邵丹，施壽榮，王強(qiáng)，胡艷，童海兵

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，江蘇 揚(yáng)州 225125）

不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)黃羽肉雞生產(chǎn)性能、免疫性能和微生物的影響

邵丹，施壽榮，王強(qiáng)，胡艷，童海兵*

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，江蘇 揚(yáng)州 225125）

試驗(yàn)旨在探討不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)黃羽肉雞生產(chǎn)性能、免疫性能和微生物的影響。選用540只21日齡蘇禽黃雞（公雛），隨機(jī)分為3組：對(duì)照組V1、二氯異氰脲酸鈉粉舍外噴霧消毒組（V2組）、二氯異氰脲酸鈉粉舍內(nèi)舍外結(jié)合噴霧消毒組（V3組），每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)60只。舍內(nèi)飼養(yǎng)密度為6只/m2，舍外密度為4只/m2，試驗(yàn)期為28d。結(jié)果表明：三組消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞生產(chǎn)性能、免疫器官指數(shù)、血清生化指標(biāo)、腸道部分微生物含量及雞舍空氣中大腸桿菌含量均無(wú)顯著影響（P＞0.05），其中空氣中大腸桿菌含量有下降趨勢(shì)，V2和V3組與V1組相比，空氣中大腸桿菌含量分別下降38.57%、35.71%。由此可知，不同噴霧消毒方式對(duì)本試驗(yàn)條件下放養(yǎng)黃羽肉雞生產(chǎn)性能和免疫性能無(wú)不利影響，對(duì)雞舍微生物環(huán)境無(wú)顯著改善作用，因此建議放養(yǎng)肉雞在較好的飼養(yǎng)環(huán)境下可以不采用噴霧消毒措施。

放養(yǎng)黃羽肉雞；噴霧消毒方式；生產(chǎn)性能；微生物

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展及人們生活水平的提高，消費(fèi)者對(duì)畜產(chǎn)品的要求由數(shù)量型向質(zhì)量型轉(zhuǎn)變，由單一的追求食品營(yíng)養(yǎng)含量向高品質(zhì)、綠色營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)變。因此在家禽養(yǎng)殖行業(yè)競(jìng)爭(zhēng)日益激烈的大背景下，生產(chǎn)綠色無(wú)公害、高檔禽產(chǎn)品已大勢(shì)所趨。而近年來(lái)，集約化家禽養(yǎng)殖引發(fā)了肉品質(zhì)下降、環(huán)境污染等問(wèn)題，這已成為制約養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的重要因素[1]。放養(yǎng)飼養(yǎng)，是結(jié)合傳統(tǒng)飼養(yǎng)模式與現(xiàn)代養(yǎng)雞業(yè)的生產(chǎn)模式，能充分利用空氣、土壤等條件，并通過(guò)補(bǔ)飼基礎(chǔ)日糧來(lái)滿(mǎn)足其營(yíng)養(yǎng)需要，生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)、無(wú)公害的禽產(chǎn)品[2]。因此，推廣放養(yǎng)技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)安全高品質(zhì)的家禽，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益和市場(chǎng)前景。

