肖志輝 王萍 張少俊

·實(shí)驗(yàn)研究·

HPLC法測(cè)定卡巴拉汀貼劑藥物含量及其體外釋放量

肖志輝 王萍 張少俊

目的探究運(yùn)用高效液相色譜(HPLC)法測(cè)定卡巴拉汀貼劑中的藥物含量及其體外透皮釋放量的效果。方法通過(guò)HPLC法測(cè)定卡巴拉汀貼劑以及卡巴拉汀藥劑中的藥物含量,同時(shí)選取離體豚鼠皮膚作為透皮屏障實(shí)驗(yàn)樣本,分析卡巴拉汀透皮貼劑實(shí)際具備的體外透皮性能。結(jié)果卡巴拉汀在9.68～116.31 μg/ml的濃度范圍內(nèi)具備較好的線性關(guān)系檢出特征,其檢出限為0.16 μg/ml,精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)測(cè)算范圍為0.12%～0.47%,在低、中以及高濃度等級(jí)條件下的平均測(cè)算回收率分別為98.78%、98.52%以及98.86%。體外透皮試驗(yàn)條件下獲取的描述曲線方程符合方程屬性特征。結(jié)論運(yùn)用HPLC法測(cè)定卡巴拉汀貼劑中的卡巴藥物含量,并運(yùn)用離體豚鼠皮膚作為屏障檢測(cè)卡巴拉汀貼劑中有效藥物成分的體外透皮釋放量,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)卡巴拉汀藥物疾病藥理運(yùn)用特征以及釋放效能狀態(tài)的清晰評(píng)估,為臨床藥師開(kāi)展卡巴拉汀貼劑的臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)支持條件。

高效液相色譜法；卡巴拉汀貼劑；藥物含量；體外透皮釋放量

本研究針對(duì)卡巴拉汀貼劑中的卡巴拉汀成分含量以及體外透皮釋放量開(kāi)展了實(shí)驗(yàn)室測(cè)定,取得了一定成果,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 ①北京聚德陽(yáng)光醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)提供的卡巴拉汀單品。②北京康倍得醫(yī)藥技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司生產(chǎn)提供的卡巴拉汀空白貼片,單片面積為20.00cm2。③美國(guó)Fisher公司提供的經(jīng)由色譜提純的甲醇試劑。④北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物中心繁育提供的雄性豚鼠若干只,平均體重(250.00±30.00)g。

1.2 儀器 ①美國(guó)Waters公司生產(chǎn)提供的Waters2690高效液相色譜儀(搭配使用自動(dòng)進(jìn)樣器),Waters2487紫外檢測(cè)器以及Millennium32色譜數(shù)據(jù)工作站。②日本島津公司生產(chǎn)提供的UV-2401型紫外光-可見(jiàn)光分光光度儀。③上海鍇凱科技貿(mào)易有限公司生產(chǎn)提供的TK-60B型Frannz擴(kuò)散池。

1.3 HPLC法檢測(cè)過(guò)程中技術(shù)控制條件 ①色譜柱：擇取Waters XTerra PR18.00柱(150.00mm×3.90mm,5.00 μm)。②流動(dòng)相：由甲醇、碳酸氫銨溶液以及水按照42∶27∶31體積比混合而成,且碳酸氫銨溶液的濃度應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格控制在10.00mmol/L,在此基礎(chǔ)上還需運(yùn)用濃度適宜的磷酸溶液的pH值調(diào)節(jié)到8.50。③柱溫：32.00℃。④檢測(cè)過(guò)程中的進(jìn)樣量：10.00 μl。⑤流速：1.00ml/min。⑥檢測(cè)波長(zhǎng)：210.00mm。

