靳偉， 賈義平， 左之才， 王正義， 袁貴強， 萬濤梅， 何婷婷， 王天珍

(1. 四川省林業(yè)科學研究院，成都610081；2. 四川農業(yè)大學動物醫(yī)學院，環(huán)境公害與動物疾病四川省高校重點實驗室，四川雅安625014)

基于性別與季節(jié)差異的赤腹松鼠糖脂代謝指標測定

靳偉1#， 賈義平2#， 左之才2*， 王正義2， 袁貴強2， 萬濤梅2， 何婷婷2， 王天珍2

(1. 四川省林業(yè)科學研究院，成都610081；2. 四川農業(yè)大學動物醫(yī)學院，環(huán)境公害與動物疾病四川省高校重點實驗室，四川雅安625014)

以2015年1—12月捕自四川省滎經縣的171只成體赤腹松鼠Callosciuruserythraeus為研究對象，首次測定了其糖脂代謝8項指標值，并分析了性別、季節(jié)及妊娠對指標的影響。結果顯示：(1)赤腹松鼠糖脂代謝指標的性別差異無統(tǒng)計學意義。(2)高密度脂蛋白、載脂蛋白B濃度的季節(jié)差異無統(tǒng)計學意義，總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白、葡萄糖濃度為夏、秋季高于春、冬季，載脂蛋白AI濃度為夏、秋季低于春、冬季。(3)妊娠鼠甘油三酯、極低密度脂蛋白濃度高于未妊娠鼠。結果表明，雌、雄赤腹松鼠糖脂代謝指標具有同一性，且大多數(shù)指標具有季節(jié)差異，這可能與雌、雄鼠的繁殖狀態(tài)及生活環(huán)境的多樣性變化有關。

赤腹松鼠；糖脂代謝；性別；季節(jié)

赤腹松鼠Callosciuruserythraeus隸屬于嚙齒目Rodentia松鼠科Sciuridae麗松鼠屬Callosciurus，原產于亞洲東南部，適應力極強，一般棲息于熱帶和亞熱帶森林中，以混交林、針葉林較為常見，以植物的果實、種子和嫩葉為主食，可不同程度損害人工林(王酋之，胡錦矗，1984，1999)。目前對赤腹松鼠的研究集中在生態(tài)分布(Borgniaetal.,2013)、食性(孫玉波等，2012)、繁殖特性(Tamura & Terauchi，1994；Kusaharaetal.,2006；原寶東，2011)、巢穴選擇(溫知新等，2010)及危害(蔡紅霞等，2001)等方面。

近年來，關于野生小型哺乳動物血液生理生化指標的研究日漸增多，主要有東北松鼠Sciurusvulgaris(趙桂英等，2014)、喜馬拉雅旱獺Marmotahimalayana(陶元清等，2010；劉海青等，2015)、棕田鼠Lasiopodomysmandarinus(何建平等，2001)、歐洲野兔Lepuseuropaeus(Massányietal.,2009)等。靳偉等(2015)首次對赤腹松鼠的血液生理參數(shù)進行了測定，但對赤腹松鼠血液生化指標方面的研究還未見詳細報道。為進一步了解該物種的生物學特征，本研究著重對赤腹松鼠的糖脂代謝8項指標進行為期1年的測定，分析了性別、季節(jié)和妊娠等因素對指標的影響，以期為深入認識赤腹松鼠適應生境的生理學特點、不同種類間松鼠比較生理學，赤腹松鼠的生物學特性、繁殖特性、疾病防治等研究提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 血液樣本的采集

2015年1—12月于四川省滎經縣(102.85°E，29.80°N)捕獲野生性成熟赤腹松鼠171只，其中雄性81只，雌性90只。春季(2—4月)捕獲48只(18♂/30♀，其中3、4月的24只雌性赤腹松鼠中有12只妊娠)，夏季(5—7月)捕獲54只(27♂/27♀)，秋季(8—10月)捕獲36只(18♂/18♀)，冬季(1月，11—12月)捕獲33只(18♂/15♀)。將捕獲的赤腹松鼠帶回實驗室禁食12 h后，放入有蓋、可密閉的玻璃箱內，倒入適量的乙醚實施吸入麻醉，待其進入麻醉狀態(tài)后，徒手抓獲保定，心臟采血，3 500 r·min-1離心15 min，收集血清80～100 μL。

