周天驕 譙仕彥 馬 曦 賀平麗（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，動物營養(yǎng)學(xué)國家重點實驗室，北京100193）

大豆飼料產(chǎn)品中主要抗營養(yǎng)因子含量的檢測與分析

周天驕 譙仕彥 馬 曦 賀平麗?
（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，動物營養(yǎng)學(xué)國家重點實驗室，北京100193）

摘 要：本試驗旨在應(yīng)用間接競爭酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法以及色譜法測定不同加工工藝的大豆飼料產(chǎn)品中主要大豆抗營養(yǎng)因子大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子以及大豆中蔗糖、棉子糖和水蘇糖的含量。采用ELISA試劑盒對國內(nèi)257份大豆制品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量進行檢測與分析；利用離子色譜建立了大豆產(chǎn)品中蔗糖、棉子糖和水蘇糖的靈敏、準確的同步測定法，并對國內(nèi)92份大豆制品中寡糖含量進行檢測與分析。結(jié)果表明：發(fā)酵豆粕、膨化大豆、大豆?jié)饪s蛋白和大豆分離蛋白中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量相對較低；本試驗所建立的離子色譜同步測定大豆中蔗糖、棉子糖和水蘇糖的方法具有靈敏度和準確性高、重現(xiàn)性好的優(yōu)點，適用于大豆寡糖的測定；通過對實際樣品的檢測和分析，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵豆粕和大豆分離蛋白中3種大豆寡糖含量均相對較低。本試驗所得到不同加工工藝的大豆產(chǎn)品中主要抗營養(yǎng)因子含量的相關(guān)數(shù)據(jù)將為大豆在畜禽飼料中的高效利用提供很好的技術(shù)支撐。

關(guān)鍵詞：ELISA；離子色譜；抗營養(yǎng)因子；大豆產(chǎn)品

大豆因其富含蛋白質(zhì)且氨基酸平衡而成為人類和動物優(yōu)質(zhì)的植物蛋白質(zhì)源。隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)和飼料業(yè)的快速發(fā)展，豆粕作為主要植物性蛋白質(zhì)原料，其需求量逐年遞增。然而，豆粕中含有多種抗營養(yǎng)因子，如蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白以及寡糖等，這在一定程度上限制了其在飼料中的應(yīng)用，尤其是幼畜飼料。近幾十年來，科研工作者致力于研究通過不同的加工工藝來消除或降低大豆中的抗營養(yǎng)因子，如通過加熱法鈍化蛋白酶抑制因子、微生物發(fā)酵以及膨化法降低大豆蛋白致敏性等，以期大豆及大豆制品能夠在食品和飼料領(lǐng)域得到更廣泛的應(yīng)用。但由于技術(shù)水平、工藝參數(shù)等的不同，造成大豆產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，之前由于檢測技術(shù)的限制，很難直觀準確地評價其鈍化消除效果，因此如何快速準確測定大豆中的各種抗營養(yǎng)因子水平已成為了大豆制品質(zhì)量評定以及大豆制品加工工藝監(jiān)控等工作中必須解決的問題。

