張愛民唐 玲尹 佳肖偉偉?（．中國食品集團(tuán)公司，北京0080；．成都美溢德生物技術(shù)有限公司，成都60）

大豆酶解蛋白對仔豬生長性能、礦物質(zhì)利用及消化道健康的影響

張愛民1唐 玲2尹 佳2肖偉偉2?
（1．中國食品集團(tuán)公司，北京100801；2．成都美溢德生物技術(shù)有限公司，成都610222）

摘 要：本試驗(yàn)旨在研究大豆酶解蛋白（ESM）對仔豬生長性能、礦物質(zhì)利用及消化道健康的影響。試驗(yàn)將120頭“杜長大”（DLY）仔豬［（10．79±1．59）kg］隨機(jī)分為6個(gè)組，每個(gè)組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭豬。6個(gè)組分別飼喂19%粗蛋白質(zhì)（CP）飼糧、18%CP飼糧和在18%CP飼糧基礎(chǔ)上分別用1．0%、1．5%、2．0%、2．5%ESM等量替換玉米的飼糧。試驗(yàn)期為36 d。結(jié)果表明：1）與18%CP組對比，18%CP＋1．0%和1．5%ESM組仔豬平均日采食量、平均日增重提高，但無顯著差異（P＞0．05）；18%CP＋1．5%ESM組飼糧有機(jī)物和CP、粗灰分、鈣和磷表觀消化率顯著提高（P＜0．05）；18%CP＋1．0%和2．0%ESM組骨骼鈣、磷含量顯著提高（P＜0．05）；18%CP＋2．0%ESM組空腸、18%CP＋2．5%ESM組回腸絨毛高度顯著提高（P＜0．05），18%CP＋2．0%ESM組十二指腸和空腸的絨毛高度／隱窩深度（V／C）顯著增加（P＜0．05）；18%CP＋1．5%ESM組血清二胺氧化酶（DAO）活性極顯著降低（P＜0．01），回腸黏膜分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量顯著提高（P＜0．05）；盲腸、結(jié)腸乳酸桿菌數(shù)量和乳酸桿菌／大腸桿菌顯著提高（P＜0．05）。2）與19%CP組對比，18%CP＋1．5%ESM組平均日采食量、平均日增重和料重比無顯著差異（P＞0．05）；飼糧干物質(zhì)、有機(jī)物、CP、粗灰分、磷表觀消化率顯著提高（P＜0．05）；血清和骨骼中鈣含量顯著提高（P＜0．05）；血清DAO活性顯著降低（P＜0．05）；盲腸和結(jié)腸中乳酸桿菌數(shù)量、乳酸桿菌／大腸桿菌極顯著提高（P＜0．01）。綜上，飼糧添加1．0%～1．5%ESM一方面可以促進(jìn)腸道絨毛發(fā)育、維持腸道結(jié)構(gòu)完整、優(yōu)化腸道菌群，從而保證仔豬消化道健康；另一方面可以提高仔豬對鈣、磷的吸收與沉積，從而促進(jìn)骨骼生長發(fā)育。

關(guān)鍵詞：大豆酶解蛋白；仔豬；生長性能；礦物質(zhì)利用；消化道健康

大豆蛋白是豬飼糧主要的蛋白質(zhì)原料，常見仔豬飼糧中總用量達(dá)到15%～20%［1］。但大豆蛋白分子質(zhì)量大，需經(jīng)過仔豬胃腸道復(fù)雜的消化過程才能被吸收利用［2－3］；另外，其抗?fàn)I養(yǎng)因子含量高，極易損害仔豬腸道健康［4－5］。因此，大豆蛋白在仔豬上的消化利用率低，成為影響仔豬飼糧蛋白質(zhì)利用效率的主要因素，使仔豬的生長受到抑制。研究發(fā)現(xiàn)，將大豆蛋白降解不僅可以提高大豆蛋白的可消化性［5－7］，還能產(chǎn)生部分大豆活性肽［7－8］。肽在動物體內(nèi)具有以下功能：1）促進(jìn)氨基酸吸收，加速蛋白質(zhì)合成［9－10］；2）提高礦物元素利用效率［11－13］；3）促進(jìn)腸道生長發(fā)育，維持腸道健康［14］等。因此，飼糧應(yīng)用大豆蛋白降解物能夠提高仔豬生長性能［15－18］，提高飼糧鈣（Ca）、磷（P）的表觀消化率［19－21］，促進(jìn)腸道絨毛發(fā)育［20，22－23］等。