對(duì)于放養(yǎng)肉雞而言，給其提供良好的養(yǎng)殖環(huán)境至關(guān)重要。雞的許多傳染病多為氣源性傳染病，病原微生物借助于空氣或以空氣為媒介傳播。消毒對(duì)雞的生存環(huán)境周?chē)牟≡鹱饔?，通過(guò)消毒可以控制病原微生物的侵入、擴(kuò)散，達(dá)到殺滅和抑制病原生物擴(kuò)散或傳播的效果，維持或提高雞群健康水平[3]。因此加快生物安全體系健全的速度，控制好養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)環(huán)境勢(shì)在必行。養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)環(huán)境控制常用的方法就是應(yīng)用消毒劑殺滅禽舍環(huán)境中的微生物。不同的消毒程序?qū)ο拘Ч绊戄^大，因此有必要選擇合適的消毒劑及合適的消毒程序和方法來(lái)有效地控制禽舍中傳染病的發(fā)生[4-6]。本試驗(yàn)對(duì)放養(yǎng)肉雞舍內(nèi)外采用不同的噴霧消毒方式，研究其對(duì)放養(yǎng)肉雞生產(chǎn)性能、免疫性能、腸道微生物和雞舍微生物的影響，為放養(yǎng)肉雞舍內(nèi)外消毒模式的生物安全技術(shù)規(guī)程建立提供一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)動(dòng)物為21日齡蘇禽黃雞（公雛），購(gòu)于揚(yáng)州翔龍禽業(yè)發(fā)展有限公司。試驗(yàn)所用墊料為鋸屑，購(gòu)于揚(yáng)州一商業(yè)家具有限公司。試驗(yàn)所用二氯異氰脲酸鈉粉購(gòu)于上海弈羽貿(mào)易有限公司，噴霧消毒時(shí)配置成2g/L二氯異氰脲酸鈉溶液使用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日糧 試驗(yàn)選用540只1日齡蘇禽黃雞（公雛），統(tǒng)一育雛至21日齡后隨機(jī)分為3組：對(duì)照組V1、二氯異氰脲酸鈉粉舍外消毒組（V2組）、二氯異氰脲酸鈉粉舍內(nèi)外消毒組（V3組），每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)60只，舍內(nèi)飼養(yǎng)密度為6只/m2（舍內(nèi)飼養(yǎng)面積為10m2），舍外密度為4只/m2（舍外飼養(yǎng)面積為15m2）。V2組每天下午16:00在舍外噴750ml二氯異氰脲酸鈉溶液；V3組每天下午14:00舍內(nèi)噴500ml二氯異氰脲酸鈉溶液、16: 00在舍外噴750ml二氯異氰脲酸鈉溶液。試驗(yàn)期為28d，從22日齡至49日齡。試驗(yàn)組每間雞舍內(nèi)鋪設(shè)8cm厚度墊料。肉雞自由采食，充足飲水，按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。22～49日齡飼喂肉用仔雞配合飼料（中雞料），均購(gòu)于揚(yáng)州東方希望動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)食品有限公司。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)期間自由采食，充足飲水。每天早上8:00放養(yǎng)肉雞，晚上16:00將雞趕回雞舍，每天早上8:00、中午12:00、下午16:00記錄雞舍內(nèi)外的溫濕度情況。

1.4 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能 實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1d禁食12h，次日以重復(fù)為單位稱(chēng)重，并統(tǒng)計(jì)耗料量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料肉比、死亡率。

1.4.2 免疫器官指數(shù) 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)每個(gè)重復(fù)選取2只接近實(shí)驗(yàn)組內(nèi)平均體重的雞，稱(chēng)活體重后屠宰放血拔毛，取胸腺、肝臟、脾臟、法氏囊，稱(chēng)重并計(jì)算其各自比率。

1.4.3 血液生化指標(biāo) 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)選取3只雞，翅靜脈采血2ml，靜置后，3500r/min離心10min，分離后的血清用于血清生化指標(biāo)測(cè)定。血樣送至江蘇省揚(yáng)州市疾病控制中心測(cè)定。用UniCel DxC 800 Synchron全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)（Beckman Coulter，美國(guó)）測(cè)定血清生化指標(biāo)。

1.4.4 微生物檢測(cè)

1.4.4.1 空氣中微生物檢測(cè) 空氣中微生物檢測(cè)方法：參照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)公共場(chǎng)所空氣微生物檢驗(yàn)方法細(xì)菌總數(shù)測(cè)定中的自然沉降法。

采樣方法：消毒1h后根據(jù)室內(nèi)面積進(jìn)行梅花式均勻布點(diǎn) （按照四角及對(duì)角線(xiàn)交點(diǎn)的方式分布采樣點(diǎn)，四個(gè)角距離墻面0.5cm），采樣高度和雞呼吸高度一致，采樣點(diǎn)避開(kāi)風(fēng)口，離墻壁距離大于0.5cm，打開(kāi)無(wú)菌平板的皿蓋，暴露10min后，蓋上平皿后迅速放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

菌落計(jì)數(shù)：大腸桿菌測(cè)定根據(jù)GB 4789.38-2012大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)中平板計(jì)數(shù)法的計(jì)數(shù)方法。

結(jié)果計(jì)算：按奧氏公式計(jì)算菌落數(shù)：C＝50000N/AT；式中，C：每立方米菌落總數(shù)（CFU/ m3）；N：每皿菌落數(shù)（個(gè)）；A：培養(yǎng)皿面積（cm2）；T：采樣時(shí)間（min）。

1.4.4.2 盲腸微生物檢測(cè) 試驗(yàn)于49d每個(gè)重復(fù)選取5只雞放血宰殺，無(wú)菌取盲腸內(nèi)容物，低溫保存。立即送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)每克內(nèi)容物乳酸桿菌數(shù)、沙門(mén)氏菌數(shù)、大腸桿菌數(shù)。

盲腸內(nèi)容物的稀釋?zhuān)好つc內(nèi)容物送回微生物接種室后，立即于無(wú)菌操作臺(tái)上取0.5g內(nèi)容物，放入加有4.5ml無(wú)菌稀釋液且經(jīng)過(guò)高壓滅菌的試管中，在混勻器上混勻，此為10-1稀釋液，吸取0.5ml該液于盛有4.5ml無(wú)菌稀釋液試管中，進(jìn)行10-2稀釋并混勻，依次進(jìn)行10-3～10-8倍稀釋。