1.2 樣本檢測

檢測常用糖脂代謝指標8項：甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)、載脂蛋白AI(ApoAI)、載脂蛋白B(ApoB)、葡萄糖(GLU)。

1.3 檢測方法

CHO，氧化酶法，膽固醇液體試劑盒；TG，甘油磷酸氧化酶法，甘油三酯液體試劑盒；HDL，直接法，高密度脂蛋白膽固醇試劑盒；LDL，直接法，低密度脂蛋白膽固醇試劑盒；VLDL，直接法，極低密度脂蛋白膽固醇試劑盒；ApoAI，免疫透射比濁法，血清載脂蛋白AI測定試劑盒；ApoB，免疫透射比濁法，血清載脂蛋白B測定試劑盒；GLU，氧化酶法，葡萄糖氧化酶法液體試劑盒。以上試劑盒均購自上?？迫A生物工程股份有限公司，采用卓越450全自動生化分析儀(上?？迫A實驗系統(tǒng)有限公司)測定。

1.4 數(shù)據處理

采用Excel和SPSS 22.0對數(shù)據進行統(tǒng)計分析。采用雙因素方差分析(Two-Way ANOVA)比較赤腹松鼠糖脂代謝指標的性別和季節(jié)差異；若上述指標有性別差異，則采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)比較雌、雄赤腹松鼠的季節(jié)差異；采用獨立樣本t檢驗分析妊娠與未妊娠赤腹松鼠上述指標間的差異；使用最小顯著差數(shù)法(LSD)分析各相關變量。數(shù)據用平均值±標準差(Mean±SD)表示，顯著水平α=0.05(雙尾檢驗)。

2 結果

2.1 赤腹松鼠糖脂代謝指標的性別及季節(jié)差異

雙因素方差分析結果表明，赤腹松鼠血清糖脂代謝指標的性別差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。高密度脂蛋白[F(3，163)=0.433，P>0.05]和載脂蛋白B[F(3，163)=1.57，P>0.05]濃度的季節(jié)差異無統(tǒng)計學意義(圖1：C，G)，其均值分別為4.25 mmol·L-1、0.04 mmol·L-1(表1)?？偰懝檀糩F(3，163)=4.252，P<0.05]、甘油三酯[F(3，163)=4.857，P<0.05]、低密度脂蛋白[F(3，163)=2.957，P<0.05]、極低密度脂蛋白[F(3，163)=4.893，P<0.05]、葡萄糖[F(3，163)=4.064，P<0.05]濃度為夏、秋季顯著高于春、冬季(圖1：A，B，D，E，H)，其變化范圍分別為2.56～9.34 mmol·L-1、0.35～1.26 mmol·L-1、0.61～2.08 mmol·L-1、0.05～0.31 mmol·L-1、2.67～10.26 mmol·L-1(表1)；載脂蛋白AI[F(3，163)=31.355，P<0.05]濃度為春、冬季高于夏、秋季(圖1：F)，其變化范圍為0.12～0.56 mmol·L-1(表1)。

表1 赤腹松鼠糖脂代謝指標測定結果(平均值±標準差)Table 1 Results of metabolic indices of glucose and lipid inCallosciurus erythraeus (Mean±SD)

圖1 雌、雄赤腹松鼠糖脂代謝指標的季節(jié)差異

Fig. 1 Seasonal variations of metabolic indices of glucose and lipid inCallosciuruserythraeus

柱上不同字母代表季節(jié)差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；下圖同。

Different letters above the bars indicate there is a significant difference among seasons (P<0.05); the same below.