目前，大豆蛋白降解以發(fā)酵［5］或酶解［7］工藝生產(chǎn)，降解程度主要通過酸溶蛋白（分子質(zhì)量＜2 000 u）和抗?fàn)I養(yǎng)因子含量評價(jià)，從而進(jìn)一步判斷其可消化利用性；但由于生產(chǎn)工藝條件不同，產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊［16－27］。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，市場以發(fā)酵大豆蛋白為主，僅有部分酶解大豆蛋白，其產(chǎn)物中酸溶蛋白含量低于10%，抗?fàn)I養(yǎng)因子清除率低于50%，且鮮有功能肽的報(bào)告［28］。因此，提高大豆蛋白降解物中肽含量，降低抗?fàn)I養(yǎng)因子，增加功能肽是提高大豆蛋白利用的關(guān)鍵。根據(jù)豬生理需求，結(jié)合大豆蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，經(jīng)組合液態(tài)酶解形成的大豆酶解蛋白（enzymolytic soybean meal，ESM），其酸溶蛋白含量達(dá)到28%以上，抗?fàn)I養(yǎng)因子清除率90%以上，同時(shí)富含腸道修復(fù)和抗氧化的功能肽。它不僅為仔豬提供了直接吸收、高效沉積的氮，同時(shí)，還可以提高仔豬的消化吸收能力，從而改善生長性能。本試驗(yàn)旨在仔豬飼糧中添加不同水平的ESM，探索ESM最適添加水平，研究ESM對仔豬礦物質(zhì)利用和消化道健康的影響，為生產(chǎn)應(yīng)用提供理論參考依據(jù)。

1　試驗(yàn)材料與方法

1．1 試驗(yàn)材料

ESM由成都美溢德生物技術(shù)有限公司（商品名“富力肽”）提供。ESM采用大豆蛋白為原料，經(jīng)組合液態(tài)酶解工藝生產(chǎn)，粗蛋白質(zhì)（CP）含量在45%以上，使用三氯乙酸沉淀法測定酸溶蛋白即小肽含量在28%以上（其中二肽和三肽占小肽的87%以上），同時(shí)富含部分生物活性肽，原料中抗?fàn)I養(yǎng)因子被有效清除。ESM營養(yǎng)成分與抗?fàn)I養(yǎng)因子組成見表1。

表1　大豆酶解蛋白營養(yǎng)成分與抗?fàn)I養(yǎng)因子組成Table 1 Composition of nutrients and anti?nutritional factors of ESM

1．2 試驗(yàn)動物與飼糧

試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇120頭體重為（10．79±1．59）kg健康“杜長大”（DLY）仔豬，隨機(jī)分為6個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭。6個(gè)組分別飼喂飼糧1～6。飼糧1（19%CP）以進(jìn)口魚粉、豆粕、膨化全脂大豆為主要蛋白質(zhì)源，豆油為主要脂肪源，并添加維生素和礦物元素預(yù)混料配制而成。飼糧2（18%CP）在飼糧1的基礎(chǔ)上降低1%CP，通過調(diào)整蛋白質(zhì)原料和能量原料的用量，保證營養(yǎng)物質(zhì)供給平衡。飼糧3～6在飼糧2的基礎(chǔ)上分別以1．0%、1．5%、2．0%、2．5%的ESM替代等量玉米（表2）。

1．3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)地點(diǎn)在四川成都新益洲養(yǎng)殖有限公司。每日飼喂4次（07：00、12：00、16：00、20：00），每天07：00飼喂前記錄余料量之后清干凈料槽再飼喂。每晚飼喂后，根據(jù)當(dāng)日投喂量估算第2天采食量并將料稱好放于相應(yīng)的料桶中。每天觀察仔豬的采食情況，如果有突發(fā)異常情況使采食下降，及時(shí)找出原因并采取相應(yīng)措施。飼養(yǎng)期準(zhǔn)確記錄各重復(fù)的體重。其他飼養(yǎng)管理按照養(yǎng)殖場正常程序進(jìn)行。試驗(yàn)期共計(jì)36 d。

