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        中藥制劑中含量懸殊成分的分析方法探討

        2016-02-05 04:59:15高曉箏

        高曉箏

        中藥制劑中含量懸殊成分的分析方法探討

        高曉箏

        【摘要】目的分析研究中藥制劑中含量懸殊成分的分析方法。方法將柱切換結(jié)合程序進(jìn)樣技術(shù)成功應(yīng)用在黃芪注射液含量懸殊成分定量分析,對(duì)其定量結(jié)果給予分析研究。結(jié)果切換時(shí)間從0.3~5.0 min時(shí),黃芪甲苷峰面積基本沒(méi)有變化,然而切換時(shí)間≥1.5 min時(shí),雜質(zhì)峰干擾已經(jīng)大致消除,考慮縮短分析時(shí)間,選擇首次切換時(shí)間為1.5 min。結(jié)論柱切換程序進(jìn)樣技術(shù)不但可應(yīng)用在中藥中極性差異較大和含量相差懸殊的不同類成分同時(shí)定量分析,而且還適用于中藥中性質(zhì)相近含量懸殊的同類成分的定量分析。

        【關(guān)鍵詞】中藥制劑;含量;懸殊成分;分析方法

        Objective To analyze and study the methods for the analysis of the content of the great disparity in traditional Chinese medicine preparations.Methods The column switching technique was successfully applied to the quantitative analysis of the content of Astragalus injection.The quantitative results were analyzed and studied.Results For the switching time from 0.3 to 5 minutes,there was almost no change in peak area of astragaloside.However,switching time was more than or equal to 1.5 min,interference of impurity peak had been largely eliminated,consider shortening analysis time,first switching time for 1.5 minutes.Conclusion Column switching procedure into the technology not only can be application in traditional Chinese medicine in different polarity and content of great disparity of different kinds of components and quantitative analysis,but also can be used in traditional Chinese medicine in similar nature there is a big gap between the content of congener composition for quantitative analysis.

        【Key words】Chinese medicine,Content,Disparity component,Analysis methods

        現(xiàn)如今,中藥制劑的質(zhì)控手段大部分測(cè)定藥方中的主藥某種或者幾種高含量的有效成分或者指標(biāo)性成分,然而不能客觀的反映中藥制劑的內(nèi)在質(zhì)量。故要在發(fā)展懸殊成分的同時(shí)還可以定量分析新的技術(shù),需要建立一個(gè)可以反映多種含量懸殊有效成分的中藥制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[1]。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1儀器與試劑

        Agilent1100型高效液相色譜儀以及METTLERAE240型電子天平。另外,黃芪甲苷對(duì)照品、黃芪皂苷Ⅱ、異黃芪皂苷Ⅱ?qū)φ掌?;黃芪注射液;乙腈;甲酸以及超純水。

        1.2色譜條件

        預(yù)處理柱:AgilentSB-C18預(yù)柱;預(yù)處理流動(dòng)相;分析流動(dòng)相;進(jìn)樣程序以及進(jìn)樣量[2]。

        1.3樣品制備

        1.3.1對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備選取黃芪甲苷、黃芪皂苷Ⅱ、異黃芪皂苷Ⅱ?qū)φ掌贩謩e適量,精密稱定,加入甲醇溶解,同時(shí)稀釋成為每1 ml含黃芪甲苷、黃芪皂苷Ⅱ、異黃芪皂苷Ⅱ分別為1.97、0.119、0.102 mg的儲(chǔ)備液[3]。

        1.3.2供試品溶液制備選取黃芪注射液直接進(jìn)樣分析。

        1.4實(shí)驗(yàn)方法

        本文采取程序進(jìn)樣,首次進(jìn)樣時(shí)柱切換裝置處在與預(yù)處理柱連接的一個(gè)狀態(tài),吸取“供試品溶液”進(jìn)樣10μl,樣品進(jìn)入預(yù)處理柱,黃酮類等大極性化合物被三分之一乙腈洗脫流入到廢液中,黃芪皂苷類成分保留在預(yù)處理柱上,1.5 min后,柱切換裝置切換成為與分析柱連接的一個(gè)狀態(tài),分析流動(dòng)相將保留在預(yù)處理柱上的黃芪皂苷類組分反沖一直到分析柱中給予分離。進(jìn)入第二次進(jìn)樣程序,吸取“供試品溶液”100μl循環(huán)進(jìn)樣三次,樣品達(dá)到預(yù)處理柱,黃酮類等大極性物質(zhì)以及黃芪甲苷被三分之一乙腈洗脫流入廢液系統(tǒng)中,19.4 min后,分析流動(dòng)相把富集在預(yù)處理柱上的某些成分反沖至分析柱中,在分析柱上被分析流動(dòng)相分離檢測(cè),27.4 min后柱切換裝置切換成某一狀態(tài),預(yù)處理柱以乙睛進(jìn)行沖洗活化[4]。

        2 結(jié)果

        2.1第一次進(jìn)樣柱切換時(shí)間優(yōu)化

        切換時(shí)間≥1.5 min時(shí),雜質(zhì)峰干擾已經(jīng)大致消除,考慮縮短分析時(shí)間,選擇首次切換時(shí)間為1.5 min。

