周洪經(jīng)，馮冉冉，張麗霞，張立

?

191株血培養(yǎng)病原菌分布及其耐藥性分析

周洪經(jīng)，馮冉冉，張麗霞，張立

[摘要]目的：了解血培養(yǎng)標(biāo)本中常見病原菌的分布及其耐藥情況，為臨床合理使用抗生素提供科學(xué)依據(jù)。方法：采用法國生物梅里埃公司BACT/ALERT 3D全自動血液培養(yǎng)儀培養(yǎng)，VITEK 2 Compact全自動細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)對培養(yǎng)陽性標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌鑒定以及藥敏實驗，藥敏結(jié)果采用CLSI 2012年標(biāo)準(zhǔn)判斷。結(jié)果：2347例血培養(yǎng)標(biāo)本中分離病原菌191株，陽性率為8.14%。革蘭陽性球菌共78例，占40.84%，革蘭陰性桿菌106例，占55.50%；真菌7例，占3.66%。數(shù)量最多的四位病原菌依次為大腸埃希菌(25.13%)、凝固酶陰性葡萄球(19.37%)、肺炎克雷伯菌(12.57%)、金黃色葡萄球菌(7.33%)。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的檢出率分別為67.57%和42.86%；產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別為60.47%和20.83%。結(jié)論：血培養(yǎng)中病原菌種類復(fù)雜，以腸桿菌和葡萄球菌為主，主要病原菌耐藥情況嚴(yán)重。

[關(guān)鍵詞]血培養(yǎng)； 病原菌； 耐藥性

隨著抗生素的廣泛應(yīng)用以及各種侵襲性操作，血行感染在醫(yī)院中的發(fā)生率越來越高，嚴(yán)重威脅病人生命。血液中病原菌培養(yǎng)是菌血癥和敗血癥診斷和治療的重要依據(jù)，因此對血培養(yǎng)中病原菌分布和耐藥性分析至關(guān)重要。本文對我院2014年1月-12月血培養(yǎng)陽性標(biāo)本的病原菌分布及耐藥性進(jìn)行分析，以期為臨床正確合理使用抗生素提供重要依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料(1)標(biāo)本來源:收集本院2014年1月-12月期間住院患者血培養(yǎng)標(biāo)本共2 347例，剔除同一患者相同部位的重復(fù)標(biāo)本，分離菌株191株。(2)質(zhì)控菌株：大腸埃希菌(ATCC25922)，肺炎克雷伯菌(ATCC700603)，銅綠假單胞菌(ATCC27853)，金黃色葡萄球菌(ATCC29213)，糞腸球菌(ATCC29212)，以上標(biāo)準(zhǔn)菌株均購自衛(wèi)生部。(3)儀器與試劑：BACT/ALERT 3D全自動血液培養(yǎng)儀(梅里埃)，VITEK 2 Compact全自動細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)(梅里埃)，比濁儀(densichek plus)，血培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)基。藥敏方法及判讀標(biāo)準(zhǔn)參考CLSI 2012年標(biāo)準(zhǔn)。

1.2方法(1)無菌采集新生兒、兒童血液1～5ml注入兒童瓶，無菌采集成人血液5～10ml注入成人需氧瓶和厭氧瓶，混勻后立即送檢。(2)將血培養(yǎng)瓶放入BACT/ALERT 3D全自動血液培養(yǎng)儀培養(yǎng)，儀器報警提示標(biāo)本報告陽性，涂片革蘭染色鏡檢細(xì)菌；接種于血瓊脂培養(yǎng)皿、巧克力培養(yǎng)皿、麥康凱培養(yǎng)皿，放置在35℃，5%CO2環(huán)境中培養(yǎng)18～24 h，如有細(xì)菌生長，按儀器要求操作做鑒定和藥敏。對于培養(yǎng)5 d報告陰性的培養(yǎng)瓶，轉(zhuǎn)種于血瓊脂培養(yǎng)皿，在35℃，5%CO2環(huán)境中培養(yǎng)48 h仍無細(xì)菌生長者，報告“無細(xì)菌生長”[1]。(3)細(xì)菌鑒定與藥敏實驗：VITEK 2 Compact全自動細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)，藥敏檢測結(jié)果MIC法，采用美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)2012年標(biāo)準(zhǔn)判讀。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用WHONET 5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)結(jié)果分析。

