李燕鋒，趙 晶

(1.天津藥科中等專業(yè)學校，天津 300462； 2.天津生物工程職業(yè)技術(shù)學院，天津 300462)

蛇莓的藥理作用研究進展

李燕鋒1，趙 晶2*

(1.天津藥科中等專業(yè)學校，天津 300462； 2.天津生物工程職業(yè)技術(shù)學院，天津 300462)

薔薇科植物蛇莓作為我國民間常用中草藥，具有較強的抗腫瘤、降壓、免疫功能促進、抑菌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制、收縮平滑肌、抗氧化、抗炎作用，另外還具有一定的抗誘變和抗凝作用。其中尤以抗腫瘤作用最為顯著，其的藥用價值越來越被人們所關(guān)注。本文重點就蛇莓的不同藥理作用研究進展進行綜述，為今后蛇莓的應用和開發(fā)提供科學依據(jù)。

蛇莓，藥理作用，抗腫瘤作用，降壓作用，抑菌作用

蛇莓為薔薇科多年生草本植物蛇莓Drchesneaindica(Andr) Focke的全草，具有清熱解毒、收斂止血、消腫化瘀等功效，民間常用于治療腸炎、驚癇、熱病、咽喉腫痛和疔瘡腫毒等疾病。近年來，隨著對薔薇科植物蛇莓的深入研究，發(fā)現(xiàn)蛇莓具有寶貴的藥用價值，特別是抗腫瘤活性組分的發(fā)現(xiàn)越來越被人們重視，引起國內(nèi)外學者的廣泛關(guān)注。

1 藥理作用

1.1 抗腫瘤作用 蛇莓具有顯著的抗腫瘤活性。實驗證明：從蛇莓中提取濃度為200mg/ kg多糖類成分對于S180肉瘤小鼠的抗腫瘤活性具有較為分明的特點，其抑制率為63.5%[1]。在另一試驗中取蛇莓甲醇進行提取分離出其中的多糖成分后向移植瘤S180大鼠注射30 d，結(jié)果表明在劑量為100 mg/kg和200 mg/kg的情況下，蛇莓對癌細胞顯現(xiàn)出抑制率分別是31.9%和63.0%[2]。蛇莓提取物能夠?qū)κ彻馨〦ca-109人體細胞系產(chǎn)生作用，有效控制癌細胞的擴散生長，當其開始作用48 h且達到15 mg/ml的濃度之時，癌細胞的再繁殖能力即可完全的喪失。蛇莓可產(chǎn)生輕度的合成細胞DNA抑制效果，對于癌細胞的有絲分裂抑制率能夠蛇莓對細胞DNA的合成有輕度抑制作用，使得癌細胞有絲分裂的抑制率實現(xiàn)至46%(10 mg/ml)和49%(15 mg/ml)[3]。小鼠S180(多形細胞性肉瘤)、S37(未分化小鼠肉瘤)、H22(肝細胞瘤)在蛇莓的水提物浸膏的作用下明顯出現(xiàn)抑制效果，10.4 g/kg對S180、H22的抑瘤率分別為59%和31% ，5.2 g/kg對S37抑瘤率為70%。蛇莓在對食管癌細胞(Ecal09)、人體消化道腫瘤、人體肝癌細胞(7721)、和胃癌細胞(7901)的研究過程中起到較為顯著的抑瘤作用且其殺傷力對食管瘤細胞來說呈劑量依賴關(guān)系[4]。而且相當生藥量0.4 mg/ml的蛇莓水提物作用于腫瘤細胞能表現(xiàn)出100%的殺傷率[5]。

