田苗

（遼寧省鞍山市岫巖滿族自治縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧　鞍山114300）

雞新城疫檢驗(yàn)方法的研究

田苗

（遼寧省鞍山市岫巖滿族自治縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧鞍山114300）

雞新城；疫??；檢驗(yàn)方法研究；病理檢查

雞新城疫主要是由病毒引起的通過接觸進(jìn)行傳染的傳染率很高的疫病。最常見的雞新城的疫病檢驗(yàn)方法有病理檢查、臨床表現(xiàn)檢查和RT-PCR檢測(cè)。雞新城疫的主要病理改變可以分為典型和非典型，典型的主要為全身敗血癥樣變化，其中最為嚴(yán)重的病變位于消化道和呼吸道。患有雞新城疫的雞的臨床表現(xiàn)可以分為最急性型、急性型和慢性型，不同類型的臨床表現(xiàn)也不相同。通過提高雞新城的疫病檢驗(yàn)水平，可以提高雞新城的檢出率和降低感染率。

1　流行狀況

雞新城疫雖然一年四季均可發(fā)生，但以春、秋季多發(fā)，雞舍內(nèi)較為密閉通氣不暢，氨氣濃度含量，溫度忽高忽低，當(dāng)飼養(yǎng)場(chǎng)里雞的數(shù)量較多的時(shí)候，容易感染雞新城疫。并且雞新城疫也容易發(fā)生在有過疫情的雞場(chǎng)或者是經(jīng)常從外地購(gòu)買小雞的雞場(chǎng)。在發(fā)病的雞與健康的雞接觸的過程中，雞新城疫病毒會(huì)從雞的口、皮膚、鼻等處進(jìn)行傳染，雞新城疫的傳染率和雞的死亡率都比較高。因此，研究雞新城疫的檢驗(yàn)方法對(duì)提高雞新城疫的檢出率和降低感染率至關(guān)重要。

2　病理變化

典型的雞新城疫的主要病理變化為全身敗血癥樣變化，其中最為嚴(yán)重的病變位于消化道和呼吸道。呼吸道病變最常見的部位是在雞的鼻和喉腔內(nèi)，鼻和喉腔內(nèi)的粘膜充血甚至出血，里面充滿了黏液性分泌物。雞新城疫病雞的盲腸扁桃體發(fā)炎腫大，嚴(yán)重者會(huì)出血、壞死。雞的胃底和小腸的前段即十二指腸的粘膜和肌層破壞嚴(yán)重，出血現(xiàn)象明顯。產(chǎn)蛋的老母雞病變會(huì)累及輸卵管和卵泡，其粘膜正常結(jié)構(gòu)被破壞，明顯水腫和充血，卵泡膜彈性降低，十分易破裂以致卵黃流入腹腔引起卵黃性腹膜炎。雞新城疫的病毒較少侵及肝臟和脾臟，腎臟因泌尿功能出現(xiàn)問題而發(fā)生水腫，排尿減少尿液濃縮，因此輸尿管內(nèi)積有尿酸鹽。

雞新城疫還有其他的非典型的病理改變，例如十二指腸降段出血和壞死，形成蕈傘狀的隆起，病毒侵入破壞了雞的免疫防御系統(tǒng)，從而使腸道的淋巴濾泡腫大甚至破裂，直腸粘膜破壞出血，出血的形狀為點(diǎn)狀或者是條狀。

3　臨床表現(xiàn)

患雞的臨床表現(xiàn)可以分為最急性型、急性型和慢性型，不同類型的臨床表現(xiàn)也不相同。最急性型最為嚴(yán)重，雞一般無任何征兆就突然倒地不起，常見于雞新城疫流行的前期，雛雞多發(fā)。急性型的初期病雞的精神萎靡不振，體溫升高，進(jìn)食減少飲水增多。產(chǎn)蛋母雞產(chǎn)蛋的數(shù)量減少甚至停產(chǎn)，異形蛋增多，例如畸形蛋和軟殼蛋。感染后的雞因呼吸道病變，開始出現(xiàn)咳嗽、呼吸困難等臨床表現(xiàn)，雞開始張開嘴或者是伸長(zhǎng)頸部呼吸，甚至有的會(huì)有頭頸震顫的表現(xiàn)。使患病后的雞頭部朝向地面，會(huì)有酸臭的液體從雞嘴內(nèi)流出來，并且病雞開始出現(xiàn)腹瀉，腹瀉的糞便比較稀疏，顏色為黃綠色或者是黃白色，有時(shí)排出的糞便甚至成混有綠色的蛋清樣。慢性型臨床表現(xiàn)為癱瘓雞、軟頸或者頭頸方向異常，向一側(cè)或者是后部?jī)A斜。病雞出現(xiàn)腹瀉，顏色為黃綠色或者是黃白色，有時(shí)排出的糞便甚至成混有綠色的蛋清樣。

4　RT-PCR檢測(cè)

RT-PCR檢測(cè)是通過提取感染后的雞腦部組織的RNA 即F基因，以該RNA為模板，P1和P2為擴(kuò)增引物進(jìn)行擴(kuò)增。從而觀察擴(kuò)增后的RNA是否與預(yù)期的結(jié)果相同。隨后將擴(kuò)增的F基因與PMD-18T載體相連接，從而被激活轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞，在培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，然后選取其中的陽性菌落，利用PCR進(jìn)行質(zhì)粒的分離提取，然后對(duì)提取出來的質(zhì)粒進(jìn)行檢測(cè)分析，倘若病雞的F基因轉(zhuǎn)錄出的蛋白裂解以后氨基酸的序列與強(qiáng)毒株的誤解類似，則病雞感染。

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10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.06.111