1.4 主要檢驗(yàn)溶液的制備

1.4.1 參照品溶液 運(yùn)用分析天平精確測(cè)量卡巴拉汀單品19.386mg,并將稱取的藥品加入有效容積為50.00ml的容量瓶中,運(yùn)用經(jīng)由色譜凈化獲取的甲醇完成溶解、定容和搖勻處理過(guò)程,即可獲取濃度水平為387.72 μg/ml的參照品溶液。

1.4.2 實(shí)驗(yàn)品溶液 取卡巴拉汀貼片,去除其防粘層并將其在25.00ml甲醇中常溫浸泡處理24 h,隨后運(yùn)用孔徑尺寸為0.22 μm的濾膜過(guò)濾處理獲取甲醇濾出液,抽取2.00ml濾液,并運(yùn)用色譜純化甲醇稀釋到10.00ml,即可獲取實(shí)驗(yàn)品溶液。

1.4.3 空白溶液 取空白貼片,按照實(shí)驗(yàn)品溶液的制備操作方法即可獲取空白溶液。

1.5 體外透皮實(shí)驗(yàn) 選取成年健康雄性豚鼠,應(yīng)用電動(dòng)剃刀徹底剔除其腹部和背部位置的全部毛發(fā),用溫開(kāi)水洗凈地皮膚,之后采用敲顱法促使其快速死亡,并立即剝離腹部皮膚,剔除皮下聯(lián)結(jié)的脂肪組織,并浸泡于足量生理鹽水中,放入冰箱備用。選取成年雄性豚鼠的腹部皮膚作為卡巴拉汀藥物經(jīng)皮滲透釋放量實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過(guò)程中的屏障材料,將經(jīng)由前期技術(shù)處理環(huán)節(jié)獲取的皮膚樣本固定放置于總體積為18.00ml的由上海鍇凱科技貿(mào)易有限公司生產(chǎn)提供的TK-60B型Frannz擴(kuò)散池上方,其保證腹部皮膚組織的角質(zhì)層朝向外側(cè),取卡巴拉汀透明貼劑,去除其防粘層并將其粘貼在角質(zhì)層上。運(yùn)用pH值為6.80的磷酸鹽緩沖用液作為卡巴拉汀透皮釋放過(guò)程在的叢臺(tái)介質(zhì),并將介質(zhì)在使用過(guò)程中的溫度參數(shù)控制在31.50～32.50℃。

2 結(jié)果

卡巴拉汀在9.68～116.31 μg/ml的濃度范圍內(nèi)具備較好的線性關(guān)系檢出特征,其檢出限為0.16 μg/ml,精密度RSD測(cè)算范圍為0.12%～0.47%,在低、中以及高濃度等級(jí)條件下的平均測(cè)算回收率分別為98.78%、98.52%以及98.86%。體外透皮試驗(yàn)條件下獲取的描述曲線方程符合方程屬性特征。

3 討論

從化學(xué)屬性與藥理學(xué)屬性角度分析,卡巴拉汀屬于氨基甲酸類乙酰膽堿酯酶抑制劑類藥物,能夠借由促使膽堿能神經(jīng)元細(xì)胞釋放的乙酰膽堿物質(zhì)生物代謝降解過(guò)程發(fā)生時(shí)間延擱,促進(jìn)人體膽堿能神經(jīng)元細(xì)胞的神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程快速實(shí)現(xiàn)［1,2］。現(xiàn)階段,卡巴拉汀是全世界范圍內(nèi)應(yīng)用數(shù)量最大且應(yīng)用頻率最高的阿爾茨海默癥癡呆型癥狀緩解和改善類藥物［3］。

透皮給藥系統(tǒng)與傳統(tǒng)的口服給藥方式相對(duì)照,其最大的差別在于徹底避免了人體胃腸道生理組織的消化代謝處理過(guò)程,以及人體肝臟器官在藥物有效成分實(shí)際吸收利用之前發(fā)生的首過(guò)效應(yīng),因而確保了卡巴拉汀藥物的生物利用率水平獲取了程度顯著的提高變化［4］。與此同時(shí),透皮貼劑的給藥形式在實(shí)際運(yùn)用過(guò)程中通常能夠產(chǎn)生持久性、恒定性以及可控性的血藥濃度水平,有效減低了患者在接受藥物治療過(guò)程中的不良反應(yīng)事件發(fā)生可能性［5］。