蛇莓總酚的抗腫瘤活性較高，能夠直接作用于腫瘤細胞，增強B細胞抗體的分泌和T細胞增殖，也能夠通過提高機體細胞和體液免疫力發(fā)揮其體內(nèi)抗腫瘤作用。彭博等[6]在研究蛇莓總酚(DPE)的抗腫瘤作用時首先培養(yǎng)10～12 h腫瘤細胞加入DPE比色測量其吸光度，然后另取生理鹽水稀釋洗滌后的腹水癌細胞，建立小鼠移植性腫瘤模型觀察得出DPE在不同的質(zhì)量濃度下表現(xiàn)出的抑瘤率。其濃度為0.25 g/kg時明顯抑制淋巴細胞增值，當DPE劑量為0.5和1 g/kg時對U14腫瘤細胞的抑制率分別為27%和63%，有顯著的抑瘤效果(作用接近于環(huán)磷酰胺)。低劑量DPE可以促進腫瘤細胞的生長，而能夠起到抑制腫瘤細胞增值作用的蛇莓總酚必須是在中、高劑量下的DPE才可。從蛇莓中分離出的酚性基團對人體內(nèi)的卵巢癌細胞SKOV-3生長起到抑制的作用[7]。同時蛇莓也可于S期時產(chǎn)生一定的阻滯卵巢癌和宮頸癌細胞作用，并抑制Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、CDK2表達[8]。袁曉環(huán)等[9]通過體外培養(yǎng)肝癌細胞，取蛇莓用95%乙醇提取并以石油醚進行萃取，使用高效液相色譜法測得蛇莓中的齊墩果酸含量，可為控制蛇毒藥材及其制劑的質(zhì)量提供依據(jù)。吳英俊等[10]通過實驗證實蛇莓中所包含的齊墩果酸的體外抗腫瘤效果較為良好，其抑制肝癌細胞增殖的作用對時間有依賴性且與齊墩果酸的濃度含量成正比。李小洪等[11]采用Brine Shrimp致死率生測法進行生物活性測定，證明了蛇莓的提取物有一定抑制結(jié)腸癌細胞增殖的作用。胡兵等[12]通過對蛇莓進行制備、檢測細胞懸浮增殖、失巢凋亡、Caspase-3活性和活性氧等，兩兩對比各個組間的細微差別研究蛇莓對于人結(jié)腸癌RKO細胞失巢凋亡產(chǎn)生的效用，RKO細胞的懸浮生長可以通過蛇莓來抑制，能夠活化懸浮狀態(tài)RKO細胞Caspase-3產(chǎn)生抗腫瘤作用，使RKO細胞失巢凋亡的速度加快，提高活性氧簇水的生成并與之相關(guān)。齊元富[13]認為腫瘤多是因為濕熱邪毒結(jié)聚在人體內(nèi)貫穿始終，形成腫塊消耗氣血，蛇莓清熱解毒消腫，對具有濕熱毒聚表現(xiàn)的患者可起到理氣活血散結(jié)的功效，有較強的抗腫瘤活性。此外，病理性血管的新生是腫瘤細胞生長和轉(zhuǎn)移的必要條件之一。蛇莓抑制血管新生的作用可能與減緩血管內(nèi)皮細胞的增殖凋亡有關(guān)，但具體的機制還有待進一步研究證實[14]。

1.2 降壓作用 蛇莓乙醇流浸膏所具有的降壓功能較為短暫，能夠產(chǎn)生抑制心臟收縮和心率過快的功能，其效用和使用劑量呈一定關(guān)系，能夠增加冠狀動脈血流量，且不論是阿托品的注射還是兩側(cè)迷走神經(jīng)的切斷都不會對此作用產(chǎn)生影響[1]。

1.3 免疫功能促進作用 通過反復洗滌細胞、調(diào)整細胞至一定濃度培養(yǎng)轉(zhuǎn)化T淋巴細胞，選取小鼠進行瘤細胞的接種注射，給藥一段時間后取脾洗滌研磨制成脾細胞懸液，研究細胞與體液免疫應答通過蛇莓作用后產(chǎn)生的影響。對小鼠注射被稀釋到2 g/ml的蛇莓乙醇流浸膏，觀察發(fā)現(xiàn)了蛇莓DPE在1 g/kg的情況下具有加速細胞免疫的淋巴細胞增殖的效用，且增加抗體所釋放的量隨著劑量的增加而增加，即擁有較為顯著的免疫功能的促進作用[9]，除此之外可增大細胞體積，7～8個雞紅細胞都可以被一個胞體所吞噬，也可誘發(fā)小鼠腹腔的巨噬細胞吞噬機能增加[1]。

1.4 抑菌作用 蛇莓醇提物能夠減緩腦膜炎雙球菌和傷寒桿菌的增殖，且蛇莓里包含的能夠被水溶解的成分和能夠被丙酮溶解而不能被水溶解的成分對綠膿桿菌、志賀痢疾桿菌、金黃色葡萄球菌的生長也會產(chǎn)生抑制效果，蛇莓提取物的濃度越高其抑制細菌生長的作用就越強，白喉桿菌在蛇莓提取物濃度大于0.5g/ml的時候也會被其抑菌作用所影響[15]。此外蛇莓可以對外科創(chuàng)傷和癤瘡產(chǎn)生一定的作用，但不能抑制引起病原性的一次侵入菌假單胞銅綠菌素[16]。

