吳若實綜述，農(nóng)勝利審校（.右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科，廣西百色533000；.靖西縣人民醫(yī)院病理科，廣西百色533800）

EB病毒與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進展

吳若實1綜述，農(nóng)勝利2審校（1.右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科，廣西百色533000；2.靖西縣人民醫(yī)院病理科，廣西百色533800）

鼻咽腫瘤；皰疹病毒4型，人；病毒潛伏期；綜述

鼻咽癌在中國南方長江流域地區(qū)是高發(fā)的腫瘤，雖然鼻咽癌在西方國家比較少見，但是在我國比較多見，尤其是在廣東地區(qū)高發(fā)，又被稱為“廣東癌”，鼻咽癌的病因機制是多因素的，包括基因遺傳易感性，EB病毒（EBV）的感染和飲食因素等［1］。鼻咽癌的發(fā)生與EBV的感染有著密切關(guān)系，鼻咽癌最常見的病理類型是未分化型癌，幾乎在每一個鼻咽癌細胞中均可證實有EBV的感染。

EBV的全稱為Epstein-Barr病毒，屬于γ皰疹病毒家族的成員之一，其家族病毒還包括與艾滋病感染密切相關(guān)的卡波西肉瘤相關(guān)病毒（KSHV）等，EBV在全世界各地的人口中有著相當高的感染性，而且EBV也被證實是第1個與人類腫瘤發(fā)生有關(guān)的病毒［2］，在人們生活的周圍環(huán)境中，EBV的感染無處不在，有著相當高的潛伏性。在部分被EBV感染的人群中，EBV的長期潛伏感染會誘發(fā)機體產(chǎn)生腫瘤，90%以上的世界人口存在EBV的潛伏感染，或成為EBV攜帶者［3］。EBV主要通過唾液傳播，因此呼吸道是EBV最大的潛伏場所。

EBV具有雙重特性，既可以感染人體內(nèi)的B細胞，也可以感染體內(nèi)的上皮細胞［4］，相對于上皮細胞來說，B細胞更容易遭受EBV的感染。EBV的感染在嬰兒和兒童通常不表現(xiàn)出臨床癥狀，屬于潛伏感染，但是在成年人中，EBV的感染會誘導(dǎo)患者體內(nèi)的傳染性單核細胞增多及淋巴組織的增生，患者在臨床上會表現(xiàn)為發(fā)熱、咽喉腫痛、全身乏力等癥狀。淋巴組織的增生過程實際上是機體的免疫系統(tǒng)自我調(diào)節(jié)、自我限制的一個過程。但是在經(jīng)過初次感染EBV后，EBV會在人體內(nèi)建立終身潛伏感染，而且這種感染是幾乎不表現(xiàn)臨床癥狀的。人體的免疫系統(tǒng)可以識別出被EBV感染的細胞是否出現(xiàn)增殖。人體內(nèi)的細胞毒性T細胞（CTL）是檢測被EBV感染的B細胞是否出現(xiàn)增殖的一個關(guān)鍵細胞［5］。

1　EBV與腫瘤發(fā)生的關(guān)系

EBV與腫瘤發(fā)生的關(guān)系非常密切。第1個被發(fā)現(xiàn)與EBV感染有關(guān)的腫瘤是Burkitt淋巴瘤。這種腫瘤是發(fā)生在兒童的常見腫瘤的一種特殊類型，通常在非洲兒童中比較多見，現(xiàn)在研究認為EBV的感染參與了Burkitt淋巴瘤的發(fā)生發(fā)展過程［6］。Burkitt淋巴瘤的發(fā)生與瘧疾的感染有著密切關(guān)系，盡管瘧疾的感染是如何導(dǎo)致Burkitt淋巴瘤發(fā)生的病因機制目前尚不清楚，但是現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在瘧疾感染引起的慢性炎癥中，被EBV感染的B細胞會出現(xiàn)克隆性的增殖，同時瘧疾感染會通過一些不明機制損害人體的免疫系統(tǒng)，最終導(dǎo)致被EBV感染的B細胞轉(zhuǎn)化成Burkitt淋巴瘤細胞［7］。在被感染的B細胞內(nèi)的C-myc基因易位對Burkitt淋巴瘤的形成起著關(guān)鍵作用。在采集來源于Burkitt淋巴瘤的腫瘤細胞培養(yǎng)株中，通過電子顯微鏡可以觀察到EBV體。EBV可以誘導(dǎo)體內(nèi)已經(jīng)被感染的B細胞發(fā)生增殖，這種特性是通過觀察取自于Burkitt淋巴瘤患者的外周B細胞，這些細胞經(jīng)過濾過、篩查、培養(yǎng)而證實。在Burkitt淋巴瘤細胞株內(nèi)，很容易獲取成簇增殖的被EBV感染的B細胞［8］。EBV轉(zhuǎn)化和永生化人B細胞的能力強烈表明EBV與腫瘤形成有著密切關(guān)系。