圖2 妊娠對赤腹松鼠糖脂代謝指標的影響Fig. 2 Effects of pregnancy on metabolic indices of glucose and lipid in Callosciurus erythraeus

2.2 妊娠對赤腹松鼠糖脂代謝指標的影響

春季妊娠鼠部分糖脂代謝指標與未妊娠鼠的差異有統(tǒng)計學意義(圖2)。妊娠鼠甘油三酯[t(1，22)=2.633，P<0.05]、極低密度脂蛋白[t(1，22)=2.198，P<0.05]濃度顯著高于未妊娠鼠，而總膽固醇[t(1，22)=1.331，P>0.05]、高密度脂蛋白[t(1，22)=0.163，P>0.05]、低密度脂蛋白[t(1，22)=1.95，P>0.05]、載脂蛋白AI[t(1，22)=0.900，P>0.05]、載脂蛋白B[t(1，22)=1.070，P>0.05]、葡萄糖[t(1，22)=0.620，P>0.05]濃度與未妊娠鼠的差異無統(tǒng)計學意義。

3 討論

赤腹松鼠的部分糖脂代謝指標與其他松鼠科動物有差異。其中，喜馬拉雅旱獺和東北松鼠的甘油三酯濃度分別是赤腹松鼠的3.18倍和0.56倍，葡萄糖濃度分別是赤腹松鼠的1.58倍和1.88倍，喜馬拉雅旱獺高密度脂蛋白濃度是赤腹松鼠的1.40倍(趙桂英等，2014；劉海清等，2015)；滎經赤腹松鼠的葡萄糖、總膽固醇及甘油三酯濃度與日本赤腹松鼠相比較，無明顯不同(Murataet al.,2003)。

由此推斷，這些指標的差異首先與種類及各自生活史特征有關，其次可能與所處的地理環(huán)境，比如溫度、食物種類有關。

3.1 赤腹松鼠糖脂代謝指標的性別差異

結果顯示，雌、雄赤腹松鼠糖脂代謝指標差異無統(tǒng)計學意義。在其他鼠類中，如喜馬拉雅旱獺(劉海青等，2015)、大鼠Rattus norvegicus(王冬平等，2009)等差異無統(tǒng)計學意義；另外東北松鼠(趙桂英等，2014)、金黃地鼠Mesocricetus auratus(王洪等，2008)等的部分指標差異有統(tǒng)計學意義。血液是構成動物機體內環(huán)境的重要組成部分，其組成成分或性質不僅反映了動物的健康狀況，更是其生物學功能的重要指征，其變化與遺傳和環(huán)境的改變密切相關。由于雌、雄個體生活史特征不同，在應對環(huán)境變化過程中，血液生化指標具有性別差異。赤腹松鼠糖脂代謝指標無性別差異，在一定程度上說明其主要受遺傳基因控制，且環(huán)境對雌、雄鼠糖脂代謝的影響具有同一性。

3.2 赤腹松鼠糖脂代謝指標的季節(jié)差異

結果顯示，測定的8項指標中除高密度脂蛋白、載脂蛋白B外，其余指標均具有季節(jié)差異，繁殖期與非繁殖期的能量代謝與脂質儲存變化尤為明顯，其變化可能和赤腹松鼠的生活史特征及外界環(huán)境改變相關。

葡萄糖是活細胞的能量來源和新陳代謝中間產物，與小型哺乳動物的營養(yǎng)及營養(yǎng)失衡緊密相關(Marchalet al.,2012)。在其他動物中，黑熊Ursus americanus血糖在夏季升高(Matula&Rothenbacher，1980)，歐洲野兔血糖在夏季最高、秋季最低(Massányiet al.,2009)。赤腹松鼠血糖為夏、秋季高于冬、春季。在冬季，外界環(huán)境食物質量差、溫度低；在春季，處于繁殖期，能量需求增加，進而血糖降低。而在夏、秋季，雌、雄赤腹松鼠處于體況恢復期且可利用食物較為豐富，血糖升高。由此可知，赤腹松鼠血糖的高低與食物質量、攝食及能量代謝的調節(jié)密切相關。

載脂蛋白AI是高密度脂蛋白的主要成分，而高密度脂蛋白能將動脈壁中的膽固醇直接或間接地轉運給肝臟組織，經相應的受體途徑進行分解代謝，氧化生成膽汁酸(Eckardsteinet al.,2001)；膽汁酸在動物機體內乳化脂肪，擴大與脂肪酶的接觸面積，在腸道內轉運脂肪，提高對脂肪的水解代謝，促進脂肪吸收(劉敬盛等，2010)。載脂蛋白B是低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白的主要成分，低密度、極低密度脂蛋白則與甘油三酯及膽固醇的轉運有關(張森，李輝，2006)。冬、春季赤腹松鼠能量攝入減少而消耗增加，其甘油三酯、總膽固醇儲存減少，低密度、極低密度脂蛋白水平下降。而載脂蛋白AI和高密度脂蛋白水平的升高則促進膽固醇的分解代謝，有利于脂質的氧化分解供能，提高能量利用率；另外還可減少自體脂肪的分解代謝。夏、秋季隨著食物質量的好轉以及繁殖高峰期的逐漸度過，其甘油三酯、總膽固醇儲存增加，低密度、極低密度脂蛋白水平升高，而載脂蛋白AI和高密度脂蛋白水平下降。綜上，上述指標的季節(jié)變化節(jié)律可能是生理輸出的結果，尤其是性激素的波動性變化，其變化可能導致機體代謝發(fā)生明顯改變。

