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GeXP分析儀：7種豬病原體的多重PCR檢測

基于GenomeLab Gene Expression Profiler (GeXP)分析儀，一種新的高通量方法被提出，即利用多重PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）可實現(xiàn)同時對豬7種病原體的檢測。該方法可檢測的病原體包括：偽狂犬病毒（PRV）、豬瘟病毒（CSFV）、非洲豬瘟病毒（ASFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬細小病毒（PPV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）和日本腦炎病毒（JEV）。

7對嵌合引物，由病原體的特異性序列融合到一個通用序列的5'端，用于啟動PCR，之后一套通用引物被用于后續(xù)的聚合酶鏈式反應(yīng)。擴增產(chǎn)物用毛細管電泳分離，并用熒光分光光度法測定。該研究采用單一和混合病原體的cDNA 和DNA模板對分析儀的特異性進行檢測，GeXP分析儀檢測到7種病原菌的特異性DNA產(chǎn)物擴增峰，且在對照組未檢測到DNA擴增產(chǎn)物。采用對含有病原體特異序列的質(zhì)粒進行10倍濃度稀釋的研究方法，檢測(GeXP)分析儀的靈敏度，結(jié)果表明：在優(yōu)化條件下，以單一病原體樣品為模板，該試驗的靈敏度為100～1 000拷貝/μL；以7種病原體混合樣品為模板，試驗靈敏度為1 000拷貝/μL。此外，與常規(guī)PCR方法相比，GeXP-PCR分析儀檢測58個臨床樣品的特異性為100%?？傊摲椒焖?、經(jīng)濟、靈敏度高、特異性強，并能實現(xiàn)同時對7種豬病原體的高通量檢測。

（編譯自：http：//www.sciencedirect.com/science/ article/pii/S0166093415003882）