1．4 樣品采集和處理

飼料樣：配制飼糧時(shí)，6個(gè)組的飼糧在每袋相同位置各取150 g，混勻后按四分法收集飼料樣，－20℃保存，用于測定水分、有機(jī)物、粗灰分、CP、Ca、P、酸不溶灰分含量。

糞樣：飼養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行到第3周開展為期4 d的消化試驗(yàn)。采用內(nèi)源指示劑法，用酸不溶灰分為指示劑，部分收糞。消化試驗(yàn)期間每天早、中、晚喂料后收集新鮮未污染糞樣，按照糞樣重量5%比例加入10%濃鹽酸。以重復(fù)為單位，各重復(fù)試驗(yàn)豬群的糞樣混勻，取樣10%，在65℃烘箱中烘至恒重，室溫下回潮24 h，稱重，記錄，粉碎過40目篩，裝密封袋保存于－20℃，用于測定水分、有機(jī)物、粗灰分、CP、Ca、P、酸不溶灰分含量。

表2　試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets（air?dry basis）　%

血清樣：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選1頭豬進(jìn)行空腹采血，用真空采血管從前腔靜脈采非抗凝血10 mL，室溫下傾斜放置30 min，3 500 r／min離心10 min后，分離血清，置于－20℃冷凍保存，用于血清二胺氧化酶（DAO）活性和Ca、P含量測定。

內(nèi)臟樣：飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，禁食12 h后稱重。在屠宰前1 h喂料，每個(gè)重復(fù)選取1頭中等體重豬只進(jìn)行放血處死。迅速打開腹腔分離及結(jié)扎腸段將十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸分段取下（所有豬只取相同位置）。采集盲腸和結(jié)腸食糜，立即進(jìn)行菌群數(shù)量測定。取十二指腸、空腸、回腸中段約3 cm腸段放入4%甲醛溶液中做組織切片測定絨毛高度和隱窩深度。取左側(cè)股骨測定骨骼中Ca、P含量。將采集的樣品液氮迅速冷凍，再轉(zhuǎn)入－20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1．5 測定指標(biāo)及方法

1．5．1 生長性能

試驗(yàn)期間每日記錄給料量和余料量，計(jì)算采食量。試驗(yàn)開始前1天和試驗(yàn)結(jié)束前1天，豬空腹12 h稱重，計(jì)算平均日采食量、平均日增重及料重比。

平均日增重（ADG，kg／d）＝（試驗(yàn)結(jié)束體重－試驗(yàn)初始體重）／試驗(yàn)天數(shù)；

平均日采食量（ADFI，kg／d）＝（試驗(yàn)期內(nèi)給料量－試驗(yàn)期內(nèi)余料量）／試驗(yàn)天數(shù)；

料重比（F／G）＝平均日采食量／平均日增重。

1．5．2 營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率

飼料和糞便中CP、粗脂肪、粗灰分含量的測定參照張麗英主編《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)（第2版）》；Ca含量參照GB／T 6436—2002用乙二胺四乙酸（EDTA）絡(luò)合滴定法測定；P含量參照GB／T 6437—2002用鉬黃比色法測定。酸不溶灰分含量按照GB／T 23742—2009。某營養(yǎng)物質(zhì)消化率按以下公式計(jì)算：

某營養(yǎng)物質(zhì)消化率（%）＝100－100×b×c／（a×d）。

式中：a為飼料中某營養(yǎng)物質(zhì)含量（%）；b為糞中某營養(yǎng)物質(zhì)含量（%）；c為飼料中酸不溶灰分含量（%）；d為糞中酸不溶灰分含量（%）。

1．5．3 血清和股骨Ca、P含量

血清Ca、P含量測定均采用南京建成生物工程研究所檢測試劑盒，Ca含量采用甲基百里香酚藍(lán)比色法，P含量采用磷鉬酸法。

股骨的前處理參照Gao等［29］的方法進(jìn)行，股骨經(jīng)蒸煮、去肉和筋腱，烘干后再在乙醇∶苯（2∶1）混合液中浸泡7 d后脫脂，于105℃烘干到恒重后稱得脫脂干股骨重，繼而在550℃灰化后稱得粗灰分重，股骨Ca、P含量與飼料和糞便Ca、P含量測定方法相同。

