李虹瑾，李國(guó)江，沙萬(wàn)里，牛 偉，張秀峰，姜 成

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，長(zhǎng)春 130033；2.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院/預(yù)防獸醫(yī)學(xué)吉林省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林 132101）

鼻腔噴霧給藥防治豬萎縮性鼻炎的效果研究

李虹瑾1，李國(guó)江2※，沙萬(wàn)里2，牛 偉2，張秀峰2，姜 成2

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，長(zhǎng)春 130033；2.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院/預(yù)防獸醫(yī)學(xué)吉林省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林 132101）

從豬萎縮性鼻炎的病豬鼻腔內(nèi)分離和純化病原菌，通過(guò)藥敏試驗(yàn)篩選出對(duì)豬萎縮性鼻炎病原菌敏感的藥物，并通過(guò)鼻腔噴霧給藥、肌肉注射給藥和拌料給藥的方法防治豬萎縮性鼻炎。結(jié)果表明：通過(guò)鼻腔噴霧給藥的豬平均日增重顯著高于拌料組和肌肉注射組（P＜0.01）。說(shuō)明鼻腔給藥，藥物可直接作用于患部，療效迅速，方便快捷，是防治豬萎縮性鼻炎的最佳給藥途徑。

豬萎縮性鼻炎；肌肉注射；拌料給藥；鼻腔噴霧給藥；防治

豬萎縮性鼻炎是由支氣管敗血波氏桿菌和產(chǎn)毒素巴氏桿菌引起的慢性接觸性呼吸道傳染病。它以鼻炎、鼻中隔扭曲、鼻甲骨萎縮和病豬生長(zhǎng)緩慢為特征，臨床表現(xiàn)為噴嚏、流鼻涕、鼻塞、鼻出血、顏面部的變形或歪斜。哺乳仔豬感染本病后不但導(dǎo)致嚴(yán)重的鼻甲骨損害和萎縮性病變，還能引起全身鈣代謝障礙，導(dǎo)致仔豬生長(zhǎng)發(fā)育緩慢，飼料利用率降低，料肉比升高[1]。同時(shí)還增加感染其它呼吸道疾病的可能性，引起呼吸道疾病的爆發(fā)流行，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

豬萎縮性鼻炎的傳染源主要是患病豬和帶菌豬，傳播方式主要通過(guò)空氣傳播。萎縮性鼻炎在豬群中以水平方式傳播，一般呈地方性流行或散發(fā)，任何年齡的豬都可以感染本病，但以仔豬和保育豬最易感。誘發(fā)本病發(fā)生的因素很多，如圈舍通風(fēng)不良，陰冷潮濕，空氣污濁，飼養(yǎng)密度過(guò)大，飼料中的營(yíng)養(yǎng)缺乏，特別是飼料中的蛋白質(zhì)、維生素（主要是VA和VD）、微量元素（特別是鈣和磷）缺乏，容易誘導(dǎo)本病的發(fā)生。

對(duì)豬萎縮性鼻炎的防控目前主要通過(guò)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、疫苗接種和藥物防治三方面。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理主要通過(guò)制定科學(xué)合理的飼養(yǎng)管理措施，提供全價(jià)的營(yíng)養(yǎng)供給、舒適的環(huán)境衛(wèi)生條件等，從而使豬萎縮性鼻炎得到確實(shí)而有效的控制[2-3]；疫苗接種主要是根據(jù)豬場(chǎng)的實(shí)際情況選擇一種合適的疫苗進(jìn)行接種；藥物防治主要通過(guò)藥敏試驗(yàn)選出一種最敏感的藥物，制定合理的抗生素防治方案。本試驗(yàn)主要進(jìn)行鼻腔噴霧給藥防治豬萎縮性鼻炎的效果研究。

1 材料及方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 隨機(jī)抽取英白品種30頭健康無(wú)萎縮性鼻炎癥狀的英白哺乳仔豬和40頭有淚斑的英白保育豬作試驗(yàn)豬，均由吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院畜牧場(chǎng)提供。

1.1.2 培養(yǎng)基及試劑 本試驗(yàn)采用的培養(yǎng)基為實(shí)驗(yàn)室自制。新生牛血清（北京燕生政博生物科技有限責(zé)任公司，批號(hào)（Lot.No）100419）；細(xì)菌微量生化反應(yīng)管（杭州天和微生物試劑有限公司，批號(hào)為120213）。

1.1.3 試驗(yàn)藥品 痢特靈（批號(hào)為20110802），磺胺嘧啶鈉（批號(hào)為110604），硫酸慶大霉素注射液（批號(hào)為20111012），硫酸慶大霉素（批號(hào)為2011050101），土霉素原粉（批號(hào)為110708），注射用硫酸鏈霉素（批號(hào)為20120103），卡那霉素（批號(hào)為20110819），諾氟沙星（批號(hào)為20111011），四環(huán)素（批號(hào)為20111102）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 藥敏紙片的制作 按照紙片法藥敏試驗(yàn)抑菌環(huán)判斷標(biāo)準(zhǔn)中的藥物濃度來(lái)制作土霉素、磺胺嘧啶鈉、慶大霉素、卡那霉素等7種藥物的藥敏紙片，然后置于干燥箱內(nèi)37℃低溫干燥，干燥后密封置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 病料提取 將豬保定后，用75%的酒精棉將豬的鼻鏡徹底消毒。用無(wú)菌棉簽插入病豬的兩側(cè)鼻腔深部采取鼻腔分泌物，然后立即將鼻拭子裝入內(nèi)有改良馬丁肉湯培養(yǎng)基的小試管中，送往實(shí)驗(yàn)室做細(xì)菌分離鑒定。