本次研究中,卡巴拉汀在9.68～116.31 μg/ml的濃度范圍內(nèi)具備較好的線性關(guān)系檢出特征,其檢出限為0.16 μg/ml,精密度RSD測(cè)算范圍為0.12%～0.47%,在低、中以及高濃度等級(jí)條件下的平均測(cè)算回收率分別為98.78%、98.52%以及98.86%。體外透皮試驗(yàn)條件下獲取的描述曲線方程符合方程屬性特征。以上研究結(jié)果表明,運(yùn)用HPLC法測(cè)定卡巴拉汀貼劑中的卡巴藥物含量,并運(yùn)用離體豚鼠皮膚作為屏障檢測(cè)卡巴拉汀貼劑中有效藥物成分的體外透皮釋放量,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)卡巴拉汀藥物疾病藥理運(yùn)用特征以及釋放效能狀態(tài)的清晰評(píng)估,為臨床藥師開(kāi)展卡巴拉汀貼劑的臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)支持條件,促進(jìn)我國(guó)現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)事業(yè)的穩(wěn)定有序發(fā)展。

總之,運(yùn)用HPLC法測(cè)定卡巴拉汀貼劑中的卡巴藥物含量,并運(yùn)用離體豚鼠皮膚作為屏障檢測(cè)卡巴拉汀貼劑中有效藥物成分的體外透皮釋放量,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)卡巴拉汀藥物疾病藥理運(yùn)用特征以及釋放效能狀態(tài)的清晰評(píng)估,為臨床藥師開(kāi)展卡巴拉汀貼劑的臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)支持條件。

［1］郭淼,杜洪光,鐘敘英,等.HPLC法測(cè)定卡巴拉汀貼劑中藥物含量及其體外透皮釋放量.北京化工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2011,38(1):35-38.

［2］許麗麗,杜洪光,王剛,等.HPLC法測(cè)定丁丙諾啡貼劑中藥物的含量及其體外透皮釋放量.藥物分析雜志,2009,29(8):1294-1296.

［3］王文剛,惲榴紅,王睿,等.非洛地平-美托洛爾復(fù)方透皮貼劑的處方與工藝研究.中國(guó)藥房,2008,19(16):1236-1239.

［4］陳雯雯,云琦,陶亮,等.小茴香揮發(fā)油貼劑體外釋放和透皮性能的研究.天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā),2016,28(1):65-70.

［5］劉新國(guó),張鷹,程璐,等.環(huán)維黃楊星D透皮貼劑體外釋放度與經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn).醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2016,35(6):640-645.

探討改良式水囊引產(chǎn)用于足月妊娠促宮頸成熟的臨床觀察 …………………… 陳雪梅 林婷 陳嬌柳 284

新生兒窒息的產(chǎn)科原因分析 ……………………………………………………………………… 張巍偉 285

剖宮產(chǎn)產(chǎn)后出血原因及防治體會(huì) ………………………………………………………………… 程曉艷 286

瘢痕子宮再次妊娠經(jīng)陰道分娩的可行性分析及探討 ………………………劉肖英 蘇贊妍 華秀蘭 等 288

康復(fù)醫(yī)療

產(chǎn)后盆底康復(fù)治療對(duì)盆底肌肉肌力及陰道緊縮度的影響 ………………………………………… 楊寒 289

實(shí)驗(yàn)研究

HPLC法測(cè)定卡巴拉汀貼劑藥物含量及其體外釋放量 …………………………… 肖志輝 王萍 張少俊 291

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.20.192

2016-09-18］

510440 廣東省生物制品與藥物研究所