1．5．4 腸道絨毛高度和隱窩深度

將甲醛溶液固定的十二指腸、空腸、回腸腸段用酒精脫水后，再用石蠟切片包埋，切片厚度6 μm，蘇木素－伊紅（HE）染色。采用圖像分析處理系統(tǒng)，每個(gè)樣品觀察3張不連續(xù)性切片（保存相片）。每個(gè)樣品各測10個(gè)絨毛高度和隱窩深度，測量后統(tǒng)計(jì)其平均值，計(jì)算絨毛高度／隱窩深度（V／C）。

1．5．5 腸道分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量和血清DAO活性

回腸黏膜sIgA含量、血清DAO活性使用南京建成生物工程研究所檢測試劑盒，sIgA含量用酶聯(lián)免疫法、DAO活性用酶解法測定。

1．5．6 盲結(jié)腸乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量

乳酸菌數(shù)量測定用MRS培養(yǎng)基，大腸桿菌數(shù)量測定用伊紅－美藍(lán)培養(yǎng)基。乳酸菌、大腸桿菌數(shù)量的測定采用點(diǎn)種法。首先用滅菌生理鹽水對食糜進(jìn)行倍比稀釋；然后每個(gè)樣品取3個(gè)稀釋度點(diǎn)樣，每個(gè)稀釋度點(diǎn)3個(gè)重復(fù)，取其平均值作為最終結(jié)果。培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，分別對其進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，結(jié)果以lg（CFU／g）表示。

1．6 數(shù)據(jù)處理分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)先采用Excel 2007處理，再采用SPSS 17．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。試驗(yàn)2～6組采用（one?way ANOVA）單因素方差分析，差異顯著者采用Duncan氏法多重比較檢驗(yàn)；試驗(yàn)第1組和第4組采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。以P＜0．05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2　結(jié) 果

2．1 ESM對仔豬生長性能的影響

從表3可知，與18%和19%CP組相比，添加ESM的18%CP飼糧對仔豬增重、平均日采食量和平均日增重的影響差異均不顯著（P＞0．05），但在18%CP＋1．0%和1．5%ESM組仔豬增重、平均日采食量和平均日增重都高于其他組。

2．2 ESM對飼糧營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

從表4可知，與18%組相比，ESM顯著提高了飼糧干物質(zhì)、有機(jī)物、CP、粗灰分表觀消化率（P＜0．05），當(dāng)ESM添加到1．5%時(shí)達(dá)到最大值。與19%CP組相比，18%CP＋1．5%ESM組干物質(zhì)、有機(jī)物、CP、粗灰分表觀消化率顯著提高（P＜0．05）。

與18%CP組對比，18%CP＋1．5%和2．0% ESM組飼糧Ca表觀消化率顯著提高（P＜0．05），18%CP＋1．0%、1．5%和2．0%ESM組飼糧P表觀消化率顯著提高（P＜0．05）。與19%CP組相比，18% CP＋1．5%ESM組顯著提高了飼糧P表觀消化率（P＜0．05）。

表3　大豆酶解蛋白對仔豬生長性能的影響Table 3 Effects of ESM on growth performance of piglets

表4　大豆酶解蛋白對仔豬飼糧營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響Table 4 Effects of ESM on the apparent digestibility of dietary nutrients of piglets　%

2．3 ESM對仔豬血清Ca、P含量和骨骼粗灰分、Ca、P含量的影響

從表5可知，隨ESM添加水平增加，血清Ca、P先增后減，其中18%CP＋1．5%和2．0%ESM組Ca含量高于其他組，而18%CP＋1．0%ESM組P含量高于其他組，但與18%CP組差異不顯著（P＞0．05）。與19%CP組相比，18%CP＋1．5%ESM組顯著提高了血清Ca含量（P＜0．05）。