大豆中胰蛋白酶抑制因子與脲酶有相似的含量和活性，可通過檢測脲酶活性間接反映胰蛋白酶抑制因子活性［1］，但該法靈敏度低且對于過度加熱豆粕測定準確度很低，此外還有酶化學(xué)檢測法、免疫化學(xué)測定法等，其中酶化學(xué)法靈敏度低且對加熱過度的豆粕測定結(jié)果變異較大，而通過酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法直接測定胰蛋白酶抑制因子的靈敏度、準確性和重復(fù)性均較好［2］。大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白的檢測方法包括電泳法、色譜法、質(zhì)譜法、液質(zhì)聯(lián)用、免疫化學(xué)法、實時PCR（real?time PCR）以及多重PCR（multiplex?PCR）［3－6］等，其中電泳法多用于定性和半定量，不能用于準確定量大豆球蛋白及β－伴大豆球蛋白含量；雖然色譜法、質(zhì)譜法、液質(zhì)聯(lián)用的靈敏度和準確性高，但需要較為昂貴的儀器和復(fù)雜的操作和分析過程，無法實現(xiàn)現(xiàn)場檢測；基于PCR技術(shù)的檢測方法雖簡便，特異性和靈敏度高，但由于結(jié)果可能出現(xiàn)交叉污染造成假陽性等限制了該方法的廣泛應(yīng)用，而基于免疫學(xué)所建立的ELASA法具有特異性強和靈敏度高等優(yōu)點，同時還可以實現(xiàn)現(xiàn)場檢測，推廣性強。早期大豆寡糖的分析方法一般采用紙色譜法、薄層色譜法及柱色譜法，能夠在糖類分離的基礎(chǔ)上對樣品中的各種糖類逐一定量分析，但存在分離效力有限且非專一性響應(yīng)的問題，隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的進步，先進的儀器分析方法已經(jīng)應(yīng)用于糖類的檢測和分析中，如氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）和毛細管電泳法（CE）、質(zhì)譜（MS）［7－8］等，這些方法分離能力高，且靈敏、準確。近年來，離子色譜以其特異的陰離子交換分離技術(shù)和靈敏的脈沖安培檢測技術(shù)，在糖的檢測領(lǐng)域得到越來越廣泛的應(yīng)用，逐漸取代了其他的糖檢測技術(shù)。此方法簡單，不需衍生和復(fù)雜的樣品前處理就能分析幾乎所有的單糖和大部分的寡糖及低聚糖，這不僅節(jié)約了大量的時間和成本，而且避免了一些有毒的衍生試劑的使用，減少了環(huán)境污染［9－10］。脈沖安培檢測器具有非常高的靈敏度，低至pmol級的糖類也可得到很好的檢測。隨著離子色譜分析技術(shù)的發(fā)展及其在寡糖和多糖方面出色的分離能力，使其能夠在對寡糖的研究過程起到更重要的作用。

本試驗建立了檢測大豆產(chǎn)品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量的靈敏、準確的間接競爭ELISA方法，同時建立了蔗糖、棉子糖和水蘇糖的靈敏、準確、重現(xiàn)性好的離子色譜檢測方法，利用上述建立的方法分析測定了257份不同加工工藝的大豆產(chǎn)品中抗營養(yǎng)因子的含量，為大豆及大豆加工產(chǎn)品在畜禽飼料中的高效利用提供技術(shù)保障。

1　材料與方法

1．1 試驗材料

1．1．1 試劑

大豆球蛋白定量檢測試劑盒、β－伴大豆球蛋白定量檢測試劑盒和胰蛋白酶抑制因子定量檢測試劑盒均由北京龍科方舟生物工程技術(shù)有限公司提供。

D－蔗糖（≥99．5%，Sigma公司），D－棉子糖（≥98%，Sigma?Aldrich公司），D－水蘇糖（≥98%，Sigma公司），NaOH溶液（50%，W／W，F(xiàn)luka公司），其他試劑為分析純試劑。所有用水均為電阻率≥18．2 MΩ·cm的超純水，0．22 μm微孔尼龍膜（天津富集司）。

1．1．2 主要儀器

ICS－3000型離子色譜儀（美國Dionex公司），Chromeleon 6．80色譜工作站，AS自動進樣器，Milli?QAdvantageA10超純水機（美國Millipore公司），離心機（德國Eppendorf公司），JB－12多磁力攪拌器（榮華儀器制造廠），臺式高速冷凍離心機（美國Thermo公司），酶標儀（美國BIO?RAD公司），隔水式培養(yǎng)箱（常州恒德儀器有限公司）。

1．1．3 標準溶液和淋洗液的配制

標準溶液的配制：準確稱取蔗糖、棉子糖和水蘇糖標準品各25．00 mg溶于50 mL超純水中，并用超純水將該母液稀釋到5 μg／mL，搖勻，配制成混合標準工作溶液，備用。

