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慢性阻塞性肺疾病患者細(xì)胞凋亡因子、白三烯B4水平及臨床意義

袁洪李建中孫成英1

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科，江蘇蘇州215006)

〔關(guān)鍵詞〕血清細(xì)胞凋亡因子；白三烯B4；慢性阻塞性肺疾病

1青海省人民醫(yī)院老年病科

第一作者：袁洪(1980-)，男，在讀碩士，主治醫(yī)師，主要從事呼吸系統(tǒng)疾病研究。

慢性阻塞性肺疾病(COPD)發(fā)病率高，死亡率高，隨著病情進(jìn)展，逐漸合并肺源性心臟病，導(dǎo)致呼吸循環(huán)衰竭。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，主要由于肺泡巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞為主的炎癥細(xì)胞的增加，并釋放多種炎癥介質(zhì)(脂質(zhì)、趨化因子、細(xì)胞因子和生長因子)互相作用。本研究通過對COPD急性加重期和穩(wěn)定期、正常對照組血清中可溶性細(xì)胞凋亡因子(Fas/APO-1)、白三烯(LT)B4的測定，探討其在COPD發(fā)生、發(fā)展中的意義。

1對象與方法

1.1一般資料2012年11月至2013年3月青海省人民醫(yī)院老年科住院病人，平均海拔3 000 m。COPD急性加重期組：男25例,女17例,平均年齡(65±7)歲,均伴有呼吸衰竭、咳嗽、咳痰及氣喘加重。穩(wěn)定期組：為經(jīng)治療后病情穩(wěn)定的患者，男22例,女18例,平均年齡(63±5)歲,診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合2007年中華醫(yī)學(xué)會制定的“慢性阻塞性肺疾病診治指南”〔1〕，排除導(dǎo)致氣流受限的其他呼吸系統(tǒng)疾病,并排除較嚴(yán)重心腦血管疾病、較嚴(yán)重的消化系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤、腎病、糖尿病等內(nèi)分泌代謝疾病及重大手術(shù)和結(jié)締組織病，無其他系統(tǒng)感染性疾病。正常對照組,男23名,女22名,平均年齡(55±6)歲,均為體格檢查健康正常者，經(jīng)詢問病史及X線檢查未患過重大疾病，在近1個月內(nèi)未患過任何呼吸系統(tǒng)疾病。三組年齡、性別無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法均于空腹采取靜脈血5 ml，離心(3 000 r/min)10 min，取血清，-70℃低溫冰箱冷凍保存。均采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)測定人血清Fas/APO-1及人LTB4水平。人Fas/APO-1，人LTB4,試劑盒由上海雅吉生物科技有限公司提供。臺式高速離心機(jī)(上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司)，ALisei(意大利產(chǎn))全自動酶聯(lián)免疫分析儀。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS19.0軟件行t檢驗及直線相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1三組血清Fas/APO-1、LTB4濃度比較COPD急性加重期組和穩(wěn)定期組Fas/APO-1(t=25.394,P<0.01；t=15.154,P<0.05)、LTB4濃度(t=30.279,P<0.01;t=17.867,P<0.05)明顯高于正常對照組，COPD急性加重期組Fas/APO-1(t=6.139,P<0.05)、LTB4濃度(t=9.043,P<0.05)高于穩(wěn)定期組，見表1。

表1　3組Fas/APO-1、LTB4濃度比較

與正常對照組比較：1)P<0.01；2)P<0.05；與穩(wěn)定期組比較：3)P<0.05

2.2COPD血清Fas/APO-1水平與LTB4水平相關(guān)性分析COPD急性加重期組與穩(wěn)定期組血清Fas/APO-1水平與LTB4水平呈明顯正相關(guān)(r=0.973；P=0.001)。

