附件1

臨床血脂測定建議

血脂測定是血脂異常防治的重要組成部分,測定結果準確是有效開展血脂異常防治工作的基本要求。多種因素影響血脂測量結果的準確性,包括受試者和標本情況、測定方法、儀器試劑、測定操作等?，F(xiàn)根據(jù)中華醫(yī)學會檢驗醫(yī)學分會有關建議和我國有關行業(yè)或國家標準,考慮我國目前血脂測定實際情況,綜合中國成人血脂異常防治指南修訂聯(lián)合委員會的意見,就血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白(Apo) A1、Apo B及脂蛋白(a)[Lp(a)]等血脂項目的測定提出建議,以促進我國血脂測定進一步規(guī)范化與標準化,保障血脂異常防治工作的有效開展。

1 受試者準備及標本采集與處理

許多分析前因素會影響血脂水平,主要包括:生物學因素,如個體間、性別、年齡和種族;行為因素,如飲食、肥胖、吸煙、緊張、飲酒、飲咖啡和鍛煉等;臨床因素,如(1) 疾病繼發(fā)(內(nèi)分泌或代謝性疾病、腎臟疾病、肝膽疾病及其他),(2) 藥物誘導(抗高血壓藥,免疫抑制劑及雌激素等);標本收集與處理,如禁食狀態(tài)、血液濃縮、抗凝劑與防腐劑、毛細血管與靜脈血、標本貯存等。建議采取以下措施減少可控分析前因素對血脂檢測結果的影響:

① 采集標本前受試者處于穩(wěn)定代謝狀態(tài),至少2周內(nèi)保持一般飲食習慣和穩(wěn)定體重。

② 采集標本前受試者24 h內(nèi)不進行劇烈身體活動。

③ 采集標本前受試者禁食約12 h.

④ 用靜脈血作血脂測定標本,抽血前受試者坐位休息至少5min,除特殊情況外,受試者取坐位接受抽血。

⑤ 靜脈穿刺時止血帶使用不超過1min.

⑥ 血液標本保持密封,避免震蕩。

⑦ 用血清作血脂分析樣品,血液標本在1～2 h內(nèi)離心,分離血清(含促凝劑采血管可在更短時間內(nèi)離心)。

⑧ 及時分析血清樣品,盡量避免樣品存放,若必須儲存,需保持樣品密封,短期 (3天內(nèi)) 可存于4℃,長期需存于-70℃以下。

2 測定方法選擇

血脂測定各方法原理不同,分析性能、易操作性和分析成本也有差異,血脂常規(guī)測定應酌情選擇合適的測定方法。

2.1血清TC測定

血清TC測定方法包括化學法、色譜法和酶法等,其中酶法最為簡便、易自動化、分析性能良好,是目前TC常規(guī)測定普遍使用的方法。其他方法目前僅用于某些特殊情況(如特定化學法和色譜法用作參考方法)。建議采用酶法進行血清TC常規(guī)測定。

2.2血清TG測定

血清TG測定方法包括化學法、色譜法和酶法等,酶法同樣是目前普遍采用的TG常規(guī)測定方法。目前多數(shù)TG酶法測定的是總甘油,部分酶法扣除游離甘油。建議采用酶法進行血清TG常規(guī)測定,一般可使用總甘油測定方法,必要時應考慮使用可消除游離甘油影響的測定方法。

2.3血清HDL-C測定

血清HDL-C測定曾出現(xiàn)過許多方法,大致可分為超速離心法、電泳法、色譜法,沉淀法、勻相法等。早期HDL-C常規(guī)測定主要采用的是沉淀法,經(jīng)嚴格論證的沉淀法可實現(xiàn)較高的分析特異性,但其主要缺點是需預先對標本進行沉淀、離心等處理,結果易受高TG的影響。目前HDL-C常規(guī)測定的主要方法為勻相法,包括清除法、PEG修飾酶法、選擇性抑制法、免疫分離法等,勻相法的最大優(yōu)點是使用方便,不需樣品處理,分析性能良好,但部分方法可能存在特異性問題。建議采用勻相法進行血清HDL-C常規(guī)測定。

