韓瑩 程欣

痤瘡患者外周血淋巴細胞亞群的研究

韓瑩 程欣

目的探討?zhàn)畀徎颊叩拿庖吖δ茏兓７椒☉?yīng)用流式細胞儀分析檢測80例痤瘡患者(痤瘡組)外周血中的淋巴細胞亞群,并與80例正常人(正常組)進行比較。結(jié)果與正常組相比,痤瘡組CD3+ T細胞升高,CD3+CD4+ T細胞降低,CD3+CD8+ T細胞升高,CD3-CD19+細胞降低,CD3-CD16+56+ NK細胞降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論免疫功能的紊亂是痤瘡患者發(fā)病的一個重要機制,在痤瘡的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起到重要的作用。

痤瘡；淋巴細胞亞群；流式細胞分析法

痤瘡是一種發(fā)生于毛囊皮脂腺單位的慢性炎癥性皮膚病,主要好發(fā)于青少年,以好發(fā)于面部的粉刺、丘疹、膿皰、結(jié)節(jié)等多形性皮損為臨床特點。痤瘡病因錯綜復(fù)雜,它的發(fā)病主要與內(nèi)分泌因素、毛囊皮脂腺導(dǎo)管角化過度、微生物的感染、炎癥和人體免疫功能有關(guān)。為了進一步探討?zhàn)畀彽陌l(fā)病與機體的免疫功能的關(guān)系,作者對80例痤瘡患者的淋巴細胞亞群的狀態(tài)進行觀察,現(xiàn)分析報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 80例痤瘡患者(痤瘡組)均系2014年8月～2015年8月本院皮膚科病例,其中男32例,女48例,年齡16～48歲,平均年齡(28.75±10.00)歲。所有患者均無其他免疫系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)疾病。檢測前1個月內(nèi)未接受過任何免疫治療。80例本院健康體檢者作為正常組,其中男42例,女38例,年齡22～50歲,平均年齡(31.00±14.00)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 主要試劑及儀器 試劑：美國Becton-Dickinson(BD)公司生產(chǎn)的Simultest IMK Lymphocytes Kit檢測試劑盒,其組 成 Isotype Control(MouseIgG1/IgG2a)；CD3-FITC/CD19-PE；CD3-FITC/CD4-PE；CD3-FITC/CD8-PE；CD3-FITC/ CD16+CD56-PE；FACS Lysing Solution紅細胞裂解液。流式細胞儀由美國Becton-Dickinson(BD)公司生產(chǎn),型號為FACSCalibur型。

1.3 方法 流式細胞分析法：抽取靜脈血2ml,用20 IU/ml EDTA-K2抗凝,取流式上樣管加熒光抗體20 μl與0.1ml抗凝血混勻,室溫避光反應(yīng)20min,加10%溶血素混勻,室溫避光反應(yīng)10min,待管內(nèi)液體透亮,然后1500 r/min離心5min,棄上清,然后加入1ml PBS混勻,1500 r/min離心5min,棄上清,然后加入0.5ml PBS混勻,制成單細胞懸液標本,通過流式細胞儀對待測細胞進行檢測分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

與正常組比較痤瘡組CD3+ T細胞降低,CD3+CD4+ T細胞降低,CD3+CD8+ T細胞升高,CD3-CD19+細胞降低,CD3-CD16+56+ NK細胞降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 痤瘡組與正常組淋巴細胞亞群檢測結(jié)果(±s)

表1 痤瘡組與正常組淋巴細胞亞群檢測結(jié)果(±s)

注：兩組比較,P＜0.05

組別 例數(shù) CD3+(%) CD3+CD4+(%) CD3+CD8+(%) CD3-CD19+(%) CD3-CD16+56+(%) CD4+/CD8+痤瘡組 80 66.43±7.15 33.82±5.80 30.42±6.75 11.44±4.25 17.01±6.91 1.17±0.35正常組 80 69.28±3.46 38.72±3.83 25.30±3.19 12.74±3.78 14.26±5.49 1.54±0.17t3.21 6.31 6.13 2.03 2.79 8.51P0.001 0.000 0.000 0.044 0.006 0.000