取蒸餾水和蛇莓煎煮過濾，提取液濃縮，用接種環(huán)從平板的菌落上取些許細菌，放到裝有肉湯的試管中攪拌培養(yǎng)供試菌調(diào)整至適當濃度，測定不同濃度下的抗菌能力，試驗結(jié)果表明蛇莓能夠有效的抑制7種較為常見的能引發(fā)疾病的微生物(包括變形桿菌、肺炎球菌、甲型副傷寒桿菌等)的生長繁殖，最低抑菌濃度范圍均在1∶32-1∶1024之間。除此之外，抑菌力作用的強弱程度會隨著不同類型病菌的改變而發(fā)生相應的變化，蛇莓最強的抗菌作用表現(xiàn)在對變形桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制上，抑菌濃度最低為1∶1024[17]。

林居純等[18]將大腸桿菌等獸醫(yī)臨床常見的細菌作為研究對象，取蛇莓、蒸餾水煮沸減壓合并濃縮得到粗提物，檢測并觀察了蛇莓水提物對受試菌的體外抗菌作用與超微結(jié)構(gòu)的影響。研究表明，蛇莓水提物具有較強的體外抑菌活性，其抑菌活性強于文獻報道中的其他中藥對相關(guān)細菌的抗菌活性。其主要對細菌細胞壁或細胞膜發(fā)揮抗菌活性，其作用機制對不同菌種有一定差異性，且金黃色葡萄球菌經(jīng)蛇莓中皂苷等活性成分作用后細胞膜導致受損從而細菌死亡，而作用于大腸桿菌的蛇莓水提物產(chǎn)生的抗菌活性主要表現(xiàn)在細胞外膜或細胞壁上但強度與前者尚有不及。說明蛇莓通過作用于細菌細胞壁，引起質(zhì)壁分離與細胞質(zhì)空腔化而呈現(xiàn)的抗菌活性比通過作用于細胞膜的抗菌活性弱。隨后，還發(fā)現(xiàn)蛇莓除了對大腸桿菌等病原菌有抗菌作用外，還能消除質(zhì)粒使一些抗菌藥物的敏感性得到恢復，抑制細菌生物膜形成。細菌生物膜的形成和耐藥性密切相關(guān),菌株產(chǎn)生生物膜說明其對抗生素和宿主免疫方面的抵抗力很強易出現(xiàn)嚴重臨床問題，而人們也越來越重視能夠抑制細菌生物膜的天然產(chǎn)物，蛇莓水提物濃度不同時對抑制金黃色葡萄球菌與大腸桿菌各自的菌膜形成量也有著不同的影響且存在著濃度依賴的關(guān)系[19]。

蛇莓具有良好的抗單純皰疹病毒(HSV)活性，其水總提取物在醇沉后的上清液包含的醇溶性化合物具有一定的抗HSV活性，在蛇莓的抗病毒活性研究中分別制備水、乙醇、乙酸乙酯提取物，將蛇莓與水一起煎煮抽濾濃縮加入乙醇(水提醇沉法)，以乙醇回流提取蛇莓，再加入蒸餾水濾過備用(醇提水沉法)，進一步使蛇莓分離和純化，在體外抗病毒試驗中分別以上清液和沉淀物兩種試劑進行觀察并計算其治療指數(shù)。結(jié)果表明乙酸乙酯、乙醇、水的總提取物中，TI>81.57，乙醇總提取物抑制單純皰疹病毒的效果最好；TI>7.11，水總提取物當中也包含較少的抑制作用。分別用醇沉法和水沉法對總提取物進行分離后，水提醇沉后的上清液TI>13.15[20]。

1.5 中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制作用 研究發(fā)現(xiàn)，在對小鼠以50 g/kg的蛇莓水提取物和10～50 g/kg的醇提取物分別進行灌胃后，小鼠的自主活動均逐漸減弱，效果維持在4 h之內(nèi)，1 h時最強，醇提物的發(fā)揮的抑制作用相比之下較為明顯。向小鼠注射戊巴比妥鈉分析灌胃小鼠各藥的量效和時效關(guān)系，發(fā)現(xiàn)了蛇莓的鎮(zhèn)靜作用對于閾下劑量以下小鼠的睡眠率和睡眠時間有所增長且隨劑量增大而效果更佳。蛇莓醇提物中所包含的有效成分相對豐富，其抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用比水提物更強[21]。

1.6 對平滑肌作用 蛇莓能夠?qū)ζ交?即無紋肌)產(chǎn)生一定的收縮功能，在對張力變化不造成影響的情況下增加離體腸收縮的振幅，且蛇莓流浸膏的抑制張力作用效果與劑量呈正比關(guān)系。同時家兔、大鼠以及豚鼠的離體子宮在蛇莓的作用下會呈現(xiàn)出興奮狀態(tài)[22]。

