

依HBV血清標志物檢測結(jié)果可將研究對象分為5組，其中Ⅰ組18例（30.00%）、Ⅱ組26例（43.33%）、Ⅲ組8例（13.33%）、Ⅳ組6例（10.00%）、Ⅴ組2例（3.33%）。其中Ⅱ組人數(shù)多于其余4組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.2 HBV-DNA

Ⅰ組患者HBV-DNA水平高于其他各組；其陽性率高達100%，明顯高于其他4組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 HBV-DNA定量檢測結(jié)果

3 討 論

機體受肝炎病毒入侵后，可見肝細胞嚴重受損，目前我國HBV感染人口約為2億，對患者個人、家庭及社會均造成了嚴重的醫(yī)療衛(wèi)生負擔。研究表明，HBV早期感染患者并無典型臨床癥狀，多數(shù)患者初次就診即可見并發(fā)癥的發(fā)生，臨床治療難度大，患者預后較差[4]。

HBV-DNA無蛋白質(zhì)包裹，是HBV的遺傳信息所在，也是病毒復制、增殖的基本條件，能夠單獨完成對宿主的侵襲，侵襲完成后宿主體內(nèi)短期內(nèi)即可見完整的HBV顆粒。HBV-DNA檢測的目的主要在于對患者病毒載量進行判定，是抗病毒用藥治療效果的重要指征之一，也可用于乙型肝炎的轉(zhuǎn)歸判斷[5-6]。本研究中，通過實時熒光定量PCR對HBV-DNA進行檢測，采取了閉管方式進行擴增和檢測，是臨床基因診斷的重要手段，可一定程度上避免以往PCR的污染問題，檢測可信度更高。此外，熒光探針還可準確定量檢測HBV水平，在一定程度上增強PCR檢測的特異性，定量范圍廣；實際操作過程中定量范圍極廣，陽性梯度具有可設(shè)性。ELISA則是HBV感染臨床傳統(tǒng)檢測方法，與熒光定量PCR相比，其以人體對HBV的免疫反應(yīng)狀態(tài)為研究對象，屬于間接病毒感染檢測手段。本研究結(jié)果顯示，“小三陽（HBsAg、抗-HBc、抗-HBe陽性）”、“大三陽（HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性）”患者所占比例分別居于第一、二位，占比可達43.33%、30.00%，高于其他三組，提示目前乙型肝炎的患病率較高，但臨床檢查率不夠滿意；熒光定量PCR檢測顯示“大三陽”患者HBV-DNA平均水平為5.09×107copy/mL，陽性率為100%，明顯高于其余四組，表明HBV-DNA定量檢測可用于ELISA檢測的輔助手段，能夠較高反映HBV機體載量，從而為臨床治療及預后提供依據(jù)。

綜上所述，單一ELISA在乙型肝炎診斷中存在一定局限性，HBV-DNA定量檢測可在一定程度上改善乙型肝炎早期診斷的準確率和靈敏度，臨床干預后檢測有助于療效及預后的判斷，值得臨床推廣應(yīng)用。

[1] 鄭 徽,王富珍,張國民,等.2011-2013年全國傳染病報告信息管理系統(tǒng)中乙型肝炎病例重復報告現(xiàn)狀分析[J].中華流行病學雜志,2016,37(09):1248-1252.

[2] 李振挺,李 芹,林 恢,等.FibroScan與慢性乙型肝炎肝組織炎癥及纖維化程度的相關(guān)性研究[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2016,26(05):270-271,274.

[3] 張 旭,王 煜,馬 娟,等.5種無創(chuàng)診斷技術(shù)單獨及聯(lián)合應(yīng)用對慢性乙型肝炎肝纖維化的診斷價值比較[J].臨床肝膽病雜志,2016,32(10):1888-1893.

[4] 陳華國,莊育剛,周書琴,等.六項指標的積分：早期診斷慢性乙型肝炎引起的慢加急性肝衰竭[J].中國基層醫(yī)藥,2015,22(17):2628-2631.

[5] 李向永,尤 旭,吳元凱,等.慢性HBV感染者經(jīng)長期核苷(酸)類似物治療獲HBsAg陰轉(zhuǎn)停藥后的療效[J].中山大學學報(醫(yī)學科學版),2016,37(03):408-412.

[6] 黃 金,尹春煜,諶翠容,等.Peg-IFNα序貫聯(lián)合NUCs治療高病毒載量e抗原陽性乙型肝炎療效觀察[J].浙江臨床醫(yī)學,2016,18(10):1817-1819.

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ISSN.2095-8803.2016.12.033.02