        2.2第二次進(jìn)樣預(yù)處理流動(dòng)相中乙腈比例

        當(dāng)乙腈比例為25%時(shí),樣品中的強(qiáng)極性成分以及黃芪甲苷殘留在預(yù)處理柱中,流入分析柱中形成相對(duì)比較大的平頭干擾峰。當(dāng)乙腈比例在30%時(shí),黃芪皂苷Ⅱ、異黃芪皂苷Ⅱ峰面積與25%的乙腈洗脫條件之下的峰面積沒(méi)有任何變化,可是當(dāng)乙腈比例≥35%時(shí),黃芪皂苷Ⅱ、異黃芪皂苷Ⅱ?qū)](méi)有辦法保留在預(yù)處理柱中,進(jìn)而達(dá)不到富集的目的。

        2.3第二次進(jìn)樣預(yù)處理流動(dòng)相中乙腈洗脫時(shí)間

        黃芪甲苷峰面積當(dāng)洗脫時(shí)間在7 min時(shí),黃芪皂苷Ⅱ開(kāi)始從預(yù)處理柱中被洗脫,峰面積逐漸開(kāi)始變小,因此,選擇乙腈沖洗時(shí)間為6 min。

        3 討論

        雖然中藥獨(dú)到的防病治病效果得到大家的一致認(rèn)可,可是中藥材種類相對(duì)較為繁多、加工炮制以及產(chǎn)地等相關(guān)因素的影響,對(duì)中藥的有效性以及安全性帶來(lái)較大影響[5]。

        根據(jù)相關(guān)實(shí)踐研究表明[6],柱切換高效液相色譜技術(shù)在初期就已經(jīng)開(kāi)展應(yīng)用,屬于一種在線固相分離技術(shù),經(jīng)常選擇使用3~5 cm的預(yù)處理柱,采取低溶劑強(qiáng)度的預(yù)處理流動(dòng)相,使生物樣品凈化以及富集。另外,分析流動(dòng)相將組分帶入到分析柱分離進(jìn)行測(cè)定,測(cè)定完畢以后儀器會(huì)自動(dòng)恢復(fù)開(kāi)始狀態(tài),準(zhǔn)備下一次進(jìn)樣[7]。本文筆者針對(duì)黃芪注射液給予柱切換程序進(jìn)樣技術(shù)在含量懸殊成分中藥制劑定量分析中的應(yīng)用研究,其驗(yàn)證了這種技術(shù)應(yīng)用于中藥復(fù)雜體系中濃度相差懸殊成分含量聯(lián)合測(cè)定的可行性,進(jìn)而為成分含量懸殊的中藥制劑提供一個(gè)全新的途徑[8]。

        本文結(jié)果顯示,切換時(shí)間從0.3~5 min時(shí),黃芪甲苷峰面積基本沒(méi)有變化,然而切換時(shí)間≥1.5 min時(shí),雜質(zhì)峰干擾已經(jīng)大致消除,考慮縮短分析時(shí)間,選擇首次切換時(shí)間為1.5 min,與上述相關(guān)實(shí)踐研究結(jié)果基本相同。

        綜上所述,柱切換程序進(jìn)樣技術(shù)不但可應(yīng)用在中藥中極性差異較大和含量相差懸殊的不同類成分同時(shí)定量分析,還適用于中藥中性質(zhì)相近含量懸殊的同類成分的定量分析。

        參考文獻(xiàn)

        [1]趙新鋒,祝忠民,劉愛(ài)芳,等.柱切換法在復(fù)方丹參滴丸中丹參素藥代動(dòng)力學(xué)研究中的應(yīng)用[J].中成藥,2004,26(6):490-492.

        [2]彭建梅,王世祥,謝巧娥.柱切換色譜法測(cè)定丹參注射液中隱丹參酮的含量[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2006,26(1):47-48.

        [3]裴渭靜,趙新鋒,胡震,等.采用柱切換色譜離子阱質(zhì)譜聯(lián)用法研究復(fù)方丹參滴丸中丹參素及其代謝產(chǎn)物[J].分析化學(xué),2005,33(4):505-508.

        [4]張?jiān)樱ζ浇?jīng),鄒漢法,等.雙柱切換色譜制備系統(tǒng)設(shè)計(jì)和實(shí)現(xiàn)[J].分析化學(xué),2001,29(11):1353-1356.

        [5]葉利民,李章萬(wàn),陳聰.高效液相色譜柱切換系統(tǒng)中系統(tǒng)峰受色譜條件的影響及其干擾的避免[J].色譜,2004,22(2):182.

        [6]代彩芹,袁杰.高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方丹參注射液中丹參素的含量[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2000,16(5):277-278.

        [7]蔡梅,季一兵,駱雪芳,等.高效液相色譜法測(cè)定香丹注射液中丹參素和原兒茶醛的含量[J].海峽藥學(xué),2004,16(3):54-55.

        [8]偶志紅,徐丹丹,郭薇.薄層層析一紫外分光光度法測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量[J].中華醫(yī)學(xué)研究雜志,2005,5(10):974-976.

        【中圖分類號(hào)】R286

        【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

        【文章編號(hào)】1674-9316(2016)11-0155-02

        doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2016.11.105

        作者單位:福建省漳州市皮膚病防治院制劑室,福建漳州363000

        Discussion on the Analysis Methods of Content Disparity in Chinese Medicinal Preparation

        GAO Xiaozheng Drug Manufacturing Room,Zhangzhou Skin Disease Prevention and Treatment Hospital,Zhangzhou Fujian 363000,China

        【Abstract】

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