1.2.3 細(xì)菌分離鑒定 （1）病原菌分離培養(yǎng)：將含有病料的改良馬丁肉湯培養(yǎng)基置于震蕩恒溫箱中37℃震蕩培養(yǎng)24h后，在無(wú)菌的條件下用鉑金耳取上述培養(yǎng)液將其劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上[4]，37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。然后分別挑取可疑菌落接種在血清培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基和痢特靈麥康凱培養(yǎng)基進(jìn)行純培養(yǎng)[5]。一種細(xì)菌在血瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后，生長(zhǎng)成淡灰白色、邊緣整齊、表面光滑、閃光的露珠樣的小菌落。在麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。另一種細(xì)菌在血瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后，出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，在血清培養(yǎng)基上生長(zhǎng)成圓形隆起，光滑閃光的奶樣的小菌落，在麥康凱培養(yǎng)基上菌落無(wú)色或微紅，周圍有紅圈，在含有痢特靈的麥康凱培養(yǎng)基上菌落呈茶色，中心較厚，呈茶黃色[6-7]。挑取兩種疑似菌落，分別做美蘭染色和革蘭氏染色。鏡下觀察，美蘭染色二者均為兩極濃染的小桿菌，革蘭氏染色二者均是呈兩極濃染的革蘭氏陰性的小桿菌。（2）生化試驗(yàn)：將以上純化的病原菌分別接種于細(xì)菌微量反應(yīng)管中[8-9]，進(jìn)行生化鑒別試驗(yàn)。結(jié)果顯示:一種細(xì)菌能分解葡萄糖、甘露醇、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖和麥芽糖，觸酶、氧化酶、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶、吲哚為陽(yáng)性，尿素酶、甲基紅、V-P為陰性，鑒定為巴氏桿菌；另一種細(xì)菌不能分解碳水化合物，觸酶、尿素酶、谷氨酸脫羧酶、硝酸鹽還原、檸檬酸鹽利用為陽(yáng)性，氧化酶為弱陽(yáng)性，吲哚為陰性，鑒定為支氣管敗血波氏桿菌。見(jiàn)表1、表2。

表1 細(xì)菌生化試驗(yàn)鑒定結(jié)果

表2 細(xì)菌生化試驗(yàn)鑒定結(jié)果

1.2.4 藥敏試驗(yàn) 選出7種常用于治療豬萎縮性鼻炎的藥物[10]，分別是慶大霉素、卡那霉素、四環(huán)素、土霉素、磺胺嘧啶鈉、諾氟沙星、鏈霉素，通過(guò)藥敏試驗(yàn)選出一種最敏感的藥物。見(jiàn)表3。

表3 巴氏桿菌和支氣管敗血波氏桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果

由表3可知，該場(chǎng)豬萎縮性鼻炎的病原菌對(duì)慶大霉素最為敏感，所以，選用慶大霉素作為該場(chǎng)防治豬萎縮性鼻炎的藥物。

1.2.5 預(yù)防試驗(yàn) （1）試驗(yàn)動(dòng)物分組：隨機(jī)選取7日齡、體重接近、無(wú)豬萎縮性鼻炎癥狀的英白仔豬30頭，按照仔豬的耳號(hào)順次平均分為三組，每組10頭。Ⅰ組、Ⅱ組為試驗(yàn)組，Ⅲ組為空白對(duì)照組。（2）給藥方法：應(yīng)用篩選出的最敏感藥物慶大霉素進(jìn)行預(yù)防試驗(yàn)，Ⅰ組通過(guò)鼻腔噴霧給藥，首先將豬的頭部固定，鼻鏡消毒后將100mL噴霧器的噴頭對(duì)準(zhǔn)仔豬的鼻孔，稍稍與鼻中隔呈一定角度噴霧給藥，每側(cè)鼻孔噴2次（噴霧器每噴6次約為1mL，20mg）。噴藥后將仔豬的頭稍稍抬高約1min，連用7d。Ⅱ組肌肉注射給藥，一次劑量10mg/kg體重，每天2次，連續(xù)用藥7d。Ⅲ組不給藥，作對(duì)照組。（3）觀測(cè)指標(biāo)：①試驗(yàn)期間觀察試驗(yàn)仔豬有無(wú)淚斑，并作好記錄。②仔豬試驗(yàn)前后分別稱體重，同時(shí)觀測(cè)各組飼料消耗量，并作好記錄。

