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        車前子多糖的分離純化及其功能性質(zhì)研究

        2016-03-04 19:23:23陳天麗
        現(xiàn)代養(yǎng)生·下半月 2015年12期
        關(guān)鍵詞:分離純化車前子多糖

        陳天麗

        【摘要】本文基于車前子多糖特點(diǎn),對(duì)其分離純化及功能性質(zhì)進(jìn)行初步探究,以期為相關(guān)應(yīng)用研究提供一定的參考。

        【關(guān)鍵詞】車前子;多糖;分離純化;功能性質(zhì)

        車前子為車前科車前屬植物,藥食兩用,其主要有效成分為車前子多糖,目前國內(nèi)外對(duì)車前子多糖的提取、純化、生物活性的研究均取得了實(shí)質(zhì)性進(jìn)展,含量測定方法和制備工藝己漸趨成熟,現(xiàn)對(duì)其分離純化及其功能性質(zhì)介紹如下。

        1車前子多糖分離純化分析

        1.1資料與方法

        1.1.1資料

        實(shí)驗(yàn)所用儀器包括紫外可見分光光度計(jì)、超聲波清洗器、電子天平、冰箱、恒溫水浴鍋及高效液相色譜儀,試劑有氯化鈉、氫氧化鈉、三氯甲烷、乙醚等,均為分析純,乙醇為食用級(jí),自選車前子樣品。

        1.1.2方法

        取樣本15g,置于乙醇容器內(nèi)浸泡,過濾后入烘箱內(nèi)揮干,先制備車前子粗多糖,再配制多糖液,規(guī)格為10mg/ml,采用Sevage法(單法)和酶法-Sevage法(聯(lián)用法)獲取多糖,溶解粗多糖和兩種已脫離蛋白多糖并測定各自含量,計(jì)算蛋白質(zhì)脫除率和多糖得率,觀察多糖示差及紫外峰形變化;柱層析純化車前子多糖,并以HPGPC法測定復(fù)合物分子量。

        1.2結(jié)果與討論

        1.2.1兩種脫蛋白方法比較

        先后采用酶法和Sevage法脫蛋白,可減少脫除次數(shù),其中聯(lián)用法蛋白質(zhì)脫除率和多糖得率均高于單法,見表1。

        1.2.2柱層析純化結(jié)果及多糖分子量

        柱層析純化結(jié)果顯示,多糖吸收峰最大值位置與紫外檢測到的蛋白質(zhì)特征吸收峰基本一致,組分即為糖與蛋白的復(fù)合物,葡萄糖系列測得的保留時(shí)間和分配系數(shù)如表2,標(biāo)準(zhǔn)曲線測得多糖分子量為1898584Da。

        2車前子多糖功能性質(zhì)分析

        2.1資料與方法

        2.1.1資料

        實(shí)驗(yàn)所用儀器包括旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、冷凍干燥機(jī)、離心沉淀機(jī)、物性測試儀和程序流變儀,試劑有氯化鈉、三氯甲烷、乙醚、正丁醇等,均為分析純,乙醇為工業(yè)級(jí),自選車前子樣品。

        2.1.2方法

        制取車前子精制多糖,采用減壓干燥法、灼燒法、苯酚-硫酸法、咔唑-硫酸法和考馬斯亮藍(lán)法,分別測定多糖水分、灰分、總糖、糖醛酸和蛋白質(zhì)含量,以粗多糖溶液為樣本,觀察剪切速率、溫度、濃度、pH、水化時(shí)間、凍融及鹽對(duì)多糖溶液黏度、凝膠和熱穩(wěn)定性的影響,多糖溶液凝膠點(diǎn)和熔化點(diǎn)均從差熱曲線中獲得。

        2.2結(jié)果與討論

        2.2.1多糖初級(jí)結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分分析

        車前子粗多糖成分組成見表3。

        2.2.2多糖流變、凝膠特性及熱穩(wěn)定性分析

        多糖溶液為剪切變稀的假塑性流體,保形性較好,溶液粘度隨著溫度的升高而降低,對(duì)鹽有較好的兼容性,在pH5~10之間較為穩(wěn)定;為熱可逆行凝膠,凝膠強(qiáng)度隨著濃度的增加而增強(qiáng),pH<4及加入鹽后,凝膠強(qiáng)度會(huì)有所增大;DSC檢測發(fā)現(xiàn),多糖溶液在加熱和冷卻過程中均未見明顯相變,說明其無明顯凝固點(diǎn)和熔化點(diǎn),且熱穩(wěn)定性較好。

        3小結(jié)

        綜上所述,車前子多糖以木糖和阿拉伯糖為主,目前國內(nèi)對(duì)車前子多糖的開發(fā)和利用還局限在中醫(yī)藥領(lǐng)域,對(duì)車前子多糖功能性質(zhì)的研究還不夠深入,鑒于車前子多糖功具有高粘度、耐堿、耐鹽等諸多特性,制備工藝正在從簡單加工向深加工過渡,其在食品、醫(yī)藥等行業(yè)應(yīng)用潛力巨大,發(fā)展前景備受看好。

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