2.4血清LDL-C測定

血清LDL-C測定方法包括超速離心法、電泳法、色譜法、公式計算法、沉淀法、勻相法等,常規(guī)采用的主要方法為公式計算法、沉淀法和勻相法。公式計算法曾是國際上使用最普遍的LDL-C測定方法,目前在部分國家仍被廣泛使用。此法常用公式是Friedewald公式:LDL-C= TC-HDL-C- TG/5(mg/dl)或LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2(mmol/L)。其最大的優(yōu)點是無需檢測、計算簡便,在TG低于2.8 mmol/L(250 mg/dl)的情況下有一定的可靠性;局限性是不能用于TG>4.5 mmol/L(TG> 400 mg/dl)或某些異常脂蛋白血癥的標本,LDL-C結果的可靠性受TC、TG和HDL-C 3項指標測定質量的影響。部分國家曾用沉淀法測定LDL-C,但因其特異性有限且操作繁瑣,應用不甚廣泛。勻相法是我國目前測定LDL-C的主要方法,包括清除法、杯芳烴法、可溶性反應法和保護性試劑法等,這類方法使用方便,可分析高TG樣品,但部分方法可能存在特異性問題。建議常規(guī)采用勻相法測定LDL-C。

2.5血清Apo A1、Apo B和Lp(a)測定

血清Apo A1、Apo B 和Lp(a)測定基本上基于免疫化學原理。早期測定多采用免疫電泳法、免疫擴散法、放射免疫法和酶聯(lián)免疫吸附法等,這些方法操作復雜,分析性能有限,現(xiàn)已很少使用。目前主要采用免疫比濁法,包括透射比濁法和散射比濁法,這些方法使用方便,分析性能良好,部分Lp(a)測定方法可能存在較明顯的特異性問題。建議采用免疫比濁法常規(guī)測定血清Apo A1、Apo B 和Lp(a)。

3 分析系統(tǒng)選擇

上述方法所需運行的特定儀器、試劑和校準物及其工作參數(shù)等稱為分析系統(tǒng)。目前血脂常規(guī)測定普遍采用商品儀器、試劑和校準物,品牌眾多,因此同一方法下可有眾多分析系統(tǒng)。不同分析系統(tǒng)的分析性能常不同,因此選擇可靠的分析系統(tǒng)是保證血脂分析質量的關鍵。

3.1分析系統(tǒng)類型

按分析儀器的自動化程度,可分為全自動(全自動生化分析儀)、半自動(半自動分析儀)和手工(分光光度計)分析系統(tǒng)。半自動和手工分析系統(tǒng)除包括分析儀器、試劑和校準物外,還包括移液和溫育等設備或器具。目前我國絕大多數(shù)臨床實驗室使用全自動分析系統(tǒng),少數(shù)小型實驗室可能使用半自動分析系統(tǒng)。自動化程度越高,影響因素越少。建議采用全自動分析系統(tǒng)進行血脂常規(guī)測定,適宜時可使用半自動分析系統(tǒng)。

按儀器、試劑和校準物來源,分析系統(tǒng)可分為3種:(1)封閉系統(tǒng):儀器、試劑和校準物來自同一廠商,配套使用,工作參數(shù)內(nèi)置。(2)開放系統(tǒng):試劑和校準物來自同一廠商,配套使用,儀器另選,參數(shù)一般由試劑廠商提供。(3)組合系統(tǒng):儀器、試劑和校準物來自不同廠商或機構,由實驗室自己組合并建立工作參數(shù)。目前在我國3種分析系統(tǒng)均廣泛應用,可根據(jù)實驗室具體情況進行選擇。

3.2分析系統(tǒng)質量技術指標

所選用的分析系統(tǒng)應符合下列質量技術指標。

3.2.1精密度、正確度和準確度

精密度指在多次獨立檢驗分析中重復分析同一樣品所得結果的一致程度,反映分析系統(tǒng)的隨機誤差,用變異系數(shù)表示。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB和Lp(a)測定的變異系數(shù)應分別小于3%、5%、4%、4%、3%、3%和4%。

