熱孜萬古麗·吾甫力
(庫爾勒市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測中心,新疆 庫爾勒 841000)
分光光度法在蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗中的應(yīng)用
熱孜萬古麗·吾甫力
(庫爾勒市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測中心,新疆 庫爾勒 841000)
分光光度法可以利用波長的吸光度、強(qiáng)度,定性、定量地分析檢測物質(zhì)。該方法常被應(yīng)用于蔬菜農(nóng)藥殘留檢測中,在特定的波長位置測定農(nóng)藥殘留物,判斷蔬菜中是否含有農(nóng)藥物質(zhì)?;诖?,本文主要探討分光光度法在蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗中的應(yīng)用。
分光光度法;蔬菜;農(nóng)藥殘留;檢驗
蔬菜種植中使用農(nóng)藥,會有一部分殘留的農(nóng)藥無法被消解,致使其殘留在蔬菜內(nèi),人們食用后可能會引起中毒現(xiàn)象。當(dāng)人體內(nèi)農(nóng)藥含量積累到一定程度后,就會引起癌癥、基因突變等,嚴(yán)重威脅著人體健康。
當(dāng)前,蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗常用的方法是分光光度法,其可以快速、準(zhǔn)確地得出檢驗結(jié)果[1]。蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗的樣品很多,蔬菜的保鮮期短,所以其在檢驗階段要注重時效性。而分光光度法有一定的靈敏性,應(yīng)用到蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗上,能夠提高農(nóng)藥殘留檢驗的準(zhǔn)確度,保障蔬菜的安全性,消除潛在的農(nóng)藥風(fēng)險。
現(xiàn)以2類典型農(nóng)藥為例,分析分光光度法的實踐應(yīng)用。
3.1 有機(jī)磷類農(nóng)藥
3.1.1 原理。可以采用馬血清、豬腦等物質(zhì),提取到乙酰膽堿酯酶的酶源,乙酰膽堿酯酶可以抑制分光光度的檢測結(jié)果。如果蔬菜中含有有機(jī)磷類農(nóng)藥,提取的乙酰膽堿酯酶會對分光光度法有明顯的抑制作用,由此檢測出其殘留量。乙酰膽堿酯酶在分光光度法中反應(yīng)靈敏,其在相同的反應(yīng)條件下,可以檢驗出不同濃度、不同類型的有機(jī)磷農(nóng)藥吸光度,明確有機(jī)磷農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的抑制率,獲取相關(guān)的曲線,即可檢查出蔬菜中殘留農(nóng)藥的濃度。
3.1.2 方法。蔬菜中殘留有機(jī)磷類農(nóng)藥時,會在一定程度上抑制乙酰膽堿酯酶的催化活性,導(dǎo)致其在酶源檢測底物中無明顯的表現(xiàn),底物基本不會在乙酰膽堿酯酶的作用下發(fā)生水解,進(jìn)而降低酶解的顯色。采用分光光度法時,設(shè)計一組對照組和試驗組,對照組直接采用含有乙酰膽堿酯酶的溶液進(jìn)行,試驗組則是蔬菜中提取的乙酰膽堿酯酶,經(jīng)過分光光度試驗后,檢驗有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留。如檢測組選擇濃度為0.01、1.00 mg/L的硫磷溶液,連續(xù)檢驗7次,得出的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.41%和0.91%。又如首先對被檢測的蔬菜噴灑一定量的農(nóng)藥并擱置12 h,蔬菜剪成1 cm2的碎片;然后放在試管內(nèi),加入丙溶劑,融合并振蕩,過濾后丙酮溶液定容至10 mL,檢驗有機(jī)磷農(nóng)藥的回收率;之后在樣本中加入2 mg/L的有機(jī)磷農(nóng)藥樣本,重復(fù)測定3次,計算平均值。有機(jī)磷類農(nóng)藥的測得量是0.019 mg/L,標(biāo)準(zhǔn)加入量是2 mg/L,回收量是1.930 mg/L,回收率是96.5%,表明分光光度法具有較高的檢驗效率。
3.2 氨基甲酸酯類農(nóng)藥
3.2.1 原理。氨基甲酸酯類農(nóng)藥,是有機(jī)磷農(nóng)藥之后發(fā)展的一類合成農(nóng)藥。應(yīng)用分光光度法時,主要圍繞酶促(乙酰膽堿酯酶原理相同)反應(yīng)展開檢驗設(shè)計。采用分光光度法檢驗蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留,檢測并計算出酶的活性,在此基礎(chǔ)上測定出氨基甲酸酯類農(nóng)藥的吸光度。
3.2.2 方法。氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢驗中,采用pH 8.0的磷酸鹽緩沖溶液,定容至10 mL,搖勻存儲到4℃的冰箱內(nèi),在4 d內(nèi)完成檢驗。氨基甲酸酯類農(nóng)藥,儲備了10 mg/L的溶液,丙酮稀釋后,檢驗溶液的濃度分別是0.001、0.005、0.01、0.05、0.1 g/L和1.0 g/L。具體應(yīng)用時,在放入氨基甲酸酯類農(nóng)藥樣品的試管內(nèi),先后加入磷酸鹽緩沖溶液和酶溶液,再加入檢驗樣品的標(biāo)準(zhǔn)溶液,放在40℃恒溫的水浴中10 min,取出加入底物和顯色劑溶液,在412 nm位置處測量吸光度,而且每隔30 s讀取一次吸光度數(shù)值,測定時間為3 min,記錄的最高值減去最低值得出測定值。如果蔬菜殘留此類農(nóng)藥的濃度高于0.001 mg/L,乙酰膽堿酯酶的抑制很明顯,農(nóng)藥濃度越大,抑制效果越明顯,說明分光光度法檢測到了蔬菜中的氨基甲酸酯類農(nóng)藥含量。
蔬菜中殘留的農(nóng)藥種類很多,采用分光光度法檢驗蔬菜中是否存在農(nóng)藥殘留,能夠快速、準(zhǔn)確地得出結(jié)果。
[1]王棚.分光光度法檢測蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2010(11):168-169.
X839.2
A
1674-7909(2016)36-76-1
熱孜萬古麗·吾甫力(1975-),女,本科,中級農(nóng)藝師,研究方向:農(nóng)產(chǎn)品檢測。