NaOH淋洗液的配制（250 mmol／L）：在1 L容量瓶中加入987 mL超純水，再移入13．0 mL 50%NaOH溶液，搖勻備用。

1．2 樣品采集

257份大豆樣品，包括去皮豆粕、發(fā)酵豆粕、膨化大豆、大豆?jié)饪s蛋白、大豆分離蛋白等不同加工工藝的大豆產(chǎn)品，采集自全國各地的飼料生產(chǎn)企業(yè)。

1．3 間接競爭ELISA法檢測大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子

1．3．1 大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白檢測的樣品前處理

將待測樣品粉碎后，收集能夠通過孔徑小于0．25 mm標準篩的顆粒，稱取0．3 g樣品于50 mL離心管中，加入30 mL 1×樣品提取工作液，于25℃振蕩提取16 h，靜置2 min。取上層液體于4 000 r／min離心5 min，取上清液用1×樣品稀釋工作液稀釋70倍（稀釋方法：先取100 μL上清液加到裝有600 μL 1×樣品稀釋工作液的容器中混勻，然后再取混合液100 μL加到裝有900 μL 1×樣品稀釋工作液的容器中混勻待用）。

1．3．2 胰蛋白酶抑制因子檢測的樣品前處理

將待測樣品粉碎后，收集能夠通過孔徑小于0．25 mm標準篩的顆粒，稱取0．1 g樣品加入到已配好的30 mL 1×樣品提取工作液中，于25℃振蕩提取16 h，靜置2 min。取上層液體于4 000 r／min離心5 min，取上清液用樣品稀釋液稀釋到適合的工作濃度（豆粕、發(fā)酵豆粕、膨化大豆等樣品建議稀釋比例為1∶300。稀釋方法：取30 μL上清液加到裝有270 μL樣品稀釋液的容器中混勻，量取30 μL混合液加到裝有870 μL樣品稀釋液的容器中混勻待用）。

1．3．3 蛋白定量檢測及結(jié)果判定

分別以每種大豆抗原蛋白或胰蛋白酶抑制因子的標準工作液濃度（μg／mL）的對數(shù)為橫坐標，以百分吸光率為縱坐標，繪制標準工作曲線，用標準曲線對試樣進行定量，其中百分吸光率等于校準品或樣品的吸光度值的平均值（雙孔）除以第1個校準品（0標準）的吸光度值，再乘以100。

1．4 離子色譜法測定大豆及大豆制品中的3種寡糖

1．4．1 大豆制品寡糖的提取

稱取粉碎后待測樣品0．5 g左右，先加入20 mL無水乙醇，振蕩混勻，接著加入80%甲醇30 mL，磁力攪拌1 h，提取液用8 000 r／min離心5 min，取1 mL上清定容于50 mL容量瓶中，0．22 μm尼龍濾膜過濾，濾液用于離子色譜測定。

1．4．2 色譜條件

分析柱：CarboPac PA10（250 mm×4 mm）；保護柱：CarboPac PA10（50 mm×4 mm）；淋洗液條件：梯度洗脫0～15 min，23 mmol／L NaOH；15．1～25．0 min，23～150 mmol／L NaOH；25．1～30．0 min，150 mmol／L NaOH；30．1～35．0 min，23 mmol／L NaOH；流速1．0 mL／min；檢測器：ED 3000脈沖安培檢測，Au工作電極，Ag／AgCl參比電極模式，四電位波形檢測；進樣量：25 μL；進樣方式：自動進樣；柱溫：30℃。

1．4．3 結(jié)果計算

分別以每種寡糖的標準工作液濃度（μg／mL）為橫坐標，以色譜峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線，按外標法用標準曲線對試樣進行定量。

1．5 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 18．0軟件進行統(tǒng)計分析，試驗結(jié)果用平均值±標準差表示。