正確度指在多次獨立檢驗分析中重復分析同一樣品所得結果的均值與靶值的差異,反映分析系統(tǒng)的系統(tǒng)誤差,用偏倚(B)表示。靶值一般指參考(標準)物質定值或參考方法測定值。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB和Lp(a)測定的偏倚應分別在±3%、±5%、±5%、±4%、±5%、±5%和±10%范圍內(nèi)。

準確度指在多次獨立檢驗分析中單次分析多個代表性樣品所得結果與靶值的最大差異,用總誤差表示。靶值一般指參考方法或其他可靠方法的測定值。在分析系統(tǒng)特異性良好的前提下,準確度由精密度和正確度決定(用公式表示為:總誤差 =偏倚絕對值+ 1.96X變異系數(shù))。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C測定的總誤差應分別小于9%、15%、13%和12%。

精密度、正確度和準確度,尤其準確度是分析系統(tǒng)的主要分析質量指標。目前我國絕大多數(shù)血脂分析系統(tǒng)精密度良好,部分分析系統(tǒng)可能存在正確度和準確度問題。

3.2.2特異性

特異性是影響準確度的重要因素。分析系統(tǒng)應具備只作用于目標血脂指標、不受其他血清成分影響的能力。目前我國TC和TG分析系統(tǒng)特異性良好,部分脂蛋白和載脂蛋白分析系統(tǒng)可能存在特異性問題。

3.2.3校準

校準是正確度的決定因素。分析系統(tǒng)校準物的定值應使臨床標本測定結果可溯源到已有的參考系統(tǒng)。

3.2.4檢測范圍

分析系統(tǒng)檢測范圍應至少覆蓋下列血脂范圍:TC: 2～10 mmol/L,TG:0.3～10.0 mmol/L,HDL-C:0.3～2.5 mmol/L, LDL-C:0.5～7.0 mmol/L,Apo A1:0.5～2.0g/L,Apo B:0.5～2.0g/L, Lp(a):5～800 mg/L。

3.3分析系統(tǒng)性能驗證

任何新選用的分析系統(tǒng),在用于臨床樣品檢驗前,均應進行性能驗證,以保證分析系統(tǒng)性能符合上述質量技術指標。具體驗證方法可參閱有關行業(yè)標準或文獻。

3.4血脂分析

使用經(jīng)過驗證的分析系統(tǒng)進行臨床標本的血脂分析,按分析系統(tǒng)或試劑說明書規(guī)定的程序進行分析操作。

4 質量控制和保證

臨床實驗室應規(guī)定血脂測定各主要環(huán)節(jié)的工作條件和程序,血脂測定應按規(guī)定進行。

我國醫(yī)療機構中標本采集和檢驗分析工作多分屬不同部門,部門間應密切溝通,保證相關工作程序的有效實施,盡量減小分析前因素對血脂測定的影響。

臨床實驗室應根據(jù)工作經(jīng)驗、行業(yè)交流、科學文獻等選用性能可靠的血脂測定方法和分析系統(tǒng)(主要是試劑和校準物品牌)。應盡量保持使用同種分析系統(tǒng),不宜隨意、頻繁更換。

臨床實驗室應進行內(nèi)部質量控制。質控品應適宜血脂分析,足夠均勻、穩(wěn)定,濃度在主要醫(yī)學決定水平附近,至少有兩個水平;應盡量長期保持使用同種質控品,不宜頻繁更換;每批檢驗分析至少分析一次質控品。

臨床實驗室應定期參加國家或地區(qū)認可的室間質量評價計劃。

5 結果報告與解釋

臨床實驗室應以我國法定計量單位(mmol/L)報告TC、TG、HDL-C、LDL-C測定結果,需要時,可另外給出傳統(tǒng)單位(mg/dl)結果。

血脂檢驗報告應注明我國血脂異常防治指南規(guī)定的主要醫(yī)學決定水平。

對血脂測定結果的解釋,需考慮分析變異、個體內(nèi)生物學變異的影響,血脂結果在醫(yī)學決定水平附近時,需根據(jù)多次血脂測定結果做出判斷。