吳芳芳，　許　紋，　楊樂園

(1.上海建工醫(yī)院檢驗科,上海 200083；2.上海市第一人民醫(yī)院寶山分院,上海 200940)

2 418例血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

吳芳芳1，許紋1，楊樂園2

(1.上海建工醫(yī)院檢驗科,上海 200083；2.上海市第一人民醫(yī)院寶山分院,上海 200940)

摘要：目的了解血培養(yǎng)病原菌的分布及其耐藥性，為臨床治療提供依據(jù)。方法采用回顧性調(diào)查方法，對2011年1月1日至2013年12月31日，從血標(biāo)本中分離的菌株進行分析。結(jié)果2 418例血培養(yǎng)標(biāo)本共分離出病原菌226株，陽性率為9.3%，其中革蘭陰性桿菌143株(63.3%)，革蘭陽性球菌83株(36.7%)，分離出最多的為大腸埃希菌99株(43.8%)、凝固酶陰性葡萄球菌43株(19.0%)和肺炎克雷伯菌20株(8.8%)。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對亞胺培南、阿米卡星、派拉西林-他唑巴坦高度敏感。革蘭陽性球菌對萬古霉素、替考拉林高度敏感。結(jié)論血培養(yǎng)分離的病原菌以革蘭陰性桿菌為主。分離病原菌的耐藥情況嚴(yán)重，臨床應(yīng)加強對病原菌耐藥性監(jiān)測，合理使用抗菌藥物。

關(guān)鍵詞：血培養(yǎng)；臨床分離菌；耐藥性

中圖分類號：

文章編號：1673-8640(2015)02-0163-04R446.5

文獻標(biāo)志碼：碼：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.02.015

Abstract:ObjectiveTo understand the blood culture pathogenic bacterium distribution and drug resistance, and to provide the reference for clinical treatment. MethodsBy retrospective investigation from January 1, 2011 to December 31, 2013, the bacteria isolated from blood specimens were collected for analysis. ResultsA total of 2 418 blood culture specimens were detected, there were 226 isolates of pathogenic bacteria, and the positive rate was 9.3%, including 143 isolates of gram-negative bacilli (63.3%), 83 isolates of gram-positive cocci (36.7%). The biggest isolation was Escherichia coli (99 isolates, 43.8%), 43 isolates of coagulase-negative Staphylococcus (19.0%) and 20 isolates of Klebsiella pneumoniae (8.8%). Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae were sensitive to imipenem, amikacin and piperacillin-tazobactam. Gram-positive coccus is highly sensitive to vancomycin and teicoplanin. ConclusionsThe main isolated blood culture pathogenic bacterium is gram-negative bacillus, and the drug resistance of isolated pathogenic bacterium is severe. The clinical pathogenic bacterium resistance monitoring and the rational use of antimicrobial agents should be strengthened.

作者簡介：吳芳芳，女，1968年生，本科，主管技師，主要從事臨床微生物檢驗。

收稿日期：(2014-08-15)

Analysis on the pathogenic bacterium distribution and drug resistance among 2 418 cases of blood cultureWUFangfang1,XUWen1,YANGLeyuan2.(1.DepartmentofClinicalLaboratory,JiangongHospital,Shanghai200083,China; 2.BaoshanBranch,ShanghaiFirstPeople′sHospital,Shanghai200940,China)

Key words: Blood culture; Clinically isolated bacterium; Drug resistance

敗血癥是嚴(yán)重的全身感染性疾病，病情發(fā)展迅速，病死率高；隨著廣譜抗菌藥物的廣泛應(yīng)用和各種侵入性醫(yī)療操作的增加，敗血癥的發(fā)病率呈上升趨勢[1]。本研究通過對上海建工醫(yī)院2011至2013年從血培養(yǎng)標(biāo)本分離的菌株進行分析，了解上海建工醫(yī)院血標(biāo)本臨床分離菌的分布及耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物和經(jīng)驗性用藥提供參考。

材料和方法

一、病原菌來源

收集2011年1月1日至2013年12月31日我院血培養(yǎng)標(biāo)本中分離的菌株，同一患者剔除相同部位的重復(fù)菌株。

二、 標(biāo)本處理

無菌操作抽取靜脈血5~10 mL迅速注入血培養(yǎng)瓶中，立即送檢。儀器報警有陽性時，立即轉(zhuǎn)種相應(yīng)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)18~24h，同時涂片做革蘭染色；儀器5 d未報警，并做涂片染色，轉(zhuǎn)種血平板和巧克力平板，均無細(xì)菌生長則判讀為陰性。

