邢維山孔繁勇王 研林黎娟，*

（1 丹東市第一醫(yī)院腫瘤科，遼寧 丹東 118000；2 遼東學院醫(yī)學院分子醫(yī)學研究室，遼寧 丹東 118003）

DEK和Ki-67表達對伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的預(yù)測價值

邢維山1孔繁勇2王 研2林黎娟1，2*

（1 丹東市第一醫(yī)院腫瘤科，遼寧 丹東 118000；2 遼東學院醫(yī)學院分子醫(yī)學研究室，遼寧 丹東 118003）

目的 探討DEK和Ki-67蛋白表達對伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌療效的預(yù)測價值。方法 44例轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌（CRC）術(shù)后患者，給予伊立替康+5-FU+亞葉酸治療；免疫組化檢測其DEK和Ki-67蛋白表達情況。結(jié)果 44例患者中DEK和Ki-67表達明顯相關(guān)；DEK和Ki-67陽性表達的患者化療后總有效率分別明顯低于陰性者；DEK和Ki-67陽性患者中位生存時間也均明顯低于陰性表達者。結(jié)論 DEK和Ki-67檢測對伊立替康治療轉(zhuǎn)移性CRC具有較好的預(yù)后預(yù)測價值。

DEK；Ki-67；伊立替康；CRC；轉(zhuǎn)移性；預(yù)測

結(jié)直腸癌（CRC）是常見的惡性腫瘤之一，全球年發(fā)病例數(shù)超萬［1-2］。DEK和Ki-67均是衡量腫瘤增殖活性的癌基因；有研究表明，DEK和腫瘤的化療抵抗明顯相關(guān)，而Ki-67被認為是判斷結(jié)直腸癌化療療效及預(yù)后的重要指標［3］。伊立替康為主的治療方案對晚期CRC的生存期有明顯改善，使其成為治療轉(zhuǎn)移性的CRC的關(guān)鍵藥物［4］。本研究旨在探討DEK和Ki-67蛋白對伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌療效的預(yù)測價值。

1　材料與方法

1.1一般資料：收集丹東市第一醫(yī)院2010年1月至2015年5月的確診為轉(zhuǎn)移性CRC的患者44例，男性32例，女性12例，年齡27～81歲；直腸癌19例，結(jié)腸癌25例。轉(zhuǎn)移部位有肝臟、肺、骨、盆腔、腎上腺和淋巴結(jié)等。所有患者術(shù)前均未經(jīng)放療和化療，有可測量的病灶，治療前肝、腎和骨髓功能正常，所有患者隨診18個月。

1.2用藥方案：第1天鹽酸伊立替康180 mg/m2和亞葉酸300 mg/m2持續(xù)靜脈滴注，第l～5天5-FU 600 mg/m2靜脈滴注，4周重復(fù)1次，共使用6個周期?；熐笆褂酶窭弓傊雇拢准毎陀?×109/L時，使用重組人粒細胞集落刺激因子治療，腹瀉時用易蒙?；驃W曲肽治療。用藥后每周觀察血常規(guī)和肝、腎功能及胃腸道不良反應(yīng)等。

1.3免疫組化SP法進行免疫組化檢測：組織蠟塊消除內(nèi)源性過氧化物酶，3%過氧化氫溶液和甲醇室溫下孵化15 min，0.01 mol/L檸檬酸鈉緩沖20 min的抗原修復(fù)。DEK（美國BD）和ki-67（丹麥Dako）抗體4 ℃過夜后二抗體孵化30 min，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，中性樹膠封固。DEK和Ki-67均為核表達。陽性細胞數(shù)＜5%示為陰性，陽性細胞數(shù)≥5%為陽性。

1.4療效評定：采用RECIST1.0標準進行療效評定［5］。目標病灶消失為完全緩解（CR）；基線病灶長徑總和縮小≥30%為部分緩解（PR）；基線病灶長徑總和增加≥20%或出現(xiàn)新病灶為疾病穩(wěn)定（PD）；基線病灶長徑總和有縮小但未達PR或有增加但未達PD為疾病進展（SD）。CR+PR計算有效率。

1.5統(tǒng)計學分析：利用SPSS17.0統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料以%表示，組間比較采用t檢驗，采用Spearman進行相關(guān)性分析，以P＜0.05為差異顯著。

2　結(jié) 果

2.1DEK和Ki-67在轉(zhuǎn)移性CRC中的表達及其相關(guān)性：免疫組化結(jié)果顯示，21例CRC組織呈DEK陽性表達，23例呈陰性表達，17例呈Ki-67陽性表達，27例呈陰性表達；Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，44例CRC組織中DEK和Ki-67蛋白表達呈明顯相關(guān)性（P=0.011）。