3討論

LTB4是目前已知最強(qiáng)的細(xì)胞趨化劑,吸引中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,使其在炎癥區(qū)域聚集和激活。而中性粒細(xì)胞的聚集和激活,有利于清除微生物和其他有害物質(zhì),同時產(chǎn)生更多的LTB4,引起更多的細(xì)胞游走,從而導(dǎo)致多種炎性疾病的病理表現(xiàn)。楊晶等〔2〕對30例COPD患者急性期及緩解期痰液中LTB4含量進(jìn)行對比發(fā)現(xiàn)有明顯差異，而緩解期痰液中LTB4含量與健康組對照則無顯著性差異。陳金亮等〔3〕通過收集20例COPD患者急性發(fā)作期和緩解期及同期20例健康體檢者(健康對照組)的呼出氣冷凝液(EBC)，檢測EBC中LTB4，得出結(jié)果COPD患者急性發(fā)作期和緩解期LTB4值均顯著高于健康對照組，而緩解期LTB4值顯著低于急性發(fā)作期。LTB4在COPD 患者的支氣管肺泡灌洗液(BALF)、痰、血清和肺組織中均有一定程度的升高,認(rèn)為LTB4 參與了中性粒細(xì)胞在氣道內(nèi)的募集和活化,參與了COPD的炎癥過程〔4〕,并與COPD的嚴(yán)重程度分級呈正相關(guān)〔5〕。

細(xì)胞凋亡因子(Fas)是屬于腫瘤壞死因子(TNF)家族的跨膜糖蛋白,當(dāng)Fas與相應(yīng)的抗體或自然配體(FasL)以三聚體的形式結(jié)合后,可誘導(dǎo)快速的細(xì)胞凋亡。也有報道，吸煙、慢性缺氧時可影響機(jī)體某些介質(zhì)及基因表達(dá)，促進(jìn)肺實質(zhì)細(xì)胞的凋亡〔6〕，同時機(jī)體氧化劑和抗氧化劑失調(diào)也與細(xì)胞凋亡相關(guān)，提示細(xì)胞凋亡的增加可能也是COPD急性加重的原因之一〔7〕。Barnes等〔8〕報道，重癥COPD患者血漿中Fas/APO-1水平成倍增長，其可導(dǎo)致全血及肺內(nèi)炎性細(xì)胞凋亡的異常。

高原有獨(dú)特的氣候特點(diǎn)，主要是大氣壓和氧分壓低、寒冷、干燥、紫外線輻射強(qiáng)等，居住在高原的人，機(jī)體必然會發(fā)生一系列變化來適應(yīng)這一低氧環(huán)境。目前高原地區(qū)COPD發(fā)病率較高，動物實驗表明〔9〕，不同海拔高度肺臟組織出現(xiàn)支氣管黏膜上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、肺間質(zhì)改變。對于高原地區(qū)COPD的研究，尚需深入認(rèn)識該病的病因和發(fā)病機(jī)制。本研究結(jié)果表明Fas/APO-1、LTB4參與了COPD的慢性炎癥過程，而急性加重期水平明顯升高，可作為監(jiān)測COPD病情變化的參考指標(biāo)。

4參考文獻(xiàn)

1中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007修訂版)〔J〕.中華結(jié)核和呼吸雜志,2007;30(1):8-17.

2楊晶，張愛麗．慢性阻塞性肺疾病患者血清及痰液白介素-8、白細(xì)胞三烯B4的臨床意義〔J〕.中國綜合臨床，2008;24(6)：582-4．

3陳金亮，陳建榮，陶一江，等．慢性阻塞性肺疾病患者呼出氣冷凝液中白細(xì)胞三烯B4和腫瘤壞死因子-α的檢測及其臨床意義〔J〕.中國危重病急救醫(yī)學(xué)，2008;20(6)：357-60．

4Beeh KM,Kornmann O,Buhl R,etal.Neutrophil chemotactiic activity of sputum from patients with COPD:role of interleukin 8 and leukotriene B4〔J〕.Chest,2003;123(3):983-6.

5Hacievliyagil SS,Gunen H,Mutlu LC,etal.Association between cytokines in induced sputum and severity of chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Respir Med,2006;100(5):846-54.

6Aoshiba K,Yasui S,Nagai A.Apoptosis of alveolar macrophages by cigarette smoke〔J〕.Chest,2000;117:320-3.

7Yasuda N,Gotoh K,Minatoguchi S,etal.An increase of soluble Fas,an inhibitor of apoptosis,associated with progression of COPD〔J〕.Respir Med,1998;92(8):993-9.

8Barnes PJ,Chowdhury B,Kharitonov SA,etal.Pulmonary biomarkers in chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Am J Respir Crit Care Med,2006;174(1):6-14.

9張彥博,汪源,劉學(xué)良,等.人與高原〔M〕.青海：青海人民出版社，1996：123-6.

〔2014-06-06修回〕

(編輯馮超)

通訊作者：李建中(1961-)，男，碩士，碩士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，副教授，主要從事老年性疾病研究。

〔中圖分類號〕R563.2

〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)04-0978-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.04.103