張佳佳王 萍

乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性與乙肝DNA定量檢測(cè)相關(guān)性分析

張佳佳1王 萍2

目的 探討乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性與乙肝DNA定量檢測(cè)的相關(guān)性。 方法 采用ELISA 法檢測(cè)出156例乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性的標(biāo)本，并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)156例標(biāo)本進(jìn)行HBV-DNA檢測(cè)。結(jié)果 156例乙肝核心抗體（抗-HBC）單項(xiàng)陽(yáng)性患者標(biāo)本經(jīng)HBVDNA檢測(cè)，HBV-DNA大于1×103copy/ml為陽(yáng)性，陽(yáng)性標(biāo)本為11例，陽(yáng)性率為7%。結(jié)論 對(duì)于ELISA檢測(cè)乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性的患者，最好同時(shí)使用HBV-DNA進(jìn)行檢測(cè)，防止漏檢。

乙肝核心抗體；PCR；HBV-DNA

我國(guó)是乙肝的高發(fā)地區(qū)，攜帶乙肝病毒的人數(shù)可達(dá)1.2億人，乙型病毒性肝炎（乙肝）是我國(guó)危害最為嚴(yán)重的傳染病之一［1］。在乙肝病毒感染后，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生一系列的免疫應(yīng)答。由于個(gè)體免疫系統(tǒng)的差異，乙肝核心抗體（HBcAb）的濃度及在乙肝5項(xiàng)指標(biāo)中的陽(yáng)性模式分布不同，而乙肝核心抗體在區(qū)分人群HBV感染程度、分析和判斷患者病程是重要依據(jù)。乙肝五項(xiàng)檢測(cè)是檢驗(yàn)乙肝的常用方法，在乙肝五項(xiàng)檢測(cè)中常常發(fā)現(xiàn)有乙肝核心抗體（抗-HBC）單項(xiàng)陽(yáng)性的情況存在。本文通過近年156例乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性的患者標(biāo)本進(jìn)行乙肝DNA定量檢測(cè)來分析兩者之間的相關(guān)性。

1　資料與方法

1.1一般資料

收集2013年7月～2016年4月在我院就診，經(jīng)ELISA方法確認(rèn)乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性的患者156例，其中男性75例，女性81例，平均年齡為（52.0±3.4）歲，無臨床癥狀，沒有進(jìn)行任何醫(yī)療行為。每位患者行空腹抽血5 ml后，離心分離血清，保存于-20℃冰箱內(nèi)備用。

1.2儀器與試劑

美國(guó)ABI7300PCR擴(kuò)增儀，HBV-DNA試劑是中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供。乙肝兩對(duì)半試劑是由上?？迫A生物有限公司提供。

1.3數(shù)據(jù)分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析： 本次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)，采用百分?jǐn)?shù)表示，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

分別對(duì)156例乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性的患者進(jìn)行乙肝病毒含量檢測(cè)，HBV-DNA含量大于1×103copy/ml為陽(yáng)性，其中陽(yáng)性標(biāo)本為11例，陽(yáng)性率為7%。

3　討論

我國(guó)是乙肝的高發(fā)地區(qū)，約有10%是乙肝病毒攜帶者，其中嚴(yán)重的可發(fā)展成為重癥肝炎、肝硬化和原發(fā)性肝癌。人體感染乙肝病毒后，血清中最早出現(xiàn)的即是乙肝核心抗體（抗-HBC），該抗體是乙肝標(biāo)志性抗體。過去認(rèn)為，乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性的患者是處于乙肝恢復(fù)期，無傳染性。但隨著檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，尤其是HBV-DNA檢測(cè)的使用，此類患者可能被檢測(cè)出隱匿性HBV感染。HBV-DNA含量是乙肝最直接、最可靠的指標(biāo)，可判定體內(nèi)HBV病毒復(fù)制和傳染性［2］。根據(jù)有關(guān)資料表明，HBV處于恢復(fù)期時(shí)，HBV-DNA檢測(cè)出現(xiàn)低病毒量（即病毒復(fù)制量在1×103～9.9×104copy/ml時(shí)），提示有傳染的可能。