除了Burkitt淋巴瘤外，在后來觀察到的其他惡性腫瘤中，也發(fā)現(xiàn)與EBV的感染有關(guān)，包括造血系統(tǒng)和淋巴系統(tǒng)腫瘤，例如霍奇金淋巴瘤、T細胞淋巴瘤、NK細胞淋巴瘤和上皮癌。上皮癌包括鼻咽癌和胃癌等［9］。

2　EBV與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系

2.1鼻咽癌的發(fā)生與EBV潛伏感染的關(guān)系EBV的潛伏感染與人類癌癥的發(fā)生發(fā)展有著密切關(guān)系，尤其是鼻咽癌，在潛伏感染過程中，EBV表達的一小部分基因可以逃脫宿主免疫系統(tǒng)的識別，在EBV感染細胞內(nèi)的潛伏基因的表達是后天調(diào)節(jié)的［10］，在EBV感染的B細胞和人類腫瘤細胞內(nèi)，幾種類型的潛伏基因表達譜已被識別。EBV會通過增殖感染和潛伏感染這2種形式感染細胞，絕大部分情況下病毒處于潛伏感染狀態(tài)，不進行復(fù)制，這種狀態(tài)下的EBV僅表達6種核抗原（EBNA1、EBNA2、EBNA3a、EBNA3b、EBNA3c和LP）、3種潛伏膜蛋白（LMP1、LMP2a、LMP2b）和2種小RNA（EBER1、E BER2），這些基因的表達有利于病毒逃避機體免疫監(jiān)視，從而實現(xiàn)終生潛伏感染［11-12］。

EBV在人體內(nèi)的潛伏感染有4種形式：在人體記憶B細胞內(nèi)，EBV的表達表現(xiàn)為在細胞內(nèi)只能找到由EBV編碼的小RNA（EBERs）的存在，而找不到EBV蛋白的表達。EBV核抗原1（EBNA1）僅僅存在于處于分裂狀態(tài)的記憶B細胞中［13］。另外一種潛伏特征存在于與EBV相關(guān)的B細胞淋巴瘤；第3種潛伏特征是在鼻咽癌和胃癌中才能觀察得到。最后一種潛伏特征在免疫功能不全的患者體內(nèi)表現(xiàn)為淋巴組織增生性疾病，如傳染性單核細胞增多癥。

EBV在鼻咽上皮的潛伏感染可以導(dǎo)致鼻咽上皮細胞惡性轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化過程是一個慢性過程，EBV感染正常的上皮細胞會導(dǎo)致上皮細胞發(fā)生裂解性感染，上皮細胞內(nèi)EBV潛伏感染的建立可能是鼻咽上皮癌變的早期致癌因素。目前還沒有比較好的方法來檢測發(fā)生在健康人的口咽上皮組織內(nèi)EBV的潛伏感染，但是，有一小部分被EBV感染的細胞會表達EBV潛伏基因即潛伏膜蛋白1（LMP1），這種蛋白可以在口咽上皮細胞內(nèi)存在并通過細胞培養(yǎng)檢測出［14］，而鼻咽上皮組織獨特的生物學(xué)特性可能支持EBV的潛伏感染模式。在鼻咽癌高發(fā)地區(qū)其組織學(xué)類型主要是未分化癌或者是低分化癌。在鼻咽癌中腫瘤抑制基因p16的失活和細胞周期素D1 （cyclin D1）的過度表達非常常見，這種特征在癌前病變和異常增生的鼻咽組織中可以檢測出［15］。