三、細(xì)菌鑒定

BacT/Alert 3D全自動血培養(yǎng)儀、ATB細(xì)菌鑒定儀及配套用細(xì)菌鑒定試條進行鑒定，產(chǎn)品均由法國生物梅里埃公司提供。

四、藥敏試驗

藥敏試驗采用ATB儀器法(法國生物梅里埃公司)進行操作。

判定標(biāo)準(zhǔn)按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)2012年版的規(guī)定[2]。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌(ATCC 29213)、大腸埃希菌(ATCC 25922)和(ATCC 35218)、銅綠假單胞菌(ATCC 27853)糞腸球菌(ATCC 29212)由上海市臨床檢驗中心提供。

五、超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測

按CLSI推薦的紙片篩選法和酶抑制劑增強確證試驗檢測大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌和奇異變形桿菌中產(chǎn)ESBLs菌株。

六、統(tǒng)計學(xué)方法

采用WHONET 5.6軟件進行統(tǒng)計分析。

結(jié)果

一、病原菌分布

從2 418例血培養(yǎng)送檢標(biāo)本中，分離出226株病原菌陽性，陽性率為9.3%。其中革蘭陰性菌143株，占63.3%；革蘭陽性菌83株，占36.7%；真菌2株，占0.9%。所分離的病原菌，前三位分別為：大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)、肺炎克雷伯菌，見表1。

二、主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥性

大腸埃希菌占全部革蘭陰性致病菌的69.2%，肺炎克雷伯菌的分離量居第二位，占全部革蘭陰性致病菌的14.0%。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌及奇異變形桿菌對亞胺培南高度敏感，未發(fā)現(xiàn)耐藥株；三者ESBLs的發(fā)生率分別為65.3%、15.4%、54.5%，見表2。

表1　血培養(yǎng)病原菌分布及構(gòu)成比

表2　主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率

三、主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥性

革蘭陽性菌中最常見致病菌是凝固酶陰性葡萄球菌，占全部革蘭陽性致病菌的51.8%。凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌及腸球菌屬對萬古霉素高度敏感。金黃色葡萄球菌及腸球菌屬對替考拉寧均敏感，凝固酶陰性葡萄球菌對替考拉寧耐藥率為2.3%。其中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌占44.2%，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌占78.4%，見表3。

表3　主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥率

討論

我院2 418例血標(biāo)本共檢出226株病原菌，陽性率為9.3%。低于國內(nèi)文獻報道[3]，可能與臨床醫(yī)師未在使用抗菌藥物前采集血培養(yǎng)標(biāo)本、采集標(biāo)本時機和未及時送檢等因素有關(guān)。病原菌以革蘭陰性菌為主占63.3%,這與文獻等[4]報道不盡相同，與夏涵等[5]報道比較接近。

我院近3年來，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌與奇異變形桿菌ESBLs的檢出率分別為65.3%、15.4%、54.5%。ESBLs為絲氨酸蛋白酶的衍生物，主要通過質(zhì)粒形式在細(xì)菌間傳播，不但對β-內(nèi)酰胺抗菌藥物耐藥，還對氨基糖苷類、喹諾酮類和磺胺類藥物耐藥，表現(xiàn)出多重耐藥特性[6-7]。我院檢出的大腸埃希菌對第三代頭孢菌素、奎諾酮類和氨基糖苷類藥物的耐藥率均大于60.0%，臨床應(yīng)謹(jǐn)慎使用。亞胺培南對大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌具有高度敏感性，未檢出耐藥株。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌對哌拉西林-他唑巴坦的耐藥率分別為，9.5%、8.0%和0.0%，可作為經(jīng)驗性治療的首選藥物。

結(jié)果顯示，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢出率分別為78.4%和44.2% ，尤其是耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌所占比例較高，耐藥情況嚴(yán)重。凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對青霉素、紅霉素的耐藥率均大于70.0%，臨床應(yīng)謹(jǐn)慎使用。兩者對萬古霉素、替考拉寧、呋喃妥因、利福平的均高度敏感。僅發(fā)現(xiàn)1株耐替考拉寧的凝固酶陰性葡萄球菌菌株，提示糖肽類抗菌藥物仍是嚴(yán)重葡萄球菌血流感染的首選藥物。

腸球菌屬除對氨芐西林和氯霉素的耐藥率小于30.0%外，對青霉素、四環(huán)素和左氧氟沙星的耐藥率均大于40.0%。對紅霉素、利福平的耐藥率在70.0%左右，臨床應(yīng)謹(jǐn)慎使用。萬古霉素和替考拉寧對腸球菌的敏感率均為100.0%。是嚴(yán)重腸球菌血流感染的首選藥物。

綜上所述，血培養(yǎng)陽性是臨床血流感染病原學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。實驗室應(yīng)高度重視血流感染病原菌及其耐藥性監(jiān)測，及時報告臨床醫(yī)師。臨床需要密切關(guān)注細(xì)菌耐藥性變化趨勢，應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理有效使用抗菌藥物，減少耐藥菌的產(chǎn)生。

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(本文編輯：儲怡星)