何順福，居玉婷

（西寧野生動物園，青?！∥鲗?10000）

西寧野生動物園禽霍亂病原分離及藥敏試驗

何順福，居玉婷

（西寧野生動物園，青海西寧810000）

2012年11月份我園雉雞類飼養(yǎng)展區(qū)發(fā)生禽霍亂疫病，發(fā)病動物涉及黑鸛、斑頭雁、藍孔雀、火雞、白額雁、黑天鵝、赤麻鴨、鵜鶘、鴻雁，灰雁、鸕鶿11種動物，為及時控制病情，有效的治療發(fā)病動物，經(jīng)與青海大學(xué)動物醫(yī)學(xué)傳染病實驗室協(xié)作，采取常規(guī)的病原分離及藥敏試驗技術(shù)對我園發(fā)病動物進行禽巴氏桿菌病的微生物學(xué)診斷，經(jīng)過病原分離及藥敏試驗，篩選出了有效治療我園禽霍亂疫病的有效藥物，最短時間內(nèi)控制了病情的發(fā)展。

西寧野生動物園；禽霍亂；病原分離及藥敏試驗

1　材料與方法

1.1無菌采集發(fā)病及病死11種雉雞、禽類臟器，采取革蘭氏、美蘭染色、鏡檢，菌株的分離，純化及氧化酶實驗進行結(jié)果判定。

1.2健康小白鼠14只作為實驗動物，用純化后的野生菌接種到鮮血瓊脂斜面培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24～48h制成菌懸液，并與麥氏濁管進行比濁，選取濃度為3.0×109個/mL的菌懸液分別腹腔注射7只小白鼠，0.5mL/只。同時應(yīng)用0.22μm細菌濾器分別對上述菌懸液過濾，各取濾液腹腔注射7只小白鼠，0.5mL/只，作為對照，進行動物致病性試驗。

1.3選取22種藥敏紙片，用滅菌棉拭子蘸取動物致病性試驗中選取的濃度為3.0×109個/mL的菌懸液均勻涂布于MH平板培養(yǎng)基上（培養(yǎng)基厚度為4mm）進行藥敏試驗。判定標準參照美國臨床實驗室標準委員會（NCCLS）藥敏試驗紙片擴散法法規(guī)。

2　結(jié)果

2.1臨床癥狀發(fā)病動物精神沉郁、羽毛松亂、縮頸閉眼、頭縮在翅下、不愿走動、離群呆立，意識呆滯并伴有嚴重的神經(jīng)癥狀，出現(xiàn)原地轉(zhuǎn)圈現(xiàn)象，觸碰發(fā)病動物有很大的應(yīng)激反應(yīng)，腹瀉排黃色、灰白色或綠色的稀糞，呼吸困難，口、鼻分泌物增加，冠和肉髯變青紫色潰爛、有的肉髯腫脹有明顯的熱痛感。體溫升高到43～44℃，發(fā)病動物食欲減退甚至廢絕，同群動物食欲減退明顯，飼喂飼料大量剩余，飲水明顯增加，飲水量是平時的3～4倍，發(fā)病動物最后發(fā)生衰竭昏迷而死亡，病程短的約0.5d，病程最長的達到20d。

2.2病理剖檢結(jié)果肌胃出血、腸道尤其是十二指腸呈卡他性和出血性腸炎、腸內(nèi)容物含有血液是本病最明顯的癥狀，死亡動物心包變厚、心包內(nèi)積有多量不透明淡黃色液體，有的含纖維素絮狀液體、心外膜、心冠脂肪出血尤為明顯。肺有充血或出血點，肝臟的病變具有特征性，肝稍腫，質(zhì)變脆，呈棕色或黃棕色，肝表面散布有許多灰白色、針頭大的壞死點。

2.3病料觸片染色及鏡檢革蘭氏染色、鏡檢，可見革蘭氏陰性、兩端鈍圓、單個或成雙排列、形態(tài)均勻一致的小桿菌；美藍染色鏡檢可見大量兩極濃染的小桿菌。

2.4致病性試驗試驗發(fā)現(xiàn)試驗組7只小白鼠于24～36h全部死亡，死亡后采集實質(zhì)臟器，分別分離到了與上述一致的革蘭氏陰性小桿菌，對照組7只小白鼠72h后仍健活。

2.5藥敏試驗結(jié)果應(yīng)用22種藥敏紙片對禽霍亂病原菌進行藥物篩選，結(jié)果表明諾佛沙星、環(huán)丙沙星、磺胺、氧佛沙星四類藥物敏感。

3　討論

3.1由于我園雉雞類飼養(yǎng)展區(qū)面積較大，日常消毒做不到位，除珍禽館每周進行2～3次的日常消毒以外，其他展區(qū)因面積較大又是露天展出環(huán)境，幾乎不進行日常消毒工作，受禽霍亂疫苗的購買條件限制未進行免疫接種。冬季氣候寒冷等因素可能是導(dǎo)致該病發(fā)生的主要原因，通過本次疫情可發(fā)現(xiàn)同群動物中體質(zhì)瘦弱的易感且快速死亡，體質(zhì)較好的感染后病程較長，猛禽類動物未出現(xiàn)感染，白天未見發(fā)病動物死亡，發(fā)病動物死亡一般是在夜間溫度最低的時間段，出現(xiàn)明顯癥狀發(fā)病動物全部死亡，無一轉(zhuǎn)歸。

3.2嚴格科學(xué)的日常飼養(yǎng)管理是預(yù)防本病的主要途徑，我園鳥類展區(qū)共飼養(yǎng)展出各類動物51種500多只，分為水禽湖飼養(yǎng)展區(qū)、珍禽館飼養(yǎng)展區(qū)、猛禽飼養(yǎng)展區(qū)及百鳥苑飼養(yǎng)展區(qū)，各展區(qū)飼養(yǎng)員之間互相配合完成日常的飼養(yǎng)管理工作，每年春秋季進行禽流感及新城疫的疫苗免疫接種工作，因為禽霍亂疫苗獲取難度較大的緣故未能接種禽霍亂疫苗，發(fā)病后第一時間未讓飼養(yǎng)員采取單獨飼養(yǎng)措施，導(dǎo)致了各展區(qū)的相互交叉?zhèn)魅荆莼魜y一旦發(fā)生治療難度很大，高死亡率會造成很大的經(jīng)濟損失，因此一定要嚴格貫徹“預(yù)防為主”的原則，出現(xiàn)疫情后要做好發(fā)病動物的隔離工作，發(fā)現(xiàn)患病動物及時進行隔離，做好日常的消毒工作及疫苗接種工作，重點是免疫接種要做到100%，我園在發(fā)生禽霍亂疫情后用大型噴霧消毒工具選用強力消毒靈、聚維酮碘等消毒藥物每天對各展區(qū)進行2～3次的消毒工作，在主要出入通道口鋪灑生石灰，有效的控制了疫情的發(fā)展。

從略）

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.06.011