1.7 抗氧化作用 研究表明，經(jīng)過蛇莓甲醇提取物作用后CCD-9865Sk 細胞內(nèi)的活性氧種類減少，提高了過氧化氫酶的活性和細胞生存能力，使過氧化氫在無毛小鼠皮膚和丙二酰二醛中的水平得到降低，并且對能夠進行乳汁分泌的脫氫酶活性和由于過氧化氫誘導的Bax出現(xiàn)產(chǎn)生了抑制作用[23]。茍體忠等[24]研究蛇莓中所包含的的總多酚活性成分，將干燥蛇莓粉碎后分別以不同試劑提取確定最佳的萃取條件，分別測定蛇莓總多酚的含量和醇提物總抗氧化的能力、計算·OH清除率和1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除率。選取清除DPPH·能力較高的蛇莓乙醇提取液進行下一步實驗。結(jié)果證明蛇莓總多酚具有很強的抗氧化活性和自由基清除作用，是天然的抗氧化活性劑，還原能力顯著、有一定的清除DPPH·活性作用和明顯的清除·OH活性作用。在比較蛇莓和維生素C的作用時分析得蛇莓的功能較VC來說較強，兩者之間明顯呈正相關(guān)關(guān)系，產(chǎn)生的作用都會隨著濃度的增加而增強，其中多酚是蛇莓發(fā)揮作用的主要成分[25]。

1.8 抗炎活性 蛇莓具有一定的抗炎活性，通過制備蛇莓醇提物、培養(yǎng)小鼠巨噬細胞系建立了細胞模型并對其進行干預分組實驗檢測藥物中所包含的細胞病變，發(fā)現(xiàn)干預后細胞活性無明顯變化[26]。藥物進行干預后可抑制轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)的活化，腫瘤壞死因子(TNF-α)、誘導型一氧化氮合酶(NOS)、血紅素氧合酶1(HO-1)的mRNA水平相對降低且呈劑量依賴型關(guān)系，HO-1的蛋白水平也有顯著提升。甚至蛇莓能夠加快HO-1釋放，對促炎介質(zhì)表達的速度減緩而增加抗炎介質(zhì)表達，從而產(chǎn)生一定的抗炎作用[27]。

1.9 其他作用 蛇莓還具有一定的抗誘變作用和抗凝作用。蛇莓煎劑在哺乳動物微粒體酶和鼠傷寒沙門氏菌的研究中發(fā)現(xiàn)具有溫和的抗誘變活性，誘導苯并芘所致的突變的發(fā)生可在蛇莓提取物的作用下降低[1]，不能對抗試管中包括的皂苷成分所導致的溶血功能，無法對紅細胞膜起到保護作用。該植物果實包含豐富的紅色素，對鎮(zhèn)痛和防治衰老也有一定的療效[28]。

2 蛇莓的毒性

蛇莓入藥可消腫化瘀、清熱解毒，治療作用廣泛，但民間常認為“蛇食蛇莓，人食有毒”的這種說法是正確的。在進行蛇莓急性毒性的研究中，將20只小鼠分別設(shè)為實驗組和對照組給予灌胃給藥，比較觀察兩組小鼠。結(jié)果證實了兩組小鼠接受給藥后無一發(fā)生死亡，致死量達不到一半，因此對小鼠能夠承受的最大給藥量進行測試，以最高劑量為20 g/kg的蛇莓給予小鼠灌胃，觀察比較后發(fā)現(xiàn)小鼠雖然短期內(nèi)出現(xiàn)精神不佳活動降低的現(xiàn)象，但30 min正?；顒蛹纯苫謴停抑卸痉磻退劳龅默F(xiàn)象仍未發(fā)生[29]。

本品毒性相比之下較小，內(nèi)服后少有惡心、脘腹不適等反應發(fā)生。蛇莓在臨床上被發(fā)現(xiàn)的過敏反應有1 例[30]，其主要的毒性反應原因是由于誤食蛇莓果實而導致的紫癜、發(fā)熱、鼻出血等癥。

3 小結(jié)

蛇莓作為民間常用草藥，已有很長的用藥歷史且作用非常廣泛，具有清熱解毒、消腫散瘀等功效。目前已證明，蛇莓具有廣譜的抗腫瘤作用、較強的抑菌作用和免疫功能促進作用，明顯的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用、強抗氧化作用、抗炎作用、抗凝作用，溫和的抗誘變作用和降壓作用等?，F(xiàn)臨床可用于各種腫瘤性疾病、肝炎、帶狀皰疹、白血球減少癥和蛇蟲咬傷等，毒副作用較小。蛇莓抗腫瘤作用已成為目前醫(yī)藥領(lǐng)域研究的熱點之一，但現(xiàn)如今主藥以蛇莓為主的成藥相對較少，需要進一步的臨床驗證從而挖掘臨床驗證有效的方劑開發(fā)出更好的新藥。

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2016-09-03

趙晶，E-mail：jingzhao20080823@126.com。

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