3 討論

痤瘡的病因和發(fā)病機制復(fù)雜,有研究表明,在痤瘡的炎癥發(fā)展過程中,細胞免疫和體液免疫均可能參與痤瘡的炎癥發(fā)展過程中的免疫應(yīng)答,并以其中之一作為主導(dǎo)地位［1,2］。本研究中痤瘡組與正常組相比較,痤瘡患者T細胞、B細胞功能均發(fā)生不同情況的異常,與上述文獻相符。免疫組化染色可見［3］,痤瘡患者皮損周圍浸潤大量的CD4+ T細胞,且為皮膚歸巢型,推測可能是這些細胞遷移所致。還有研究顯示［4］,痤瘡患者皮損處毛囊皮脂腺周圍浸潤的淋巴細胞包括T淋巴細胞和B淋巴細胞,T淋巴細胞占絕大多數(shù),并且以CD4+細胞為主,說明痤瘡的炎癥過程是細胞免疫及體液免疫共同參與的慢性過程,細胞免疫占主要地位,導(dǎo)致外周血CD4+細胞、CD19+ B細胞均下降,且CD4+ T細胞下降更為明顯。但本研究還顯示了CD8+ T細胞升高,可能抑制了細胞毒性T細胞殺傷功能,使機體處于免疫抑制狀態(tài),進而使機體逃避免疫監(jiān)視。CD4+/CD8+比值體現(xiàn)T淋巴細胞各亞群之間相互制約,相互協(xié)助,處于動態(tài)平衡,CD4+/CD8+比值降低進一步反映T淋巴細胞的功能紊亂狀態(tài)。

綜上所述,在痤瘡的發(fā)生、發(fā)展過程中免疫起到了重要的作用,認為其免疫功能、免疫調(diào)節(jié)可能受到一定影響,致人體免疫失調(diào),可能是痤瘡反復(fù)發(fā)作的一個重要的內(nèi)因。

［1］李佳妍.痤瘡發(fā)病機制中免疫應(yīng)答研究進展.醫(yī)學(xué)綜述,2008,14(4):1124-1126.

［2］Popovic S,Urbán E,Lukic M,et al.Peptides with antimicrobial and anti-inflammatory activities that have therapeutic potential for treatment of acne vulgaris.Peptibody,2012,34(2):275-282.

［3］Jeremy AH,Holland DB,Roberts SG,et al.Inflammatory events are involved in acne lesion initiation.J Invest Dermatol,2003,121(1):20-27.

［4］羅予,孟林敏,趙國新,等.痤瘡丙酸桿菌對小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用.河南醫(yī)學(xué)研究,2004,13(3):221-222.

Research of peripheral blood lymphocyte subpopulation in patients with acne

HAN Ying,CHENG Xin.Department of Dermatology,Shenyang City the Seventh People’s Hospital,Shenyang 110003,China

ObjectiveTo investigate changes of immunologic function in patients with acne.MethodsFlow cytometric analysis was applied to detect peripheral blood lymphocyte subpopulation in 80 patients with acne (acne group),and the result was compared with that of 80 healthy people (healthy group).ResultsComparing with healthy group,acne group had increased CD3+ T cell,CD3+CD8+ T cell,and decreased CD3+CD4+ T cell,CD3-CD19+ cell,and CD3-CD16+56+ NK cell.The difference had statistical significance (P＜0.05).ConclusionAs a key pathogenesis of acne,immune dysfunction plays an important role in occurrence and development of acne.

Acne; Lymphocyte subpopulation; Flow cytometric analysis

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.01.013

2015-10-09］

110003 遼寧省沈陽市第七人民醫(yī)院皮膚科