2　結(jié)果與分析

2．1 大豆加工產(chǎn)品中大豆抗原蛋白以及胰蛋白酶抑制因子含量的檢測與分析

2．1．1 方法校正曲線繪制及回收率測定

按照試劑盒測定程序測定標準曲線，得到β－伴大豆球蛋白定量檢測試劑盒濃度在0．4～28 μg／mL內(nèi)，線性關(guān)系良好（R2≥0．99）；大豆球蛋白定量檢測試劑盒濃度在0．2～25．6 μg／mL內(nèi)，線性關(guān)系良好（R2≥0．98）；胰蛋白酶抑制因子定量檢測試劑盒濃度在0．015～1．220 μg／mL內(nèi)，線性關(guān)系良好（R2≥0．99）。同時分別用回收率和相對標準偏差考察了試劑盒的準確性和重復(fù)性，所得回收率及相對標準偏差見表1。結(jié)果表明，上述3種大豆抗營養(yǎng)因子的平均回收率在86．9%～107．3%之間，相對標準偏差小于7%，該方法滿足定性鑒別和定量測定的需要，檢測限、準確度和精密度均滿足規(guī)定要求，所以該方法是用來測定大豆中大豆抗原蛋白以及胰蛋白酶抑制因子含量的可靠方法。

表1　3種大豆主要抗營養(yǎng)因子在大豆樣品中的回收率及相對標準偏差Table 1 Recoveries and RSD of three main soybean antinutritional factors from soybean samples（n＝6）

2．1．2 大豆加工產(chǎn)品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量的測定結(jié)果

257份樣品可分為7類（去皮豆粕、帶皮豆粕、發(fā)酵豆粕、去皮膨化豆粕、膨化大豆、大豆?jié)饪s蛋白、大豆分離蛋白），表2詳細列舉了這些大豆產(chǎn)品的產(chǎn)地及3種蛋白類抗營養(yǎng)因子含量的最大值、最小值和平均值。由表2可知，同一種大豆加工產(chǎn)品，不同地區(qū)之間大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量的最小值或最大值差異較大，如與黑龍江和山東相比，京津冀和浙江的去皮豆粕中β－伴大豆球蛋白含量的最小值較低。因此，采用平均值表示不同加工工藝的大豆產(chǎn)品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子的含量可以較為直觀地比較出不同加工工藝對抗原蛋白的鈍化效果，雖然變異較大，但仍具有一定的參考價值。圖1更直觀地展示了不同大豆加工產(chǎn)品中3種蛋白類抗營養(yǎng)因子的含量及鈍化降解效果。由圖1可知，豆粕經(jīng)發(fā)酵、膨化或濃縮等工藝處理后，3種抗營養(yǎng)因子的含量明顯降低，其中發(fā)酵豆粕、膨化大豆、大豆?jié)饪s蛋白和大豆分離蛋白中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白含量均降至53．9 mg／g以下，胰蛋白酶抑制因子含量降低至21．6 mg／g以下，與帶皮豆粕相比，這3種抗營養(yǎng)因子含量均至少降低了60%。然而，去皮的膨化豆粕中抗營養(yǎng)因子含量沒有明顯下降，其去除抗營養(yǎng)因子的效果不明顯。

2．2 大豆加工產(chǎn)品中蔗糖、棉子糖和水蘇糖含量的檢測與分析

2．2．1 標準曲線、線性范圍及檢出限

分別配制5個不同濃度的3種寡糖的標準溶液，在上述色譜條件下進行測定。分別得到蔗糖、棉子糖和水蘇糖的工作曲線的線性范圍為0．2～100．0 μg／mL，R2＞0．995，檢出限在0．02～0．05 μg／mL之間。

2．2．2 方法的準確度和精確度

本試驗對樣品進行了100和50 mg／g 2個水平的添加濃度，每個濃度設(shè)6個平行，所得回收率及相對標準偏差見表3。結(jié)果表明，3種寡糖的平均回收率在80%～99%之間，相對標準偏差小于6%，該方法滿足定性鑒別和定量測定的需要，檢測限、準確度和精密度均滿足規(guī)定要求，所以該方法是用來測定大豆中寡糖含量的可靠方法。此外，樣品的色譜峰見圖2，從圖2中可以看出，樣品中寡糖的分離效果很好。