骨骼粗灰分、Ca、P含量隨ESM添加水平增加而先增后減，與18%CP組相比，18%CP＋1．0%和2．0%ESM組顯著提高了Ca、P含量（P＜0．05）。與19%CP組相比，18%CP＋1．5%ESM組骨骼Ca含量顯著提高（P＜0．05），粗灰分、P含量無顯著差異（P＞0．05）。

2．4 ESM對仔豬腸道絨毛高度、隱窩深度及V／C的影響

從表6可知，與18%CP組相比，ESM對十二腸絨毛高度無顯著影響（P＞0．05），但18%CP＋2．0%ESM組空腸、18%CP＋2．5%ESM組回腸絨毛高度顯著提高（P＜0．05）；ESM對仔豬各小腸道隱窩深度無顯著影響（P＞0．05）。仔豬各小腸道V／C隨ESM呈先增后減趨勢，與18%CP組相比，18%CP＋2．0%ESM組十二指腸和空腸的V／C顯著增加（P＜0．05），18%CP＋1．5%ESM組回腸V／C顯著增加（P＜0．05）。與19%CP組相比，18%CP＋1．5%ESM組十二指腸絨毛高度顯著降低（P＜0．05），但各腸道隱窩深度和V／C無顯著變化（P＞0．05）。

2．5 ESM對仔豬血清DAO活性和回腸黏膜sIgA含量的影響

從表7可知，與18%CP組對比，18%CP＋1．5%、2．0%和2．5%ESM組顯著降低了血清DAO含量（P＜0．05），其中18%CP＋1．5%ESM組極顯著降低（P＜0．01）?；啬c黏膜sIgA含量隨ESM添加水平增加而提高，與18%CP組對比，18%CP＋1．5%、2．0%和2．5%ESM組回腸黏膜sIgA含量顯著提高（P＜0．05）。與19%CP組相比，18%CP＋ 1．5%ESM組DAO活性顯著降低（P＜0．05）。

表5　大豆酶解蛋白對仔豬血清Ca、P含量和骨骼粗灰分、Ca、P含量的影響Table 5 Effects of ESM on the contents of Ca and P in serum and ash，Ca and P in bone of piglets　 mmol／L

表6　大豆酶解蛋白對仔豬腸道絨毛高度、隱窩深度及V／C的影響Table 6 Effects of ESM on villus height，crypt depth and the ratio of villus height to crypt depth in intestines of piglets

表7　大豆酶解蛋白對仔豬血清二胺氧化酶活性、回腸黏膜分泌型免疫球蛋白A含量的影響Table 7 Effects of ESM on DAO in serum and sIgA in ileum mucosa of piglets

2．6 ESM對仔豬盲腸和結(jié)腸菌群的影響

從表8可知，與18%CP組相比，ESM可提高盲腸、結(jié)腸乳酸桿菌數(shù)量及乳酸桿菌／大腸桿菌，其中18%CP＋1．5%、2．0%和2．5%ESM組均達(dá)到顯著水平（P＜0．05）。與18%CP組相比，18%CP＋ 1．0%和1．5%ESM組盲腸、結(jié)腸大腸桿菌數(shù)量無顯著差異（P＞0．05）。與19%CP組相比，18%CP＋1．5%ESM組盲腸和結(jié)腸乳酸桿菌數(shù)量、乳酸桿菌／大腸桿菌極顯著提高（P＜0．01）。

表8　大豆酶解蛋白對仔豬盲腸和結(jié)腸菌群的影響Table 8 Effects of ESM on microflora in cecum and colon of piglet