3.3 妊娠對赤腹松鼠糖脂代謝指標的影響

妊娠期間，為了滿足胎兒生長發(fā)育的需要，母體各器官、系統(tǒng)均會發(fā)生一系列適應性變化，其中最主要的是生殖器官的局部變化和母體各器官相應的功能及代謝改變(張惠中，2009)。結果發(fā)現(xiàn)，春季妊娠鼠甘油三酯及極低密度脂蛋白濃度高于未妊娠鼠。妊娠期間肝臟合成代謝功能加強，脂質儲存增加，不僅僅是供給胎兒發(fā)育、子宮及乳腺等增大所用，而且也為分娩消耗及產后乳汁分泌做準備。

綜上，本文通過對赤腹松鼠糖脂代謝指標的研究，分析了性別、季節(jié)以及妊娠等因素對其可能造成的影響，對于深入認識赤腹松鼠適應生境的生理學特點具有重要意義，可為赤腹松鼠的生物學特性、繁殖特性、疾病防治等研究提供科學依據。

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Characterization of Metabolic Indices of Glucose and Lipid inCallosciuruserythraeusBased on Gender and Season

JIN Wei1#， JIA Yiping2#， ZUO Zhicai2*， WANG Zhengyi2， YUAN Guiqiang2，WAN Taomei2， HE Tingting2， WANG Tianzhen2

(1. Sichuan Academy of Forestry， Chengdu 610081， China; 2. Key Laboratory of Environmental Hazard and Animal Disease of Sichuan Province， College of Veterinary Medicine， Sichuan Agricultural University， Ya’an， Sichuan Province 625014， China)

To get better insight of the biochemical features of red-bellied squirrel (Callosciuruserythraeus)， 81 males and 90 females were captured in January to December 2015 from Yingjing county， Sichuan province. And 8 metabolic indices of glucose and lipid were measured. The differences of these indices were analyzed according to gender and season. Besides， the impacts of pregnancy in those indices were also analyzed. The results were showed as following： (1) No significant differences were found in the metabolic indices of glucose and lipid between the male and female red-bellied squirrel. (2) No significant seasonal variations were found in high-density lipoprotein and apolipoprotein B in red-bellied squirrel. The serum concentrations of total cholesterol， triglyceride， low-density lipoprotein， very low density lipoprotein and glucose were significantly higher in summer and autumn compared to these in spring and winter. However， the level of apolipoprotein AI in summer and autumn was obviously lower than that in spring and winter. (3) The levels of triglyceride and very low density lipoprotein were higher in pregnant squirrels than these in non-pregnant. These results indicated that the metabolic indices of glucose and lipid of male red-bellied squirrels were consistent with that of female. Almost all of the 8 studied parameters were impacted by seasens， and this may be related to the reproductive status of male and female squirrels and the diversities of environments.

Callosciuruserythraeus; metabolic of glucose and lipid; gender; season

2016-06-01 接受日期：2016-08-18 基金項目:四川省林業(yè)科學研究院自列課題項目(ZL2014-22)

靳偉(1982—)， 男， 博士， 高級工程師， 主要研究方向：生物多樣性保護及小型獸類研究， E-mail：58683348@qq.com； 賈義平， 男， 碩士研究生， 主要研究方向：中西獸醫(yī)與臨床， E-mail：gehuan199203@126.com#同等貢獻第一作者

*通信作者Corresponding author， E-mail：ZZCJL@126.com

10.11984/j.issn.1000-7083.20160148

Q959.837; Q592.1

A

1000-7083(2016)05-0748-05