2．2．3 大豆加工產(chǎn)品中蔗糖、棉子糖和水蘇糖含量的測定與分析

92份樣品可分為5類（豆粕、發(fā)酵豆粕、膨化大豆、大豆?jié)饪s蛋白和大豆分離蛋白），利用本試驗所建立的離子色譜方法對上述樣品進行檢測，所得到的每一類樣品中3種大豆寡糖的含量和平均值如表4所示。由表4可知，大豆3種寡糖中蔗糖含量最多，水蘇糖含量次之，棉子糖含量最少，同一大豆加工工藝，不同廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品中同一寡糖的含量也差異較大。對于不同加工工藝產(chǎn)品，結(jié)果表明豆粕經(jīng)發(fā)酵工藝處理后，其中蔗糖和水蘇糖的含量均明顯下降，比發(fā)酵前降低了70%，大豆分離蛋白中3中寡糖的含量也明顯降低，但膨化豆粕中3種大豆寡糖含量沒有明顯下降；大豆?jié)饪s蛋白大豆寡糖含量反而升高，這與前人研究的醇法大豆?jié)饪s蛋白中可溶性低聚糖約占干物質(zhì)10%的結(jié)果相吻合［11］。

3　討 論

大豆中因含有多種抗營養(yǎng)因子，如大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白、胰蛋白酶抑制因子和寡糖等，這些物質(zhì)的存在一定程度上影響了大豆產(chǎn)品的質(zhì)量和營養(yǎng)價值。通過膨化、微生物發(fā)酵以及大豆?jié)饪s蛋白等加工工藝可有效降低大豆中抗營養(yǎng)因子含量，但是由于技術(shù)水平、工藝參數(shù)等的不同，造成大豆產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊。本試驗通過間接競爭ELISA法檢測了不同加工工藝的大豆產(chǎn)品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量，分析發(fā)現(xiàn)同一種大豆加工產(chǎn)品，不同地區(qū)之間大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量的差異較大，其原因可能是不同企業(yè)生產(chǎn)的大豆產(chǎn)品，即使是同一種加工工藝，但由于具體工藝參數(shù)不同，對大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子等抗營養(yǎng)因子的鈍化降解效果差異很大。但綜合比較，發(fā)酵豆粕、膨化大豆、大豆?jié)饪s蛋白和大豆分離蛋白中上述3種抗營養(yǎng)因子含量較低，產(chǎn)生上述結(jié)果原因是：1）微生物發(fā)酵產(chǎn)生的酶類可降解胰蛋白酶抑制因子和大豆過敏蛋白［12］；2）胰蛋白酶抑制因子具有熱不穩(wěn)定性，熱加工（蒸汽處理、膨化）可使其失活，膨化過程中的高溫高壓和機械剪切可以使抗營養(yǎng)因子鈍化［13］；3）工業(yè)上普遍采用醇法大豆?jié)饪s蛋白加工工藝，而大豆過敏蛋白和胰蛋白酶抑制因子等經(jīng)乙醇浸出后可被去除或失活［14］，大豆分離蛋白加工過程中的堿萃取的高pH體系可引起蛋白質(zhì)聚集體發(fā)生解聚，甚至引起蛋白質(zhì)的肽鍵斷裂，降低大分子蛋白質(zhì)組分的含量［11］。然而，去皮的膨化豆粕中抗營養(yǎng)因子含量沒有明顯下降，原因可能是大部分膨化豆粕樣品嚴格意義上屬于膨脹豆粕，壓力、溫度和機械剪切力沒有膨化工藝強，因此去除抗營養(yǎng)因子的效果不明顯［15］。此外，本試驗還分析發(fā)現(xiàn)發(fā)酵工藝可降低寡糖的含量，其原因可能是微生物發(fā)酵過程中需要消耗糖。

表2 大豆加工產(chǎn)品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子的含量范圍Table 2 The content range of glycinin, β-conglycinin and trypsin inhibitor in soybean products