3　討 論

3．1 ESM提高仔豬生長性能

ESM通過改善仔豬飼糧營養(yǎng)成分表觀消化率來提高仔豬采食量和增重。本試驗(yàn)中，降低飼糧1%CP同時(shí)添加1．5%ESM可以顯著提高仔豬飼糧有機(jī)物和CP表觀消化率，從而提高平均日采食量、平均日增重，但差異不顯著。Sun等［18］用2%酶解豆粕（酸溶蛋白含量20．35%）替代1．2%魚粉，飼糧保持等能等氮，仔豬平均日增重提高了16．29%、平均日采食量提高了15．83%。Zhou等［16］在仔豬飼糧添加3%酶解豆粕（酸溶蛋白含量24．57%）平均日增重提高了41．4%。付曉等［19］在仔豬飼糧使用7%酶解豆粕（酸溶蛋白含量14．11%）等量替代豆粕，飼糧蛋白質(zhì)水平提升了0．44%，平均日增重、平均日采食量分別提高了72．52、61．14 g／d，料重比降低了8．86%。以上研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果相似，但改善幅度有差異，這可能有2方面原因。第一，不同工藝條件生產(chǎn)的酶解蛋白中肽含量和組成不同，抗?fàn)I養(yǎng)因子含量有差異。本試驗(yàn)采用組合液態(tài)酶解工藝，酸溶蛋白含量28%，比以上研究物質(zhì)肽含量高，因此，生產(chǎn)中使用量低于其他研究也可達(dá)到較好生產(chǎn)效果。第二，使用方案不同。其他研究直接添加或部分替代豆粕、魚粉等蛋白質(zhì)原料，提高了飼糧CP水平，而本試驗(yàn)降低CP水平增加ESM，以肽形式提供氮源。Gibert等［28］研究發(fā)現(xiàn)，二肽、三肽具有吸收速度快、耗能低，能夠消除與游離氨基酸吸收之間競爭的特性，肽可提高動物對蛋白質(zhì)吸收利用；另外，李碩［30］研究發(fā)現(xiàn)，大豆產(chǎn)生的小分子肽具有生物活性，增強(qiáng)動物消化功能，提高飼料轉(zhuǎn)化利用率。本次試驗(yàn)結(jié)果表明，降低飼糧1%CP同時(shí)添加1．0%～1．5%ESM可以提高仔豬生長性能。

3．2 ESM促進(jìn)仔豬對礦物質(zhì)的利用

飼糧礦物質(zhì)的表觀消化率反映機(jī)體對Ca、P的消化吸收程度，礦物質(zhì)進(jìn)入血液后參與合成和分解代謝；血清Ca、P含量反映機(jī)體Ca、P代謝動態(tài)狀況；骨骼粗灰分、Ca和P含量反映機(jī)體對Ca、P沉積能力［29］。ESM通過提高血清和骨骼粗灰分、Ca、P含量證實(shí)了仔豬對飼糧粗灰分、Ca、P利用程度改善；降低1%CP同時(shí)添加ESM可以提高飼料Ca利用。結(jié)果表明，ESM促進(jìn)了仔豬對礦物質(zhì)利用。付曉等［26］在仔豬飼糧使用7%酶解豆粕，飼糧Ca和P表觀消化率分別提高了34．99% 和25．04%。王石等［23］選擇25日齡斷奶仔豬，在斷奶后1～21 d使用1．5%谷朊粉酶解物等比例替代血漿蛋白粉，仔豬飼糧Ca消化率提高了10．30%。體外試驗(yàn)證實(shí)，植物蛋白降解物中肽能與Ca、Fe、鋅（Zn）等形成螯合物，如大豆分離蛋白酶解物和大米蛋白酶解物可與Ca、Zn等離子螯合［11－13］，從而促進(jìn)動物對礦物質(zhì)吸收利用。因此，ESM促進(jìn)礦物質(zhì)利用與肽具有螯合礦物質(zhì)特性有關(guān)［11－13］，一方面ESM含有部分螯合形式的Ca有利于吸收，另一方面ESM中肽與飼糧中礦物質(zhì)螯合，促進(jìn)飼糧礦物質(zhì)利用，在生產(chǎn)上表現(xiàn)為促進(jìn)仔豬骨骼發(fā)育。

3．3 ESM維持仔豬腸道健康

3．3．1 ESM促進(jìn)仔豬腸道發(fā)育

腸道正常發(fā)育是仔豬對飼糧消化吸收的基礎(chǔ)，小腸道絨毛高度、隱窩深度、V／C綜合反映小腸功能狀態(tài)［31－32］。ESM通過改善仔豬空腸、回腸絨毛高度和各小腸段隱窩深度來促進(jìn)腸道絨毛的發(fā)育；同時(shí)，通過降低飼糧蛋白質(zhì)水平同時(shí)添加1．5%ESM也提高了C／V，促進(jìn)腸道絨毛發(fā)育。表明，ESM可促進(jìn)腸道絨毛發(fā)育，提高仔豬對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收能力。這與王恬等［15］、張晶等［20］、潘翠玲等［22］研究報(bào)道基本一致，ESM促進(jìn)腸道發(fā)育可能是酶解產(chǎn)物中某些活性肽可作為腸黏膜上皮細(xì)胞發(fā)育的能源底物，有效促進(jìn)腸黏膜組織發(fā)育［33－34］。