培養(yǎng)及其計(jì)數(shù)：每個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的培養(yǎng)皿以無(wú)菌操作法傾入15ml左右的培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基凝固后，分別吸取10-4～10-6稀釋液0.1ml于無(wú)菌培養(yǎng)皿中；大腸桿菌在37℃有氧培養(yǎng)24h，乳酸桿菌在37℃厭氧培養(yǎng)48h，沙門(mén)氏菌在37℃有氧培養(yǎng)24h。

計(jì)數(shù)：細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)后，按可數(shù)性原則計(jì)數(shù)，每克盲腸內(nèi)容物菌落數(shù)以lg菌數(shù)/g盲腸內(nèi)容物表示，計(jì)算公式如下：

1.5 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)經(jīng)Excle2003整理后，用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，單因子方差分析（one-way ANOVA）檢驗(yàn)組間差異顯著性，P＜0.05表示差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表1。由表1可知，不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞49日齡體重、平均日增重、平均日耗料量、料肉比和死亡率均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表1 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞免疫器官指數(shù)的影響 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞免疫器官指數(shù)的影響見(jiàn)表2。由表2可知，不同噴霧消毒方式對(duì)肝臟率、脾臟率、胸腺率和法氏囊率無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞免疫器官指數(shù)的影響

2.3 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響見(jiàn)表3。由表3可知，不同噴霧消毒方式對(duì)血清生化指標(biāo)均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

2.4 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞盲腸微生物及雞舍空氣中微生物的影響 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞盲腸微生物及雞舍空氣中微生物的影響見(jiàn)表4。由表4可知，不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞盲腸內(nèi)大腸桿菌和乳酸桿菌含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞舍空氣中大腸桿菌含量無(wú)顯著影響 （P＞0.05），但V2和V3組消毒后，空氣中大腸桿菌含量有下降趨勢(shì)，比對(duì)照組分別下降38.57%、35.71%。

表3 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

表4 不同噴霧消毒方式對(duì)放養(yǎng)肉雞腸道和雞舍空氣中微生物含量的影響

3 討論

有研究指出，畜禽舍環(huán)境空氣質(zhì)量狀況會(huì)影響人和動(dòng)物的健康，空氣質(zhì)量差會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物和人發(fā)生呼吸道等疾病，是影響動(dòng)物健康的潛在因素[7]。特別是隨著集約化養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，飼養(yǎng)密度高，空間相對(duì)狹窄，導(dǎo)致舍內(nèi)微生物濃度升高[8-9]，易于病原體的傳播擴(kuò)散，造成較嚴(yán)重的生物污染，對(duì)整個(gè)畜禽群體形成感染威脅。舍內(nèi)空氣中的細(xì)菌在一定程度上均可導(dǎo)致動(dòng)物乃至飼養(yǎng)員的感染[10]。而畜禽舍空氣中微生物的含量已成為評(píng)價(jià)畜禽舍空氣質(zhì)量的一個(gè)有效指標(biāo)[11]。孫秋艷等采用不同消毒劑和消毒模式研究雞舍內(nèi)微生物情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)消毒劑的種類(lèi)對(duì)很多微生物消毒效果影響較大，其中氯制劑效果較佳[12]。二氯異氰尿酸鈉是一種高效、廣譜、內(nèi)吸性殺菌氯制劑，可殺滅各種細(xì)菌、藻類(lèi)、真菌和病菌[13]，其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，便于貯存運(yùn)輸，使用安全、簡(jiǎn)便、用量少、藥效持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。因此本試驗(yàn)選用該消毒劑對(duì)雞舍進(jìn)行消毒試驗(yàn)研究。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同的消毒模式對(duì)放養(yǎng)肉雞生產(chǎn)性能和免疫性能、腸道微生物含量無(wú)顯著影響，這與辛國(guó)芹等人研究結(jié)果不一致[14-15]，可能是因?yàn)樗捎玫南緞┓N類(lèi)、飼養(yǎng)方式、消毒方式不一致而產(chǎn)生的結(jié)果。本研究中采用放養(yǎng)模式，且飼養(yǎng)密度合適，試驗(yàn)開(kāi)展期間溫濕度適宜，給肉雞提供了相對(duì)良好的生長(zhǎng)環(huán)境，因此可建議在生產(chǎn)中給放養(yǎng)肉雞提供較為舒適的生長(zhǎng)環(huán)境時(shí)，雞舍內(nèi)外可不采用噴霧消毒方式。

[1]孫寶盛.不同補(bǔ)飼量、密度和日齡對(duì)棗林苜蓿地放養(yǎng)雞的生產(chǎn)性能及肉蛋品質(zhì)的影響的研究 [D].山西：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014.