區(qū)別鼻咽癌與其他來源于頭頸部的鱗狀細胞癌的要點就是在頭頸部的鱗狀細胞癌中EBV感染是陰性，鼻咽癌患者由于EBV的感染，體內(nèi)會誘導(dǎo)病毒衣殼抗原（VCA）和早期抗原的產(chǎn)生，同時這2種抗原也會導(dǎo)致鼻咽癌患者體內(nèi)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，并且患者的血清IgA會升高，血漿內(nèi)抗EBV-VCA的IgA和EBV-DNA的檢測是診斷鼻咽癌患者重要的檢測工具，大量研究證實EBVDNA是良好的鼻咽癌的標志物，可以廣泛應(yīng)用于鼻咽癌的早期診斷、預(yù)后判斷、療效監(jiān)測、臨床分期等各個方面［16］。尤其是患者血漿中EBV-DNA的水平能如實地反映鼻咽癌患者腫瘤的發(fā)生發(fā)展程度，其是有效監(jiān)測鼻咽癌患者疾病進展及治療和愈后的重要指標［17］。

2.2EBV致鼻咽癌的相關(guān)分子研究

2.2.1EBV的潛伏感染機制EBV感染人體的主要途徑是通過B細胞和上皮細胞的感染侵入人體，但是EBV感染B細胞較感染上皮細胞的途徑更多見并且效果更明顯，在人體B細胞表面有一種專門與EBV結(jié)合的受體，稱作補體受體2型（CR2），CR2又稱CD21或CD3dR，這種受體與EBV結(jié)合可導(dǎo)致病毒的感染，但是CR2受體在上皮細胞表面通常不表達。EBV通過其病毒包膜蛋白gp350與B細胞表面的CR2受體結(jié)合，之后通過病毒表面的另一個病毒包膜蛋白gp42的作用進行放大，再與B細胞表面的人白細胞抗原（HLA）Ⅱ型蛋白結(jié)合，最后EBV就與B細胞的細胞膜緊密地融合在一起，被感染的B細胞進入血液循環(huán)而造成全身感染。

EBV感染人體口咽、鼻咽上皮細胞的途徑主要是通過EBV包膜蛋白與上皮細胞膜表面的細胞整合素蛋白受體αvβ6和αvβ8相互融合而導(dǎo)致病毒進入細胞發(fā)生感染［18］。此時，由于整合素的復(fù)雜作用，EBV上的包膜蛋白gp42的存在反而會阻礙了病毒進入上皮細胞，但是很巧合的是，來自于裂解感染的B細胞增殖釋放的EBV體恰好缺乏gp42蛋白，這反而有助于EBV進入上皮細胞內(nèi)而造成感染，而被感染的上皮細胞釋放的EBV體又富含gp42，反之，又有助于造成EBV感染B細胞，通過這樣一種互助感染途徑，會造成EBV在人體內(nèi)持續(xù)感染。這可能也是造成EBV在體內(nèi)持續(xù)感染的一個關(guān)鍵因素。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)氈蛋白1（NRP1）也是EBV感染上皮細胞的一個表面受體，其與EBV包膜蛋白gB的相互作用可以促進EBV感染鼻咽上皮細胞［19］。