在乙肝檢測(cè)中，導(dǎo)致單項(xiàng)核心抗體陽(yáng)性的原因主要有以下幾種：（1）HBV早期感染，病毒載量較低。（2）ELISA未能檢出HbsAg等乙肝標(biāo)志物，其原因可能是HbsAg變異株所導(dǎo)致。（3）丙肝病毒的干擾導(dǎo)致導(dǎo)致HbsAg合成受到影響。（4）感染過大腸桿菌的患者，體內(nèi)出現(xiàn)大腸桿菌抗體，而大腸桿菌抗體所表達(dá)的重組抗原中混雜的菌體蛋白能與人源標(biāo)本及多克隆乙肝核心抗體酶標(biāo)記物中此種抗體結(jié)合而出現(xiàn)假陽(yáng)性［3］。（5）試劑盒試劑的原因和操作不當(dāng)產(chǎn)生的假陽(yáng)性［4］或有敏感性不高或高滴度導(dǎo)致乙肝表面抗原的等指標(biāo)的假陰性［5］。也有研究表明是與HBsAg突變有關(guān)［6］等。

在本次實(shí)驗(yàn)中，對(duì)156例乙肝核心抗體（抗-HBC）單項(xiàng)陽(yáng)性患者標(biāo)本經(jīng)HBV-DNA檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性為11例，陽(yáng)性率為7%。這說明在乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性患者中存在隱匿性HBV感染。這與國(guó)內(nèi)的一些報(bào)道相符合［7-9］。

綜上所述，對(duì)于LLISA檢測(cè)乙肝核心抗體單項(xiàng)陽(yáng)性的患者，最好同時(shí)使用HBV-DNA進(jìn)行檢測(cè)，以防止HBV感染漏檢。

［1］ 鐘世鎮(zhèn)，原林，唐雷，等. 數(shù)字化虛擬中國(guó)人女性一號(hào)（VCH—F1）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)集研究報(bào)告［J］. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，23（3）：196-200.

［2］ 駱抗先. 乙肝基礎(chǔ)與臨床［M］. 2版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：47-48.

［3］ 梁敏堅(jiān)，洪國(guó)強(qiáng)，李朝霞，等. 乙型肝炎病毒核心基因在畢赤酵母中的表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物在乙型肝炎核心抗體檢測(cè)中的應(yīng)用評(píng)價(jià)［J］. 中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2005，28（4）：417-422.

［4］ 馬有雄，馬金蓮，王桂英. 應(yīng)用ELISA檢驗(yàn)報(bào)告時(shí)確定灰區(qū)值的體會(huì)［J］. 青海醫(yī)藥雜志，2010，40（5）：21.

［5］ 謝琳，易鳴，高命. ELISA一步夾心法測(cè)定乙型肝炎表面抗原假陰性的原因及對(duì)策分析［J］. 現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)，2011，37（3）：211-212.

［6］ Launay O，Masurel J，Servant-Delmas A，et al. High levels of serum hepatitis B virus DNA in patients with‘a(chǎn)nti-HBc alone'：role of HBsAg mutants［J］. J Viral Hepat，2011，18（10）：721-729.

［7］ 周五一，方馳華，鐘世鎮(zhèn). 虛擬中國(guó)人女性一號(hào)肝臟數(shù)據(jù)集肝臟斷面圖像研究［J］. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，26（8）：711-713.

［8］ 葉賢林，曾昭鑒. 乙型肝炎病毒血液核酸篩查進(jìn)展［J］. 中國(guó)輸血雜志，2007，20（6）：537-540.

［9］ Nantachit N，Thaikruea L，Thongsawat S，et al. Evaluation of a multiplex human immunodeficiency virus-1，hepatitis C virus，and hepatitis B virus nucleic acid testing assay to detect viremic blood donors in northern Thailand［J］. Transfusion，2007，47（10）：1803-1808.

Correlation Analysis of HBV Core Antibody Single Positive and Quantitative Detection of Hepatitis B DNA

ZHANG Jiajia1WANG Ping21 Clinical Laboratory Department，The First Affiliated Hospital of He'nan Polytechnic University，Jiaozuo He'nan 454100，China，2 Hematology Department

Objective To explore correlation of the anti-HBC single positive with HBV DNA quantitative detection.Methods To use ELISA method to detect the specimens of 156 cases of single positive antibody of second liver core，use real-time fluorescent quantitative PCR technology in 156 cases of specimens for HBV - DNA testing. Results To test the 156 cases of hepatitis b core antibody（anti-HBC）single positive patient specimens by HBV - DNA testing，which HBV-DNA more than 1×103copy/ml was positive，positive specimens for 11 cases，positive rate was 7%. Conclusion To ELISA detection of anti-HBC single positive patients，best use HBV - DNA testing at the same time，to prevent leak.

Anti-HBC，PCR，HBV-DNA

R446.6

A

1674-9316（2016）18-0148-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2016.18.097

1 河南理工大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 焦作 454100；2血液科

張佳佳，E-mail：zjia0221@163.com