[2]葛劍，谷子林，李英，等.河北柴雞1～6周齡生長(zhǎng)曲線(xiàn)分析與擬合的比較研究 [J].中國(guó)家禽,2005,27 (14):9-11.

[3]劉栓江,李巧芬.規(guī)?；u場(chǎng)的消毒防疫措施[J].養(yǎng)禽與禽病防治,2009,11:31-32.

[4]Pavlikova M, Lacko I, Devin sky F, et al. Quantitative rela -tionships between structure，aggregation properties and antimicro-bial activity of quaternary ammonium bolaamphiphiles[J].Collect Czech Chem Commun,1995,60:1213-1228.

[5]Nebot S,Salcedo Davila I,Andrade Balao J A,et al. Modellingofreaction afterUV disinfection: effect of UV -C dose on subsequent photoreactivation and dark repair[J]. Water Res, 2007,41(14):3141-3151．

[6]任景樂(lè)，肖靜靜，焦洪超，等.不同噴霧消毒方式對(duì)蛋雞場(chǎng)消毒效果的影響[J].中國(guó)家禽,2012,34(22): 44-45．

[7]Uhtain B,Prouvost J F,Beerens D,et al.Acute Effects of Endotoxin Inhalation on the Respiratory Tract in Pigs: Interaction with Ammonia[J]. Inhalation Toxicology,2008,8(9):947-968.

[8]Gross W B.Disease due to Esherichia coli in poultry [C]//Gyles C L.Escherichia coli in dometic animalsand humans.Wallingford：CAB International, 1994: 237-259.

[9]Douwes J,Thorne P,Pearce N,et al.Bioaerosol health effects and exposure assessment:Progress and prospects[J].Ann Occup Hyg,2003,47(3):187-200.

[10]Fiegel J,Clarke R,Edwards D A.Airborne infectious disease and the suppression of pulmonary bioaerosols[J].DDT,2006,(1/2):51-57.

[11]Chai T,Muller W,Zucker B A.Airborne anaerobic bacterica in a calf house with special regard to clostridium perfringens[J].Berliner und Munchener Tierarztliche Wochenschrift,1997,110(1):1-4.

[12]孫秋艷,沈美艷,李舫.不同消毒模式對(duì)商品雞場(chǎng)空舍期舍內(nèi)微生物種類(lèi)數(shù)量的影響[J].畜牧與獸醫(yī),2014,46(11):103-106.

[13]劉南,李排兵,李秀安.二氯異氰尿酸鈉粉狀消毒劑殺菌效果的試驗(yàn)觀察 [J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2005,32 (7):794-796.

[14]辛國(guó)芹,徐海燕,曹銀生，等.不同噴霧消毒方式對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能及免疫指標(biāo)影響[J].畜禽業(yè),2013, 296:18-20.

[15]艾國(guó)良,賀曉霞,陶鈞.氯消毒劑對(duì)雞生產(chǎn)性能的影響及致病作用[J].中國(guó)獸藥雜志,2003,37(10): 54-57.

Effects of different spray sterilization methods on growth performance, immune status and microorganism of free-range yellow broilers

SHAO Dan,SHI Shou-rong,WANG Qiang,HU Yan,TONG Hai-bing*
（Poultry Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Yangzhou Jiangsu 225125）

Thisstudy was conducted to evaluate the effectsofsterilization methodson growth performance,immune status and intestinal flora of free-range yellow broilers.A total of 540 21-day-age Suqin yellow-fether broilers were randomly allocated into 3 groups with 3 replicates per group.These birds were assigned to V1 group(control),V2 group(outdoor disinfection with dichloro isocyanuric acid sodium )and V3 group (indoorand outdoordisinfection with dichloro isocyanuric acid sodium),respectively.9 pen were used with 6 birds/m2 indoor an 4 birds/m2 outdoor.The experimentlasted for28 days.The results showed that3 sterilization methods had no significant influence on growth performance,immune organ index,serum biochemical indices,microbes content in gut and e.coli contents in air(P>0.05).Meanwhile,there showed a decreasing trend in air e.coli content,and they were decreased 38.57%, 35.71%in V2 group and V3 group,respectively,when compared toV1 group.Thefindingsin thisstudy suggested that sterilization had no negative effects on growth performance,and did not improve environmentin thisrearing system,therefore itwassuggested disinfection measurescould be canceled when free-range birds reared in better condition.

free-range broilers; spray sterilization methods; growth performance; microorganism

S851.36

B

1673-1085（2016）10-0010-05

2016-09-20

*通訊作者。