3．3．2 ESM維持仔豬腸道結(jié)構(gòu)完整

仔豬腸道組織發(fā)育及功能發(fā)揮依賴于腸道絨毛細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性。DAO有95%以上分布于腸道黏膜細(xì)胞，當(dāng)腸道黏膜細(xì)胞通透性增加會進(jìn)入血液，血清DAO活性反映腸上皮細(xì)胞成熟度和完整性［35－36］。腸道黏膜組織特異性免疫應(yīng)答產(chǎn)物sIgA參與腸道局部免疫，在消化道黏膜防御機(jī)制中發(fā)揮重要作用［36］。仔豬飼糧添加1．5%和2．0% ESM降低血清DAO活性和提高sIgA含量，從而促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞完整性和腸道免疫；降低飼糧蛋白質(zhì)水平使用1．5%ESM也能降低仔豬血清DAO活性、提高回腸黏膜sIgA含量。表明，ESM促進(jìn)腸道消化吸收功能的正常發(fā)揮；同時(shí)，增強(qiáng)腸道免疫能力，減少腸道病原菌感染機(jī)會，從而保證腸道處于健康狀態(tài)。這可能與ESM含有部分大豆活性肽有關(guān)，活性肽提高腸道黏膜免疫，促進(jìn)sIgA分泌，減少病原微生物入侵，進(jìn)一步降低腸上皮細(xì)胞損傷［35－36］。

3．3．3 ESM優(yōu)化仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)

仔豬腸道微生態(tài)系統(tǒng)由多種菌群組成，主要存在于盲腸和結(jié)腸。研究發(fā)現(xiàn)，豬正常腸道菌群包括乳酸桿菌、雙歧桿菌屬等有益菌群，以及大腸桿菌屬等有害菌群［37］。動物腸道健康狀況下菌群處于平衡狀態(tài)，當(dāng)有害菌大量增殖占優(yōu)勢時(shí)，動物則會出現(xiàn)腹瀉等臨床癥狀。ESM提高仔豬盲腸、結(jié)腸乳酸桿菌數(shù)量和乳酸桿菌／大腸桿菌；降低飼糧蛋白質(zhì)水平同時(shí)添加1．5%ESM可提高盲腸、結(jié)腸乳酸桿菌數(shù)量和乳酸桿菌／大腸桿菌。表明，ESM能優(yōu)化腸道菌群結(jié)構(gòu)。本次研究結(jié)果與Zhou等［17］研究結(jié)果相似，這可能是由于飼糧添加ESM促進(jìn)了腸道發(fā)育，提高了飼糧營養(yǎng)物質(zhì)整體利用效率，減少了進(jìn)入大腸內(nèi)未消化營養(yǎng)物質(zhì)，從而優(yōu)化腸道后段的菌群結(jié)構(gòu)。

ESM中所含二肽、三肽和活性肽可通過促進(jìn)腸道絨毛發(fā)育、增強(qiáng)腸道黏膜免疫、減少腸上皮細(xì)胞損傷來提高仔豬消化能力，使飼糧有機(jī)物、CP表觀消化率提高；減少進(jìn)入后腸未消化的營養(yǎng)物質(zhì)，優(yōu)化腸道菌群結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步改善腸道內(nèi)環(huán)境。同時(shí)，通過螯合礦物質(zhì)元素，提高血清和骨骼Ca、P含量，從而提高飼糧Ca、P利用率，有利于仔豬骨骼發(fā)育。因此，ESM通過促進(jìn)骨骼發(fā)育和腸道健康，加快仔豬生長速度。

4　結(jié) 論

飼糧添加1．0%～1．5%ESM可促進(jìn)仔豬腸道絨毛發(fā)育、維持腸道結(jié)構(gòu)完整、優(yōu)化腸道菌群，從而保證消化道健康；可提高仔豬對Ca、P的吸收與沉積，從而促進(jìn)骨骼生長發(fā)育。