2結(jié)果

2.1血培養(yǎng)分離病原菌分布情況本次共檢測血培養(yǎng)標(biāo)本2347例，分離病原菌191株，陽性率為8.14%。革蘭陽性球菌共78例，占40.84%；革蘭陰性桿菌106例，占55.50%；真菌7例，占3.66%。主要病原菌依次為大腸埃希菌(25.13%)、凝固酶陰性葡萄球菌(19.37%)、肺炎克雷伯菌(12.57%)、金黃色葡萄球菌(7.33%)、場球菌(6.81%)、鮑曼不動桿菌(5.76%)。血培養(yǎng)中細(xì)菌分布見表1。

2.2主要病原菌科室分布情況血培養(yǎng)病原菌檢出率內(nèi)科最高為54.45%(104/191),其中以大腸埃希菌檢出率最高為27.88%(29/104)，其次為凝固酶陰性葡萄球菌檢出率為20.19%(21/104)；外科為26.18%(50/191),以大腸埃希菌檢出率最高為26%(13/50)；ICU為19.37%(37/191)，以鮑曼不動桿菌檢出率最高為18.92%(7/37)。血培養(yǎng)中主要病原菌科室分布，見表2。

表1　血培養(yǎng)中主要病原菌分布及構(gòu)成

表2　不同科室血培養(yǎng)中主要病原菌分布 (例)

2.3主要革蘭陽性菌對抗生素耐藥情況在革蘭陽性菌中，凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對青霉素G和紅霉素耐藥率較高，未發(fā)現(xiàn)對利奈唑胺和萬古霉素耐藥的菌株，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的檢出率分別為67.57%和42.86%。主要葡萄球菌耐藥率，見表3。

表3　主要革蘭陽性菌耐藥率(%)

2.4主要革蘭陰性桿菌對抗生素耐藥情況在106株革蘭陰性菌中，48株大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs的菌株有30株，占60.47%(30/48)；24株肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs的菌株有5株，占20.83%(5/24)。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對阿米卡星耐藥率較低，未發(fā)現(xiàn)對亞胺培南和美洛培南耐藥的菌株，見表4。

表4　主要革蘭陰性菌耐藥率(%)

3討論

本資料2 347例血培養(yǎng)標(biāo)本中分離革蘭陽性菌191株，陽性率為8.14%，這與有關(guān)報道不符[2]，可能與標(biāo)本采集時間、用藥情況、培養(yǎng)條件及不同地區(qū)之間存在差異有關(guān)。從全院血培養(yǎng)病原菌分布可見，革蘭陽性球菌共78例，占40.84%；革蘭陰性桿菌106例，占55.50%；真菌7例，占3.66%。主要病原菌依次為大腸埃希菌(25.13%)、凝固酶陰性葡萄球菌(19.37%)、肺炎克雷伯菌(12.57%)、金黃色葡萄球菌(7.33%)、腸球菌(6.81%)、鮑曼不動桿菌(5.76%)。與衛(wèi)生部細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)2011-2012年全國血流感染病原菌分布有差異[3]，原因可能與我院患者科室分布有關(guān)，多集中于內(nèi)科，占54.45%，這可能與內(nèi)科患者伴有呼吸道、心血管、結(jié)核、腫瘤等基礎(chǔ)疾病有關(guān)，另外內(nèi)科患者使用抗生素、激素、免疫抑制劑以及放療、化療、介入等治療手段，更容易引起病原菌的感染，發(fā)生菌血癥。內(nèi)科病原菌分離率最高，內(nèi)、外科均以大腸埃希菌檢出率最高，而ICU最常見的病原菌為鮑曼不動桿菌，這可能與院內(nèi)感染有關(guān)。

從血培養(yǎng)主要病原菌耐藥分析可見，革蘭陽性菌以凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌為主。凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對甲氧西林的耐藥率較高，分別為67.57%和42.86%。本研究未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、利奈唑胺葡萄球菌，因此，臨床用藥仍可選用萬古霉素、利奈唑胺，這一結(jié)果符合衛(wèi)生部細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)2011-2012年血流感染耐藥監(jiān)測結(jié)果[4]。革蘭陰性菌主要以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主，ESBLs陽性率分別為60.47%和20.83%，這一結(jié)果要高于國外的某些國家[5-6]。ESBLs是由質(zhì)粒介導(dǎo)，能不同程度的水解滅活β-內(nèi)酰胺酶類抗生素如青霉素、頭孢菌素等，并可以被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑如克拉維酸抑制的酶，這是大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥的主要機(jī)制[7]。本次藥敏分析結(jié)果中未發(fā)現(xiàn)對碳青霉烯類抗生素亞胺培南和美羅培南耐藥的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，故對于血流感染的患者，碳青霉烯類抗生素為首選藥物[8]。