1.2.6 治療試驗(yàn) （1）試驗(yàn)分組：選取30日齡，體重接近，有淚斑的英白仔豬40頭。隨機(jī)分成四組，每組10頭，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組為試驗(yàn)組，Ⅶ組為對(duì)照組，分欄飼養(yǎng)。（2）給藥方法：應(yīng)用篩選出的最敏感藥物慶大霉素進(jìn)行治療試驗(yàn)，Ⅳ組通過(guò)鼻腔噴霧給藥，方法與Ⅰ組相同，給藥劑量增至每側(cè)鼻孔噴4次。Ⅴ組通過(guò)肌肉注射給藥，方法與Ⅱ組相同，給藥劑量增至一次劑量20mg/kg體重，每天2次，連續(xù)用藥7d。Ⅵ組通過(guò)拌料給藥，按0.05%的比例添加。Ⅶ組不給藥，作對(duì)照組。（3）觀測(cè)指標(biāo)：仔豬試驗(yàn)前、后分別稱體重，同時(shí)觀測(cè)各組飼料消耗量，并做好記錄。

2 結(jié)果

2.1 預(yù)防試驗(yàn)結(jié)果

7d后觀察到鼻腔噴霧給藥組有1頭仔豬發(fā)現(xiàn)有淚斑。肌肉注射組有3頭仔豬發(fā)現(xiàn)有淚斑，對(duì)照組有6頭仔豬發(fā)現(xiàn)有淚斑。各組飼料消耗無(wú)顯著差異（P＞0.05）。預(yù)防試驗(yàn)各組仔豬飼料消耗無(wú)顯著差異，增重結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 7～28日齡仔豬增重情況

2.2 治療試驗(yàn)結(jié)果

治療試驗(yàn)各組仔豬飼料消耗無(wú)顯著差異，增重情況見(jiàn)表5。

表5 30～61日齡仔豬增重情況

2.3 數(shù)據(jù)分析

根據(jù)表4、表5的結(jié)果，通過(guò)方差分析，表明預(yù)防試驗(yàn)和治療試驗(yàn)中鼻腔噴霧給藥組的平均增重顯著高于其他試驗(yàn)組（P＜0.01）。

3 討論與分析

3.1 濫用抗菌素會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的耐藥現(xiàn)象

本研究中，對(duì)分離到的產(chǎn)毒素巴氏桿菌和支氣管敗血波氏桿菌[11-12]，用慶大霉素、卡那霉素、四環(huán)素、土霉素、磺胺嘧啶鈉、諾氟沙星、鏈霉素等7種抗菌素進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)土霉素、磺胺嘧啶鈉、諾氟沙星、鏈霉素表現(xiàn)明顯耐藥。經(jīng)調(diào)查得知，該豬場(chǎng)平時(shí)經(jīng)常使用這幾種抗菌素，造成了致病菌的耐藥。因此，豬場(chǎng)要根據(jù)藥敏試驗(yàn)有針對(duì)性地選用抗生素防治疾病。

3.2 科學(xué)的給藥方法決定防治效果

試驗(yàn)結(jié)果表明，鼻腔噴霧給藥組仔豬平均增重明顯高于對(duì)照組及其他給藥組（P＜0.01）。分析認(rèn)為，鼻腔噴霧給藥，藥物直接到達(dá)病變部位發(fā)揮作用，確保了到達(dá)患部的藥物濃度，藥效迅速確實(shí)。而注射及拌料給藥，要經(jīng)過(guò)消化吸收入血液并輸送至患部的過(guò)程，降低了藥物的效果。

3.3 豬傳染性萎縮性鼻炎是危害養(yǎng)豬業(yè)的“隱形”殺手

豬萎縮性鼻炎很少引起豬的死亡，但卻能明顯影響豬的生長(zhǎng)發(fā)育，降低飼料的利用率，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。然而這種“隱形”的損失往往被養(yǎng)殖者忽視，導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)效益下降。因此，必須加強(qiáng)對(duì)豬萎縮性鼻炎的防控工作。

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責(zé)任編輯：吳艷玲

Effective Research of Prevention and Treatment of Swine Atrophic Rhinitis with Nasal Spray

LI Hongjin1,LI Guojiang2,SHA Wanli2,NIU Wei2,ZHANG Xiufeng2,JIANG Cheng2
(1.Jilin Agriculture University,Changchun 130033;2.Jilin Agricultural Science and Technology University School of Animal Science and Technology/Key Lab of Preventive Veterinary Medicine in Jilin Province,Jilin 132101)

Pathogens were separated and purified from nasal cavity of the sick pigs from swine atrophic rhinitis.The methods of nasal spray,muscle injection,mixing materials with drugs were explored in this study. The results showed that average daily gain was significantly higher than others by nasal spray(P＜0.01).Nasal spray was the best method for the prevention and control of swine atrophic rhinitis.

pig atrophic rhinitis;muscle injection;mixing materials with drugs;nasal spray;prevention and treatment

S858.28

A

2016-08-13

吉林省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目資助（2010243）；吉林省科技廳發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（20150623004TC）

李虹瑾（1989-），男，吉林省榆樹(shù)市人，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)2016級(jí)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)碩士研究生，研究方向：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)。

※為本文通訊作者