2.2.2EBV致鼻咽癌的分子機制EBV編碼的基因有著促鼻咽上皮惡變的作用，目前已知基因有以下幾種：（1）潛伏膜蛋白1（LMP1）、潛伏膜蛋白2（LMP2）。在EBV感染的細胞內(nèi)，LMP1是有著多種致癌特征的一種跨膜蛋白，LMP1在細胞內(nèi)可以強效激活細胞內(nèi)NF-κB信號通路，此通路被認為與促進鼻咽癌的發(fā)生起著重要的作用［20］。另外，關(guān)于LPM1已清楚的一個重要功能就是它可以增強鼻咽癌細胞的侵襲性和轉(zhuǎn)移性，而鼻咽癌是一個極容易轉(zhuǎn)移的腫瘤［21］。鼻咽癌早期就可以向頸部的淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移。LPM2蛋白又分為 LPM2A和LMP2B，在上皮細胞內(nèi)，LMP2通過AKT通路的激活及GSK3的磷酸化而促進β-catenin信號通路的發(fā)生［22］，β-catenin信號通路通過基因突變的方式而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生非常常見，但是此信號通路的激活可能會調(diào)節(jié)EBV對上皮細胞生長過程的影響。LMP2A可以抑制細胞分化，并通過PI3K/Akt信號通路介導(dǎo)的ΔNp63穩(wěn)定化途徑而有利于細胞的生存［23］。同時研究也發(fā)現(xiàn)，LPM2A能夠增強上皮細胞的侵襲性和遷移特性，所以認為這一特性與鼻咽癌容易發(fā)生轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系［24］。（2）EBNA1。EBNA1在被感染的細胞中是構(gòu)成EBV基因組的主要結(jié)構(gòu)并表達在與EBV有關(guān)的癌癥中，包括鼻咽癌。EBNA1參與了EBV游離基因的復(fù)制過程，并在細胞分裂時會分離出進入到子代。EBNA1基因的失活會大大減少在被感染的B淋巴細胞系內(nèi)的EBV游離基因的復(fù)制數(shù)量，并抑制其生長［25］。有研究提示，EBNA1在鼻咽癌中過度表達并通過抑制miR-200a和miR-200b的表達可以誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，同時促進癌的轉(zhuǎn)移并加重腫瘤的惡性程度［26］。（3）EBV編碼小RNA1/2（EBV-encoded small RNA1/2，EBER1/2），包括EBER1和EBER2，其在被EBV感染的鼻咽癌和胃癌細胞中含量非常豐富，通過促進細胞的生長和調(diào)節(jié)先天免疫系統(tǒng)而促進腫瘤的形成［27］；新近的研究表明，EBER通過調(diào)節(jié)LMP1/LMP2的表達有助于EBV在細胞內(nèi)造成持續(xù)性潛伏感染［28］。

3　小結(jié)與展望

EBV在鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展中的具體機制還正在研究中，目前已知的研究認為EBV與鼻咽癌發(fā)生有關(guān)的分子標志有EBERs、EBNA1、LPM1、LPM2等，還有一些其他的基因及蛋白如BART-miRNA、BARTs、BARF1，這些促進細胞生長的基因及蛋白也正在研究中?，F(xiàn)在已知EBV的感染，宿主基因型的改變，宿主對于轉(zhuǎn)化細胞的免疫功能的缺失和鼻咽上皮黏膜的炎癥等這些因素均與鼻咽癌的發(fā)生有關(guān)。另外，EBV潛伏感染與鼻咽癌發(fā)生的關(guān)系也很密切。EBV與人類的一些腫瘤，尤其是鼻咽癌的發(fā)生的具體作用和機制有待進一步的研究。

［1］Tsao SW，Yip YL，Tsang CM，et，al.Etiological factors of nasopharyngeal carcinoma［J］.Oral Oncol，2014，50（5）：330-338.

［3］Miller G.Epstein-Barr virus：biology，pathogenesis and medical aspects［M］. New York：Raven Press，1990：1921-1958.

［4］Borza CM，Hutt-Fletcher LM.Alternate replication in B cells and epithelial cells switches tropism of Epstein-Barr virus［J］.Nat Med，2002，8（6）：594-599.

［5］Tsang CM，Tsao SW.The role of Epstein-Barr Virus infection in the pathogenesis of nasopharyngeal carcinoma［J］.Viro Sinica，2015，30（2）：107-121.

［6］Thorley-Lawson DA，Allday MJ.The curious case of the tumour virus：50 years of Burkitt′s lymphoma［J］.Nat Rev Microbiol，2008，6（12）：913-924.

［7］Moormann AM，Snider CJ，Chelimo K.The company malaria keeps：how co-infection with Epstein-Barr virus leads to endemic Burkitt lymphoma［J］. Curr Opin Infect Dis，2011，24（5）：435-441.

［8］Henle W，Diehl V，Kohn G，et al.Herpes-type virus and chromosome marker in normal leukocytes after growth with irradiated Burkitt cells［J］.Science，1967，157（3792）：1064-1065.

［9］Young LS，Rickinson AB.Epstein-Barr virus：40 years on［J］.Nat Rev Cancer，2004，4（10）：757-768.