血培養(yǎng)中真菌的檢出率為3.67%，以白色念珠菌為主，由真菌引起的真菌血癥常為醫(yī)源性，繼發(fā)于大量抗菌藥物的應(yīng)用、手術(shù)、靜脈留置導(dǎo)管等[9]。

綜上分析，血培養(yǎng)中病原菌種類多，且主要病原菌耐藥情況嚴(yán)重，越來越多的同一菌株攜帶多種耐藥基因現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)，提示我們要合理使用抗生素，減少耐藥已成為我國乃至全世界的共同需求！

[參考文獻(xiàn)]

[1]蔣蒸群,衛(wèi)國,倪語星.應(yīng)用全自動血培養(yǎng)儀提高血液、無菌體液培養(yǎng)陽性率[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志，1999,2(2):71-73.

[2]馬均寶，黃廣強(qiáng)，吳智剛，等.2010-2011年血液感染病原菌分布及耐藥分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014,24(12)：2893-2895.

[3]馬序竹，呂媛，鄭波.衛(wèi)生部全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)2011～2012年血流感染細(xì)菌耐藥監(jiān)測[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2012,28(12):927-932.

[4]宋娟，華川，于穎，等.血培養(yǎng)標(biāo)本8223例中病原菌菌群分布及耐藥分析[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2013,25(1)：60-66.

[5]Farrell DJ,Tumidge JD,Bell J,et al.The in vitro evaluation of tigecycline tested against pathogens isolated in eight countries in the Asia Western Pacific region(2008)[J].J Infect,2010,60:440-451.

[6]Gales AC,Castanheira M,Jones RN,et al.Antimicrobial resistance among Gram-negative bacilli isolated from Latin America: results from SENTRY Antimicrobial Surveillance Program(Latin America, 2008-2010)[J].Diagn Microbiol Infect Dis,2012,73:354-360.

[7]魏澤慶，沈萍，陳云，等.Mohnarin2011年度報告：血流感染細(xì)菌構(gòu)成及耐藥[J].中華醫(yī)院感染雜志，2012,24(22):5497-5502.

[8]Kaiser RM,Castanheira M,Jones RN,et al.Trends in Klebsiella pneumonia carbapenemase positive K.pneumonia in US hospitals: report from the 2007-2009 SENTRY Antimicrobial Surveillance Program[J].Diagn Microbiol Infect Dis,2013,76(3)：356-360.

[9]曹彬，王珊珊，郭萍，等.血培養(yǎng)標(biāo)本的病原菌構(gòu)成及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染雜志，2010,9(20)：1319-1322.

[作者單位] 天津市海河醫(yī)院 檢驗科,300350

·論著研究·

Analysis on distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in blood culture

ZHOUHong-jing,FENGRan-ran,ZHANGLi-xia,etal.

(HaiheHospitalofTianjin,Tianjin300350,China)

[Abstract]Objective：To analyze the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in blood culture, and provide a scientific basis for accurate clinical use of antibiotics.Methods：Blood was cultured by using BACT/ALERT 3D automatic blood culture instrument.Positive blood culture for bacterial was identified,drug sensitivity tests were conducted by using VITEK 2 Compact automatic,and drug susceptibility results were analyzed by using CLSI 2012 standard.Results：191 strains of pathogenic bacteria were detected from 2347 cases of blood culture.The positive rate was 8.14%, and there were 78 strains of Gram-positive bacteria (40.84%),106 strains of Gram-negative bacteria (55.50%),and 7 strains of fungi (3.66%).The top four were Escherichia coli (25.13%),coagulase-negative staphylococci(19.37%),Klebsiella pneumonia(12.57%) and Staphylococcus aureus(7.33%).The incidences of MRSCN and MRSA were 67.57% and 42.86%.The extended spectrumβ lactamases (ESBLs) positive rates of E.coli and K.pneumoniae were 60.47% and 20.83%.Conclusion：Pathogenic bacteria from blood culture are complex in variety,most of which are Enterobacteraceae and Staphylococcus spp.The situation of drug resistance to main pathogenic bacteria is serious.

[Key words]Blood culture; Pathogenic bacteria; Drug resistance

收稿日期：(2015-06-10)

[中圖分類號]R 446.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1008-7044(2016)01-0029-03

DOI：10.14126/j.cnki.1008-7044.2016.01.011

[作者簡介]周洪經(jīng)(1985-)，女，檢驗技師，研究生。