2.2DEK和Ki-67表達與治療效果的相關(guān)性：44例轉(zhuǎn)移性CRC患者經(jīng)藥物治療后，CR 6例，PR 17例，PD 15例，SD 6例，總有效率為52.3%（23/44）。21例DEK陽性表達的CRC患者化療后總有效率為38.1%（8/21），明顯低于DEK陰性表達的患者65.2%（15/23）；同樣Ki-67陽性表達的CRC患者化療的總有效率23.5%（4/17）也明顯低于陰性表達者70.4%（19/27）。以上結(jié)果說明DEK和Ki-67蛋白對CRC的化療療效有預(yù)測價值。

2.3DEK和Ki-67蛋白表達與治療后生存期的關(guān)系：44例轉(zhuǎn)移性CRC患者治療后的中位生存時間為（7.81±5.21）個月，其中，DEK陽性患者為（6.43±3.94）個月，DEK陰性患者為（9.33±3.62）個月，前者總生存期明顯低于后者（P=0.033）；Ki-67陽性患者為（6.78±3.49）個月，Ki-67陰性患者為（9.47±4.36）個月，前者總生存期明顯低于后者（P=0.038）。

3　討 論

盡管有了先進的化、放療技術(shù)輔助手術(shù)切除治療，CRC患者生存質(zhì)量及5年生存率仍很低。鹽酸伊立替康是喜樹堿衍生物，相比喜樹堿有較高的水溶性，可在體內(nèi)代謝為具有生物活性的7-乙基-10-羥基喜樹堿，具有廣譜抗腫瘤活性。1996年，伊立替康在美國首次獲批用于治療5-FU難以控制的轉(zhuǎn)移性CRC，隨后獲批為聯(lián)合5-FU/LV治療轉(zhuǎn)移性CRC的一線藥物。臨床試驗表明，伊立替康為主的治療方案對轉(zhuǎn)移性CRC患者的生存期有明顯改善，使其成為治療轉(zhuǎn)移性的CRC的關(guān)鍵藥物。

原癌基因DEK是一個新發(fā)現(xiàn)的DNA拓撲結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)因子，為高度保守的可磷酸化的核蛋白，優(yōu)先表達于增殖活躍的惡性細胞［6］。該基因在多種惡性腫瘤中過表達，對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及抗藥性具有明顯的作用。作為能夠結(jié)合多種染色質(zhì)、具有多重功能的細胞因子，DEK可能在細胞中因其干擾作用而導(dǎo)致嚴重的不良反應(yīng)。增殖標記抗原Ki-67是增殖細胞在G1、G2和M階段表達的基因，常常被用作腫瘤擴散和攻擊性的標記，對CRC患者的預(yù)后有重大影響；Ki-67也是衡量腫瘤增殖活性的判斷大腸癌患者化療療效及預(yù)后的重要指標。在本項研究中發(fā)現(xiàn)，DEK在轉(zhuǎn)移性CRC組織的表達與Ki-67之間呈正相關(guān)。

研究顯示，伊立替康聯(lián)合5-FU/亞葉酸鈣治療31例轉(zhuǎn)移性大腸癌中直腸癌患者有效率41.67%，結(jié)腸癌患者有效率27.78%。我院采用伊立替康聯(lián)合5-FU/亞葉酸本方案治療44例轉(zhuǎn)移性CRC患者的有效率為52.3%，其治療效果更為明顯；另外，DEK與Ki-67陽性患者中位生存時間均高于陰性患者，前者總生存率均明顯低于后者。因此，DEK和Ki-67在伊立替康治療轉(zhuǎn)移性CRC具有較好的預(yù)后預(yù)測價值。

［1］Lin L，Piao J，Gao W，et al.DEK over expression as an independent biomarker for poor prognosis in colorectal cancer［J］.Bmc Cancer，2013，13（3）：771.

［2］萬德森.結(jié)直腸癌流行病學與預(yù)防［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2011，17（1）：3-7.

［3］Guillemette C，Lévesque é，Rouleau M.Pharmacogenomics of Human Uridine Diphospho-Glucuronosyltransferases and Clinical Implications［J］.Clin Pharmacol Therapeut，2014，96（3）：324-339.

［4］Loupakis F，Cremolini C，Masi G，et al.Initial therapy with FOL FOXIRI and bevacizumab for metastatic colorectal cancer［J］.N Engl J Med，2014，371（17）：1609-1618.

［5］陳耐華.RECIST1.1標準和RECIST1.0標準對大腸癌肝轉(zhuǎn)移療效評價的比較［J］.中國當代醫(yī)藥，2015，22（32）：63-65.

［6］王璇，黃紹輝，於麗喬，等.DEK原癌基因與口腔鱗狀細胞癌的關(guān)系［J］.上?？谇会t(yī)學，2014，23（1）：75-79.

R735.3+7

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1671-8194（2016）26-0106-02