［10］Tempera I，Lieberman PM.Epigenetic regulation of EBV persistence and oncogenesis［J］.Semin Cancer Biol，2014，26：22-29.

［11］Kutok JL，Wang F.Speuctrum of Epstein-Barr virus-associated diseases［J］. Annu Rev Pathol，2006，1：375-404.

［12］Khanna R，Burrows SR，Mossd J.Immune regulation in Epstein-Barr virusassociated diseases［J］.Microbiol Rev，1995，59（3）：387-405.

［13］Hochberg D，Middeldorp JM，Catalina M，et al.Demonstration of the Burkitt′s lymphoma Epstein-Barr virus phenotype in dividing latently infected memory cells in vivo［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2004，101（1）：239-244.

［14］Pegtel DM，Middeldorp J，Thorley-Lawson DA.Epstein-Barr virus infection in ex vivo tonsil epithelial cell cultures of asymptomatic carriers［J］. J Virol，2004，78（22）：12613-12624.

［15］Lo KW，To KF，Huang DP.Focus on nasopharyngeal carcinoma［J］.Cancer Cell，2004，5（5）：423-428.

［16］蒙以良，李曉華，覃艷春，等.鼻咽癌患者外周血EB病毒抗體及DNA檢測的研究［J］.右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2013，35（2）：201-203.

［17］To EW，Chan KC，Leung SF，et al.Rapid clearance of plasma Epstein-Barr virus DNA after surgical treatment of nasopharyngeal carcinoma［J］. Clin Cancer Res，2003，9（9）：3254-3259.

［18］Tugizov SM，Berline JW，Palefsky JM.Epstein-Barr virus infection of polarized tongue and nasopharyngeal epithelial cells［J］.Nat Med，2003，9（3）：307-314.

［19］Wang HB，Zhang H，Zhang JP，et al.Neuropilin 1 is an entry factor that promotes EBV infection of nasopharyngeal epithelial cells［J］.Nat Commun，2015，6：6240.

［20］Dawson CW，Port RJ，Young LS.The role of the EBV-encoded latent membrane proteins LMP1 and LMP2 in the pathogenesis of nasopharyngeal carcinoma（NPC）［J］.Semin Cancer Biol，2012，22（2）：144-153.

［21］Tao Q，Chan AT.Nasopharyngeal carcinoma：molecular pathogenesis and therapeutic developments［J］.Expert Rev Mol Med，2007，9（12）：1-24.

［22］Morrison JA，Raab-Traub N.Roles of the ITAM and PY motifs of Epstein-Barr virus latent membrane protein 2A in the inhibition of epithelial cell differentiation and activation of｛beta｝-catenin signaling［J］.J Virol，2005，79（4）：2375-2382.

［23］Fotheringham JA，Mazzucca S，Raab-Traub N.Epstein-Barr virus latent membrane protein-2A-induced DeltaNp63alpha expression is associated with impaired epithelial-cell differentiation［J］.Oncogene，2010，29（30）：4287-4296.

［24］Kong QL，Hu LJ，Cao JY，et al.Epstein-Barr virus-encoded LMP2A induces an epithelial-mesenchymal transition and increases the number of side population stem-like cancer cells in nasopharyngeal carcinoma［J］.PLoS Pathog，2010，6（6）：e1000940.

［25］Kennedy G，Komano J，Sugden B.Epstein-Barr virus provides a survival factor to Burkitt′s lymphomas［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2003，100（24）：14269-14274.

［26］Wang L，Tian WD，Xu X，et al.Epstein-Barr virus nuclear antigen 1（EBNA1）protein induction of epithelial-mesenchymal transition in nasopharyngeal carcinoma cells［J］.Cancer，2014，120（3）：363-372.

［27］Takada K.Role of EBER and BARF1 in nasopharyngeal carcinoma（NPC）tumorigenesis［J］.Semin Cancer Biol，2012，22（2）：162-165.

［28］Lee N，Moss WN，Yario TA，Steitz JA.EBV noncoding RNA binds nascent RNA to drive host PAX5 to viral DNA［J］.Cell，2015，160（4）：607-618.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.14.023

A

1009-5519（2016）14-2182-03

（2016-02-03）