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（責(zé)任編輯 陳 燕）

Effects of Enzymolytic Soybean Meal on Growth Performance，Mineral Availability and Intestine Health of Piglets

ZHANG Aimin1TANG Ling2YIN Jia2XIAO Weiwei2?
（1．Chinese Food Group Co．，Ltd，Beijing 100801，China；2．Chengdu Mytech Biotechnology Co．，Ltd．，Chengdu 610222，China）

?Corresponding author，Ph．D．student，E?mail：xww＠m(xù)ytech．sc．cn

Abstract：This experiment was conducted to study the effects of enzymolytic soybean meal（ESM）on growth performance，mineral availability and intestine health of piglets．A total of 120 crossed?bred（Duroc× Landrace×Yorkshine）piglets with the initial body weight of（10．79±1．59）kg were randomly divided into six groups with 4 replicates per group and 5 piglets per replicate．Six group were fed diets with 19%crude protein （CP），18%CP，and 18%CP diets adding with 1．0%，1．5%，2．0%，2．5%ESM to replace the same amount of cron，respectively．The experiment lasted for 36 days．The results showed as follows：1）compared with the 18%CP group，average daily gain（ADG）and average daily feed intake（ADFI）of 18%CP＋1．0%and 1．5%ESM groups were increased but with no significant differences（P＞0．05）．Compared with the 18%CP group，apparent digestibility of organic matter，CP，ash，calcium and phosphorus of 18%CP＋1．5%ESM group were significantly increased（P＜0．05）．Compared with the 18%CP group，the contents of calcium，phosphorus in serum and bone of 18%CP＋1．0%and 2．0%ESM groups were significantly increased（P＜0．05）．Compared with the 18%CP group，villus height in jejunum of 18%CP＋2．0%ESM group and in ileum of 18%CP＋2．5%ESM group was significantly increased（P＜0．05），the ratio of villus height to crypt depth （V／C）in duodenum and ileum of 18%CP＋2．0%ESM group was significantly increased（P＜0．05）．Com?pared with the 18%CP group，the activity of diamine oxidase（DAO）in serum was significantly decreased of 18%CP＋1．5%ESM group（P＜0．01），and secretary immunoglobulin A（sIgA）content in ileum mucosa was significantly increased of 18%CP＋1．5%ESM group（P＜0．05）．Compared with the 18%CP group，Lactoba?cillus count and the ratio of Lactobacillus to Escherichia coli of caecum and colon were significantly increased （P＜0．05）．2）Compared with 19%CP group，the ADG，ADFI and the ratio of feed to gain（F／G）of 18% CP＋1．5%ESM group were no significant differences（P＞0．05），but apparent digestibility of dry matter，or?ganic matter，CP，ash，phosphorus of 18%CP＋1．5%ESM group were significantly increased（P＜0．05）．Compared with the 19%CP group，the content of calcium in serum and bone of 18%CP＋1．5%ESM group was significantly increased（P＜0．05），and the activity of DAO in serum was significantly decreased（P＜0．05）．Compared with the 19%CP group，Lactobacillus count and the ratio of Lactobacillus to Escherichia coli in caecum and colon of 18%CP＋1．5%ESM group were significantly increased（P＜0．01）．In conclusion，diet containing 1．0%to 1．5%ESM can promote the growth of intestinal villi，maintain the integrity of intestinal structure，optimize the microbial community structure to keep the healthy of digestive tract，and improve the absorption and sedimentation of calcium and phosphorus to promote bone growth of piglet．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（2）：541?550］

Key words：enzymolytic soybean meal（ESM）；piglet；growth performance；minerals availability；intestines health

通信作者：?肖偉偉，博士研究生，E?mail：xww＠m(xù)ytech．sc．cn

作者簡介：張愛民（1967—），男，北京人，工程師，本科，研究方向?yàn)閯游餇I養(yǎng)與飼料。E?mail：zhangaimin28＠sina．com

收稿日期：2014－08－29

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．02．026

文章編號：1006?267X（2015）02?0541?10

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

中圖分類號：S816．42；S828