續(xù)表2

圖1　大豆加工產(chǎn)品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量分析圖Fig．1 The analysis graphics of the contents of glycinin，β?conglycinin and trypsin inhibitor in soybean products

表3　3種寡糖在大豆樣品中的添加回收率及相對標準偏差Table 3 Recoveries and RSD of three kinds of oligosaccharides from soybean samples（n＝6）

圖2　大豆樣品的色譜分離圖Fig．2 The chromatograms of soybean sample

4　結(jié) 論

①本試驗通過間接競爭ELISA法檢測了不同加工工藝的大豆產(chǎn)品中大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量，分析發(fā)現(xiàn)發(fā)酵豆粕、膨化大豆、大豆?jié)饪s蛋白和大豆分離蛋白中上述3種抗營養(yǎng)因子含量較低。

②本試驗建立了一種離子色譜同步測定大豆中蔗糖、棉子糖和水蘇糖含量的簡便快捷、靈敏度和準確性高、重現(xiàn)性好的方法，適用于大豆寡糖的測定。通過該方法分析比較了不同加工工藝的大豆產(chǎn)品中大豆寡糖含量，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵豆粕和大豆分離蛋白中3種大豆寡糖含量較低，推薦使用發(fā)酵以及大豆蛋白分離技術(shù)來鈍化大豆球蛋白、β－伴大豆球蛋白、胰蛋白酶抑制因子以及大豆中蔗糖、棉子糖和水蘇糖。

③本試驗所得到不同加工工藝的大豆產(chǎn)品中主要抗營養(yǎng)因子含量的相關(guān)數(shù)據(jù)可為大豆產(chǎn)品在畜禽飼料中的高效利用提供參考。

表4　大豆加工產(chǎn)品中蔗糖、棉子糖和水蘇糖的含量范圍Table 4 The content ranges of sucrose，raffinose and stachyosein in soybean products　%

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（編輯 武海龍）

Detection and Analysis of Main Antinutritional Factors Content in Soybean Products

ZHOU Tianjiao QIAO Shiyan MA Xi HE Pingli?
（State Key Laboratory of Animal Nutrition，College of Animal Science and Technology，China Agricultural University，Beijing 100193，China）

?Corresponding author，professor，E?mail：hepingli＠cau．edu．cn

Abstract：This experiment was conducted to determine the content of main soybean antinutritional factors（gly?cinin，β?conglycinin and trypsin inhibitor）and the content of sucrose，raffinose and stachyose in soybean used the competitive indirect enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）method and chromatographic method．The contents of glycinin，β?conglycinin and trypsin inhibitor in 257 soybean products were detected and ana?lyzed by ELISA reagent kits．A high sensitivity and accurate detection system for the sucrose，raffinose and stachyose was established which used ion chromatography，and the content of oligosaccharide in 92 soybean products were detected and analyzed．The results showed that the contents of glycinin，β?conglycinin and tryp?sin inhibitor in fermented soybean meal，extruded soybean，soybean protein concentrate and soybean protein i?solate were lower than those in the others．The ion chromatography method which used for detected the su?crose，raffinose and stachyose had high sensitivity and accurate and good repeatability，and suiTable for detec?ted the oligosaccharide in soybean．The contents of sucrose，raffinose and stachyose in fermented soybean meal and soybean protein isolate were lower than those in the others．These data of main soybean antinutritional fac?tors in soybean products with different processing technology can be useful for the high efficient utilization of soybean in feeds for livestock．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（1）：221?229］

Key words：ELISA；ion chromatography；antinutritional factor；soybean products

通信作者：?賀平麗，研究員，博士生導(dǎo)師，E?mail：hepingli＠cau．edu．cn

作者簡介：周天驕（1989—），男，河南三門峽人，博士研究生，從事動物營養(yǎng)與飼料安全研究。E?mail：ztj＿cau0116＠outlook．com

基金項目：國家自然科學(xué)基金青年項目（31101745）

收稿日期：2014－08－13

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．01．027

文章編號：1006?267X（2015）01?0221?09

文獻標識碼：A

中圖分類號：S816．17